DE19953339A1

DE19953339A1 - Secret fragments

Info

Publication number: DE19953339A1
Application number: DE19953339A
Authority: DE
Inventors: Artur Frank; Karl Jordan; Wilfried Hiebl
Original assignee: GOLDHAM PHARMA GmbH
Current assignee: GOLDHAM PHARMA GmbH
Priority date: 1999-11-05
Filing date: 1999-11-05
Publication date: 2001-05-17
Also published as: WO2001032196A1; AU1028001A

Abstract

The invention relates to pharmaceutical compositions containing certain secretin fragments that are particularly suitable for diagnosing and treating autism. Said pharmaceutical compositions preferably contain at least one of the peptides of formulae: His-Ser-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser (A), His-Ser-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr (B), His-Ser-Asp-Gly-Thr-Phe (C), His-Ser-Asp-Gly-Thr (D), His-Ser-Asp-Gly-(E), Gln-Arg-Leu-Leu-Gln-Gly-Leu-Val (F), Arg-Leu-Leu-Gln-Gly-Leu-Val (G), Leu-Leu-Gln-Gly-Leu-Val (H), Leu-Gln-Gly-Leu-Val (I) and Gln-Gly-Leu-Val (J).

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung bestimmter Secretinfragmente bei der Diagnostik und Behandlung bzw. Prävention von Autismus und autismusähnlichen Erscheinungen.The present invention relates to the use of certain Secret fragments in diagnostics and treatment or Prevention of autism and autism-like symptoms.

Sekretin ist ein Hormon, das durch die Mucosa des Duodenums und Jejunums abgeschieden wird. Die Aminosäuresequenz des Secretins ist bekannt und entspricht im Dreibuchstabencode dem Folgenden:
Secretin is a hormone that is secreted by the mucosa of the duodenum and jejunum. The amino acid sequence of secretin is known and corresponds to the following in the three-letter code:

Die stereochemische Konfiguration der nativen Version ist bei jedem der optisch aktiven Aminosäurereste L.The stereochemical configuration of the native version is at each of the optically active amino acid residues L.

Secretin stimuliert die pankreatische Sekretion von Wasser und Bicarbonat. Im Magen stimuliert Secretin die Pepsinsekre tion und inhibiert insbesondere die durch Nahrungsmittel stimulierte Gastrinfreisetzung.Secretin stimulates the pancreatic secretion of water and bicarbonate. Secretin stimulates pepsin secretion in the stomach tion and particularly inhibits those caused by food stimulated gastrin release.

In jüngster Zeit ist verschiedentlich berichtet worden, dass Secretin als Therapeutikum bei der Behandlung von Autismus eingesetzt werden kann, wobei vorzugsweise an die intravenöse Verabreichung von hohen Secretindosen gedacht wird (vgl. insb. WO 98/52593).There have been various reports recently that Secretin as a therapeutic in the treatment of autism can be used, preferably to the intravenous Administration of high doses of secretin is thought (cf. esp. WO 98/52593).

Autismus ist eine relativ tiefgreifende Entwicklungsstörung, der komplexe Störungen des zentralen Nervensystems zugrunde liegen - insbesondere im Bereich der Wahrnehmungsverarbeitung - und die bereits im Kindesalter beginnt. In ihrem Zentrum steht eine schwere Beziehungs- und Kommunikationsstörung. Die Auswirkungen der Störung behindern auf vielfältige Weise die Beziehungen zur Umwelt, die Teilnahme am Leben in der Gemein schaft und die Fähigkeit zur Eingliederung in die Gesell schaft, da sowohl kognitive als auch sprachliche, motorische, emotionale und interaktionale Funktionen betroffen sind.Autism is a relatively profound developmental disorder, the complex disorders of the central nervous system lie - especially in the area of perceptual processing - and it starts in childhood. In their center is a serious relationship and communication disorder. The The effects of the disorder hinder the Relationships with the environment, participation in life in the community society and the ability to integrate into society society, since cognitive as well as linguistic, motor, emotional and interactional functions are affected.

Dazu kommen zahlreiche Verhaltensauffälligkeiten, die beson ders für die Bezugsperson im alltäglichen Umgang mit den au tistischen Menschen sehr belastend sein können. Autistische Menschen sind in der Regel mehrfach behindert.There are also numerous behavioral problems, particularly for the caregiver in everyday dealings with the au statistical people can be very stressful. Autistic People are usually disabled several times.

Nach der internationalen Klassifikation der Erkrankungen der Weltgesundheitsorganisation werden, neben dem frühen Beginn, folgende Kennzeichen als Defintionsmerkmale für insbesondere frühkindlichen Autismus genannt:
According to the international classification of diseases of the World Health Organization, in addition to the early onset, the following characteristics are mentioned as defining features for especially early childhood autism:

1. Qualitative impairments of interpersonal Relationships;
2. Impairments in communication and Fantasy;
3. A clearly limited repertoire of activities and interests.

Beispielsweise beobachtet man bei Kindern mit Autismus, dass diese zunächst keine Geste, kein Lächeln, kein Wort ver stehen. Diese Kinder können zu anderen Personen, selbst zu den eigenen Eltern, kein normales Verhältnis herstellen. For example, in children with autism, one observes that this at first no gesture, no smile, no word stand. These children can go to other people, too your own parents, not establishing a normal relationship.

Anders ausgedrückt, diese Kinder ziehen sich in sich zurück und kapseln sich "autistisch" ab. Andererseits kann aber jede Veränderung in der Umwelt der Kinder zu starken Erregungen führen. Kinder mit Autismus können insbesondere nicht "normal" spielen und sie benutzen ihr Spielzeug oft in immer gleicher zweckentfremdeter Art und Weise, wobei sie Stereo typien entwickeln: z. B. Drehen und Kreiseln von Rädern, Rieseln mit Sand, Wedeln mit Fäden oder Papier usw.In other words, these children are withdrawing and isolate themselves "autistic". On the other hand, anyone can Change in children's environment to strong excitement to lead. Children with autism in particular cannot Play "normal" and they often use their toys in always same misappropriated way, being stereo develop types: e.g. B. turning and spinning wheels, Trickle with sand, fronds with threads or paper, etc.

Die wichtigsten Symptome der autistischen Störung sind in ihrem Ausprägungsgrad jeweils unterschiedlich. Menschen mit Autismus haben häufig vom Säuglingsalter an Probleme beim Essen und Schlafen und entwickeln selbststimulierende Ver haltensweisen. Solche Verhaltensweisen können sogar zu Eigen verletzungen führen. Insbesondere wird beobachtet, dass Autisten zwanghaft auf ganz bestimmte Ordnungen bestehen. Viele Autisten haben auch kein Gefahrenbewusstsein.The main symptoms of autistic disorder are in their degree of expression each different. People with Autism often has problems in infancy Eat and sleep and develop self-stimulating ver holdings. Such behaviors can even be your own cause injuries. In particular, it is observed that Autistic people compulsively insist on certain orders. Many autistic people are also not aware of danger.

Die intellektuelle Begabung von Menschen mit Autismus ist sehr unterschiedlich. Sie reicht von geistiger Behinderung bis zu normaler Intelligenz, wobei einige Autisten erstaun liche Teilleistungen im Rechnen, in technischen Disziplinen, in der Musik und auf anderen Gebieten erbringen können.The intellectual talent of people with autism is very different. It ranges from intellectual disabilities to normal intelligence, with some autistic people astonishing partial services in computing, in technical disciplines, in music and other fields.

Trotz umfangreicher Forschungen gibt es bislang noch kein schlüssiges Erklärungsmodell, das vollständig und überzeugend die Entstehungsursache der autistischen Störung belegen kann. Nach dem heutigen Stand ist Autismus nicht wirklich heilbar.Despite extensive research, there is still none conclusive explanatory model that is complete and convincing can prove the cause of the autistic disorder. As of today, autism is not really curable.

Allerdings wird in der zuvor erwähnten WO 98/52593 berichtet, dass die Behandlung autistischer Kinder mit Secretin viel versprechend ist. Dieses Dokument behauptet insbesondere einen Zusammenhang zwischen bestimmten gastrointenstinalen Fehlfunktionen bei autistischen Kindern und dem Einfluss von Secretin auf Hirnzellen. However, it is reported in the aforementioned WO 98/52593 that that treating autistic children with Secretin a lot is promising. This document claims in particular a relationship between certain gastrointestinal Malfunctions in autistic children and the influence of Secretin on brain cells.

So wird beispielsweise festgehalten, dass Secretin sowohl bei der Behandlung gastrointenstinaler Fehlfunktion bestimmter Autismusformen bei Kindern erfolgreich ist. Insbesondere zeigt sich bei der Behandlung autistischer Kinder mit chroni scher Diarrhö, dass es nach einer Injektion von Secretin zu einer beträchtlichen Steigerung der Flüssigkeitsproduktion durch den Pankreas kam. Bei weitergehenden klinischen Unter suchungen wurden dann auffällige Verhaltensverbesserungen festgestellt. Die Verabreichung des Secretins führte aber nicht zu einer Steigerung der Eigenproduktion, sondern es wurde eine vermehrte Serotoninproduktion festgestellt.For example, it is noted that Secretin both treatment of gastrointestinal dysfunction Forms of autism in children is successful. In particular is shown in the treatment of autistic children with chroni shear diarrhea that after an injection of Secretin too a significant increase in fluid production came through the pancreas. With further clinical sub Searches then became noticeable improvements in behavior detected. The administration of the secretin led not an increase in in-house production, but it increased serotonin production was found.

Neben diesen Befunden ist aber nicht bekannt, was die Wirksamkeit des Secretins tatsächlich ausmacht, d. h. welche Mechanismen involviert sind bzw. welche Wechselwirkungen oder Sekundärwirkungen (beispielsweise Serotoninausschüttung) für die beobachteten Wirkungen verantwortlich sind.In addition to these findings, it is not known what the Effectiveness of secretin actually d. H. Which Mechanisms are involved or which interactions or Secondary effects (e.g. release of serotonin) for the observed effects are responsible.

Herauszustellen ist in diesem Zusammenhang, daß im Stand der Technik bei der Autismusbehandlung lediglich das Peptid mit mindestens 27 Aminosäurebausteinen eingesetzt wurde. Die Verwendung von Fragmenten gleich welcher Größe wird nicht erwogen.In this context it should be emphasized that in the state of the Technique in autism treatment using only the peptide at least 27 amino acid components were used. The Use of fragments of any size will not considered.

Es ist allgemein anerkannt, dass Fragmente eines größeren Peptids mit pharmakologischen Wirkungen nicht zwangsläufig wieder gleiche oder auch nur ähnliche pharmakologische Eigen schaften haben. So wird in der DE 27 35 712 A1 berichtet, dass ein bestimmtes Secretinfragment mit mindestens 14 Aminosäuren wertvolle pharmakologische Eigenschaften haben soll, weshalb sich dieses Fragment beispielsweise als gastrisches antisekretorisches Mittel eignen soll. Im Zusammenhang mit der Darstellung dieses Fragments wurde aber auch festgehalten, dass diese spezielle Wirksamkeit über raschend sei, da man keinerlei biologische Wirksamkeit für Fragmente des Secretins allgemein erwarten konnte. It is generally accepted that fragments of a larger size Peptides with pharmacological effects are not necessarily again the same or only similar pharmacological properties have. For example, DE 27 35 712 A1 reports that a certain secret fragment with at least 14 Amino acids have valuable pharmacological properties should, which is why this fragment, for example, as gastric antisecretory agent. in the However, there was a connection with the representation of this fragment also noted that this particular effectiveness over is surprising since there is no biological effectiveness for Fragments of secretin generally could be expected.

Es wurde nun überraschend festgestellt, daß Fragmente des Secretins, gleich welcher Herkunft (Mensch, Schwein, Huhn, Affe), die 4-15 Aminosäurebausteine des aus 27 Aminosäuren bestehenden nativen Secretins aufweisen, eine besondere Eignung in einer Präparation zur Behandlung oder Prävention des Autismus haben. Diese Beobachtung ist in mehrfacher Hinsicht überraschend, da einerseits von den Fragmenten generell keine pharmakologische Wirksamkeit zu erwarten war und andererseits eine spezielle Wirksamkeit bei der Behandlung des Autismus überraschend ist.It has now surprisingly been found that fragments of the Secretins, of whatever origin (human, pig, chicken, Monkey), the 4-15 amino acid building blocks of 27 amino acids existing native secretins have a special Suitability in a preparation for treatment or prevention of autism. This observation is multiple In terms of surprise, because on the one hand of the fragments no pharmacological activity was generally expected and on the other hand a special effectiveness in Treatment of autism is surprising.

Bevorzugt werden insbesondere solche Fragmente des Secretins, die 4-6 Aminosäurebausteine der nativen Aminosäuresequenz aufweisen.Those fragments of secretin which the 4-6 amino acid building blocks of the native amino acid sequence exhibit.

Ganz besonders bevorzugt werden bestimmte Fragmente des Secretins, die im übrigen nicht mit den in der DE 27 35 712 A1 beschriebenen Fragment übereinstimmen. Diese Fragmente werden im Folgenden unter deren Abkürzungen (A), (B), (C), (D), (E), (F) und (G) näher beschrieben.Certain fragments of the Secretins, which are otherwise not the same as those in the DE 27 35 712 A1 fragment described match. These fragments are listed below under their abbreviations (A), (B), (C), (D), (E), (F) and (G) described in more detail.

Diese Peptidfragmente des Secretins haben jeweils die folgende Aminosäuresequenz:
His-Ser-Asp-Gly-Thr-Phe (A)
His-Ser-Asp-Gly-Thr (B)
His-Ser-Asp-Gly (C)
Leu-Leu-Gln-Gly-Leu-Val (D)
Leu-Gln-Gly-Leu-Val (E)
Gln-Gly-Leu-Val (F) und
Thr-Ser-Glu-Leu-Ser-Arg-Leu-Arg-Glu-Gly-Ala-Arg-Leu-Gln- Arg (G)These secretin peptide fragments each have the following amino acid sequence:
His-Ser-Asp-Gly-Thr-Phe (A)
His-Ser-Asp-Gly-Thr (B)
His-Ser-Asp-Gly (C)
Leu-Leu-Gln-Gly-Leu-Val (D)
Leu-Gln-Gly-Leu-Val (E)
Gln-Gly-Leu-Val (F) and
Thr-Ser-Glu-Leu-Ser-Arg-Leu-Arg-Glu-Gly-Ala-Arg-Leu-Gln-Arg (G)

Die stereochemische Konfiguration von jedem der optisch aktiven Aminosäurereste kann unabhängig voneinander D, L oder DL sein, wobei bevorzugt wird, dass diese jeweils L ist. The stereochemical configuration of each of the optically active amino acid residues can be D, L or independently DL, it being preferred that this is L in each case.

Die Aminosäuresequenz ist von links nach rechts vom N- Terminus zum C-Terminus hin angegeben.The amino acid sequence is from left to right of the N- Term given to the C-terminus.

Gegenstand der Erfindung ist somit eine pharmazeutische Zusammensetzung, die mindestens ein Peptidfragment, ausgewählt aus der Gruppe (A), (B), (C), (D), (E), (F), und (G) umfasst. Selbstverständlich können aber auch Mischungen der vorstehend genannten Peptide vorliegen, beispielsweise Mischungen der Peptide (A), (B), (C), (D), (E), (F), und (G), insbesondere die Mischungen (A), (B) oder (A), (C) oder (B), (C) oder (A), (B), (C), (D) oder (B), (C), (D), (E) oder (C), (D), (E), (F) usw..The invention thus relates to a pharmaceutical Composition comprising at least one peptide fragment, selected from the group (A), (B), (C), (D), (E), (F), and (G) includes. Of course, mixtures can also be used of the above peptides are present, for example Mixtures of the peptides (A), (B), (C), (D), (E), (F), and (G), in particular the mixtures (A), (B) or (A), (C) or (B), (C) or (A), (B), (C), (D) or (B), (C), (D), (E) or (C), (D), (E), (F) etc.

Das aus 15 Aminosäureeinheiten bestehende Peptid (G) kann um 1-3 Aminosäuren am C-Terminus oder N-Terminus verkürzt werden, ohne daß es zu einer wesentlichen Einschränkung der Wirksamkeit kommt. Als ein erfindungsgemäßes Peptid wird deshalb auch das folgende Fragment angesehen:
Thr-Ser-Glu-Leu-Ser-Arg-Leu-Arg-Glu-Gly-Ala-Arg-Leu.The peptide (G) consisting of 15 amino acid units can be shortened by 1-3 amino acids at the C-terminus or N-terminus without there being any significant restriction in effectiveness. The following fragment is therefore also regarded as a peptide according to the invention:
Thr-Ser-Glu-Leu-Ser-Arg-Leu-Arg-Glu-Gly-Ala-Arg-Leu.

Gegenstand der Erfindung sind aber auch Peptidfragmente, die sich aus der Aminosäuresequenz des Sekretins beim Schwein ergeben. Diese Sequenz entspricht im Dreibuchstabencode dem Folgenden:
The invention also relates to peptide fragments which result from the amino acid sequence of the secretin in pigs. This sequence corresponds to the following in the three-letter code:

Das Schweinesekretin unterscheidet sich vom menschlichen Sektretin dadurch, daß in den Aminosäurepositionen 15 und 16 andere Aminosäuren vorliegen (Asp und Ser). Erfindungsgemäße Peptidfragmente sich somit auch solche Peptide, die den Aminosäurepositionen 1 bis 4, 1 bis 5 und 1 bis 6 bzw. 22 bis 27, 23 bis 27 und 24 bis 27, sowie 7 bis 21 der vorstehenden Sequenz entsprechen.The pig secretin is different from the human Sektretin in that in amino acid positions 15 and 16 other amino acids are present (Asp and Ser). According to the invention Peptide fragments are thus also those peptides that the Amino acid positions 1 to 4, 1 to 5 and 1 to 6 or 22 to 27, 23 to 27 and 24 to 27, and 7 to 21 of the above Sequence.

Die erfindungsgemäßen Fragmente können in einfacher Weise aus dem natürlich vorkommenden Secretin menschlicher oder tierischer Herkunft gewonnen werden. Daneben bietet sich aber auch der Aufbau der Peptidkette aus den einzelnen Bausteinen an. Verfahren zum Aufbau von Peptiden sind allgemein geläufig, beispielsweise mittels eines automatischen Peptidsynthetisators. Verfahren zur Herstellung solcher Peptide werden unter anderem in der DE 27 35 712 A1 offenbart.The fragments according to the invention can be made in a simple manner the naturally occurring secretin human or animal origin. But it also offers also the structure of the peptide chain from the individual building blocks on. Methods of building peptides are common common, for example by means of an automatic Peptide synthesizer. Process for the production of such Peptides are described, inter alia, in DE 27 35 712 A1 disclosed.

Neben den Peptiden der vorstehend gezeigten Sequenzen (A) bis (G) eignen sich für die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zwecke selbstverständlich allgemein verträgliche Säureadditionssalze. Diese Säureadditionssalze können sich von einer Vielzahl von anorganischen und organischen Säuren ableiten wie beispielsweise Schwefelsäure, Phosphorsäure, Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Jodwasserstoffsäure, Salpetersäure, Sulfaminsäure, Zitronensäure, Milchsäure, Brenztraubensäure, Oxalsäure, Maleinsäure, Bernsteinsäure, Weinsäure, Zimtsäure, Essigsäure, Trifluoressigsäure, Benzoesäure, Salicylsäure, Gluconsäure, Ascorbinsäure und verwandte Säuren, die zum Zwecke der Bildung pharmazeutisch verträglicher Säureadditionssalze allgemein bekannt sind.In addition to the peptides of the sequences (A) to (G) are suitable for the pharmaceuticals according to the invention Purposes of course generally acceptable Acid addition salts. These acid addition salts can from a variety of inorganic and organic acids derive such as sulfuric acid, phosphoric acid, Hydrochloric acid, hydrobromic acid, hydroiodic acid, Nitric acid, sulfamic acid, citric acid, lactic acid, Pyruvic acid, oxalic acid, maleic acid, succinic acid, Tartaric acid, cinnamic acid, acetic acid, trifluoroacetic acid, Benzoic acid, salicylic acid, gluconic acid, ascorbic acid and related acids used for the purpose of education pharmaceutical compatible acid addition salts are generally known.

Die erfindungsgemäßen Präparationen können auf verschiedenstem Weg verabreicht werden, beispielsweise intravenös aber auch oral, intramuskular, intraartikular, intradermal, subkutan, rektal sowie durch Inhalation oder nasale Verabreichung.The preparations according to the invention can be based on can be administered in various ways, for example intravenously but also orally, intramuscularly, intra-articularly, intradermally, subcutaneously, rectally and by inhalation or nasal administration.

Übliche Dosierungen der erfindungsgemäßen Verbindungen sind 1 bis 1000 µg/kg (Körpergewicht) pro Tag. Usual dosages of the compounds according to the invention are 1 up to 1000 µg / kg (body weight) per day.

Es bietet sich auch an, die erfindungsgemäßen Verbindungen mit anderen pharmazeutischen Trägerstoffen zu kombinieren, beispielsweise mit solche Stoffen, die zu einer verzögerten Freisetzung im Körper führen.It also lends itself to the compounds of the invention to combine with other pharmaceutical carriers, for example with such substances that lead to a delayed Release in the body.

Claims

1. Pharmaceutical composition containing at least a 4-15 amino acid peptide fragment of the Secretins.

2. Pharmaceutical composition according to claim 1, characterized characterized in that the peptide comprises 4-6 amino acids.

3. Pharmaceutical composition according to one of the preceding claims containing at least one peptide of the following formula:
His-Ser-Asp-Gly-Thr-Phe (A)
His-Ser-Asp-Gly-Thr (B)
His-Ser-Asp-Gly (C)
Leu-Leu-Gln-Gly-Leu-Val (D)
Leu-Gln-Gly-Leu-Val (E)
Gln-Gly-Leu-Val (F) and
Thr-Ser-Glu-Leu-Ser-Arg-Leu-Arg-Glu-Gly-Ala-Arg-Leu-Gln-Arg (G)

4. Pharmaceutical composition according to claim 3, characterized characterized in that they contain at least one peptide of the peptides (A), (B) and (C) contains.

5. Composition according to claim 3, characterized in that they have at least one peptide of peptides (D), (E) and (F) contains.

6. Composition according to one of the preceding claims, characterized in that the stereochemical Configuration of the amino acid residues of the peptides is L.

7. Composition according to one of the preceding claims, characterized in that the or the peptide as Acid addition salt are present.

8. Use of at least one peptide as in one of the The preceding claims are defined for the treatment of autism.