DE2243688C3 - Verfahren zur Isolierung von Antithrombin - Google Patents

Verfahren zur Isolierung von Antithrombin

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Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Isolierung von Antithrombin aus Blut oder Blutprodukten.
Die Blutgerinnung ist ein komplizierter Prozeß, der zahlreiche Faktoren umfaßt Die Bildung eines Blutpfropfens kann durch eine Anzahl verschiedener Reize eingeleitet werden, von denen der häufigste die mechanische Zerstörung von einem oder mehreren Blutgefäßen ist Die Gerinnung oder Koagulation wird dann teilweise eingeleitet durch Kontaktaktiviemng bestimmter Faktoren im Blut und teilweise durch Gewebeaktivatoren, die aus der verletzten Stelle austreten. Die Zusammenballung von Blutklumpen oder -pfropfen, die gleichzeitig stattfindet, führt auch zur Einleitung der Blutgerinnung. Eine Reaktionskette wird eingeleitet, die schließlich zur Bildung eines Klumpens oder Gerinnsels an der Verletzungsstelle führt. Eine der letzten und wichtigsten Stufen bei der Bildung eines Fibrinpfropfens ist die Wirkung von Thrombin, einem Enzym, das bei der Blutgerinnung über Fibrinogen gebildet wird, wobei zwei kleine Peptidteile von dem Fibrinogen abgespalten werden, was zu einem modifizierten Fibrinogen führt, welches dann schnell vernetzt und einen Pfropfen bildet.
Um die Koagulationsneigung des Blutes zu regeln und zu verhindern, daß sich eine örtliche Koagulation ausbreitet und zu einer vollständigen intravaskulären Pfropfenbildung führt, sind verschiedene Substanzen im Blut vorhanden, die eine Hemmung der Koagulation bewirken. Einer der wichtigsten derartigen Inhibitoren ist An'jthrombin, ein Protein, das mit Thrombin reagiert und dieses inaktiviert. Derartig inaktiviertes Thrombin kann das Fibrinogen nicht mehr angreifen, und die Bildung von Pfropfen wird verhindert
Bei verschiedenen (Krankheits-)Zuständen wurde ein pathologisch verminderter Antithrombingehalt beobachtet, verbunden mit einer erhöhten Gefahr von Thrombose, z. B. nach größeren Operationen. Die Annahme ist begründet, daß eine Antithrombintherapie zur Behandlung derartiger Fälle wertvoll sein kann. Ein verminderter Antithrombingehalt hat sich auch in Verbindung mit der Anwendung bestimmter Steroide gezeigt.
Bisher wurde Antithrombin nur in Spuren isoliert und ist infolgedessen verhältnismäßig wenig bekannt. Die zur Isolierung angewandten Verfahren sind sehr kompliziert und haben zu sehr geringen Ausbeuten von 1 bis 2% geführt Das unten beschriebene Verfahren erlaubt die Extraktion von Antithrombin in Ausbeuten von über 90% im Eluat
Erfindungsgemäß wird zur Isolierung von Antithrombin aus Blutpiasma oder Blutprodukten das Antithrombin an einer Matrix, die ein vernetztes Dextransulfat, Dextransulfat-Agarose, Heparin-Agarose oder ChondroitinsuIfat-Agarose enthält, adsorbiert und daraus
ίο durch Gradient-Eluierung mit Hilfe eines Puffers mit zunehmender NaCl-Konzentration eluiert Vorteilhafte ArbeitsweisentfüridieuEluierung sind in den Unteransprüchen angegeben. Um große Mengen Antithrombin zu erhalten, hat es sich als günstig erwiesen, es von der Cohnfraktion FV (Verfahren 6) durch Zugäbe des Gels zu einer Lösung dieser Fraktion zu adsorbieren. Nach der Adsorption kann das Gel abfiltriert, gewaschen und eluiert werden. Nach Gelfiltration des Eluats übet ^indreidimensional vernetztes Polysaccharid auf Dextranbasis wurde ein vollständig reines Antithrombin erhalten.
Beispiele für als Adsorbentien geeignete Gele sind: vernetztes Dextransulfat, vernetztes Dextransulfat-Agarose, vernetzte Heparin-Agarose und vernetzte Chrondroitinsulfat-Agarose. Die vernetzten einzelnen Gele werden hergestellt durch Zugabe von Cyanbromid zu einer Lösung des Polysaccharide. Durch Einstellung des pH-Wertes auf ungefähr 11 tritt eine Vernetzung der Moleküle und Bildung des Gels ein. Die gemischten Gele werden erhalten durch Zusatz des sulfatisierten Polysaccharide zu einem Agarosegel und anschließende Zugabe von Cyanbromid bei pH 11. Derartige Gele sind leichter zu handhaben und führen zu höheren Fließgeschwindigkeiten als die einheitlichen Gele.
Im einzelnen wurden die in den Beispielen verwendeten Gele folgendermaßen hergestellt:
Gel A: Vernetztes Dextransulfat
Zu einer Lösung von 100 cm3 Dextransulfat (20 mg/ cm3) wurden 5 g BrCN zugegeben. Der pH-Wert wurde dann mit Hilfe von 5 m NaOH 7 min lang auf 11,0 eingestellt und das Gemisch unter Rühren über Nacht stehengelassen. Es bildete sich eine weiße, körnige, gelartige Paste.
Gel B: Vernetztes Dextransulfat-Agarose-Gel
Das Gel B wurde hergestellt durch Vermischen einer Lösung von 30 cm3 Dextransulfat (15 mg/cm3), 50 cm3 4%iger perlenförmiger polymerisierter Agarose und 1 g BrCn bei pH 11. Das Gemisch wurde 7 min unter Rühren stehengelassen und der pH-Wert durch kontinuierliche Zugabe von NaOH aufrechterhalten. Anschließend wurde die Zugabe von Alkalihydroxid abgebrochen, und der pH-Wert fiel innerhalb von 5 min auf 8,5. Es wurde über Nacht bei Raumtemperatur weitergerührt und dann das gebildete Gel gewaschen.
Gel C: Vernetztes Heparin-Agarose-Gel
Heparin-Agarose-Gel wurde, wie für das Dextransulfat Agarose-Gel beschrieben, hergestellt. An Stelle von Dextransulfat wurden 30 cm3 einer Heparinlösung verwendet (5000 lU/cm3).
Gel D: Vernetztes Chrondroitinsulfat-Agarose-Gel
Durch Vermischen von 250 mg Chondroitinsulfat Vl,
40 cm3 perlenförmiger polymerisierter 4%iger Agarose und 1 g BrCN bei pH 11, wurde Chrondroitinsulfat Agarose-Gel hergestellt Das Gemisch wurde 7 min bei pH 11 stehengelassen und der pH-Wert durch kontinuierliche Zugabe einer NaOH-Lösung auf diesem Wert gehalten. Nur eine kleine Menge Alkali war nötig, und nach 7 min wurde der pH-Wert vorsichtig durch Zugabe von Essigsäure auf 8,5 herabgesetzt Es wurde bei Raumtemperatur und einem pH-Wert von 8,5 über Nacht gerührt und anschließend das Gel gewaschen.
Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele näher erläutert:
Beispiel 1
Gel A. wurde in eine kleine Säule mit 5 mm 0 χ 8 cm gegeben und mit 0,02 m TRIS, 0,01 m Citrat und 0,15 m NaCl-Puffer, pH 8,5, äquilibriert 2 cm3 normales Plasma wurden durch die Säule gegeben. Nach dem Durchgang durch die Säule hatte das Plasma seine Koagulationsfähigkeit verloren. Die Säule wurde zunächst mit dem Originalpuffer gewaschen und dann durch stufenweise Erhöhung der Salzkonzentration auf 1 m NaCI eluiert Das Eluat enthielt ein Material, das nach der Dialyse gegen Phosphatpuffer die Koagulationszeit von normalem Plasma nach der Recalzifizierung von 3 auf 45 min verlängert Die immunologische Analyse zeigte das Vorhandensein von Antithrombin und einigen Lipoproteinen in dem Eluat
Beispiel 2
IV (Methode 6) vorhanden ist 135 g einer Fraktion IV Paste wurde in 41 Adsorptionspuffer gelöst und 500 cm3 Gel B wurden zugegeben. Das Gemisch wurde 1 h unter Kühlen langsam gerührt und anschließend die Lösung abdekantiert und das Gel mit Adsorptionspuffer gewaschen. Das Gel wurde in eine Ionenaustauschersäule gegeben und durch zunehmende Konzentrationen des NaCl des TRIS Puffers, pH 7,2 (0,5 m, 1 m, Ip m) stufenweise eluiert Das Eluat, das Lipoprotein und Anti-
thrombin enthielt, wurde durch Ültrazentrifugieren konzentriert und weiter durch Gelfiltration über ein dreidimensional vernetztes Polysaccharid auf Dextranbasis gereinigt Die Identifizierung und Reinheitsuntersuchung wurde mit Hilfe immunologischer und physikalfeeh-chemischer Verfahren durchgeführt
Beispiel 5
Eine Säule wurde mit Gel D beschickt und unter den gleichen Bedingungen, wie oben beschrieben, wurden 3 cm3 normales Plasma, das 1 :1 verdünnt war, durch die Säule gegeben. Anschließend konnte Ami thrombin mit dem in Beispiel 1 verwendeten Puffer aus dem Gel eluiert werden.
25
Adsorption von Plasma friit ver,* .tztem Dextransulfat-Agarose-Gel (B). Gradientoluierung.
Eine Säule wurde mit Gel B gefüLv Bei der Adsorption wurden 3 cm3 normales Plasma im Verhältnis 1 :1 mit dem Puffer (0,02 m TRIS; 0,01 m Citrat 0,15 m NaCl, pH 8,5) vermischt und durch die Säule geleitet Nach dem Durchgang durch die Säule wurde das Konzentrat auf 3 cm3 eingeengt und auf seine Koagulationsfähigkeit untersucht. Während des Durchgangs durch die Säule hatte das Plasma seine Koagulationsfähigkeit verloren und besaß ζ B. die Koagulationsfaktoren VIII und IX nicht mehr. Das adsorbierte Material wurde mit 0,02 TRIS und 0,01 Citrat (pH 73) mit einem Salzgradienten von 0,15 m NaCl desorbiert. Das Eluat entsprach ungefähr 2% des Ausgangsmaterials und bestand hauptsächlich aus zwei Komponenten einer Lipoproteinfraktion von Typ Prä-/?und Antithrombin HI. Die Identifizierung wurde durch immunologische und physikalische-chemisehe Verfahren durchgeführt.
Beispiel 3
Adsorption von Plasma mit Hilfe von vernetzten! Heparin-Agarose-Gel (C).
Das Gel wurde in eine Säule gegeben und der Versuch wie in Beispiel 2 durchgeführt Man erhielt ähnliche Ergebnisse wie in Beispiel 2.
Beispiel 4
Adsorption an Dextransulfat-Agarose-Gel von einem Plasmaproteinmaterial von der Cohnfraktion IV (Verfahren 6).
Stufenweise Eluierung. Gelfiltration.
Bei Anwendung immunologischer Verfahren kann gezeigt werden, daß Antithrombin in der Cohnfraktion

Claims (3)

Patentansprüche:
1. Verfahren zur Isolierung von Antithrombin aus Blutplasma oder Blutprodukten, dadurch gekennzeichnet, daß Antithrombin an einer Matrix, die ein vernetztes Dextransulfat, Dextransulfat-Agarose, Heparin-Agarose oder Chondroitinsulfat-Agarose enthält, adsorbiert und daraus das Antithrombin durch Gradient-Eluierung mit Hilfe eines Puffers mit zunehmender NaCl-Konzentration eluiert wird.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als Puffer eine Lösung von 0,02 sn TRIS und 0,01 m Citrat und NaCl zunehmender Konzentration verwendet.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man die Eluierung bei einem pH-Wert von 7,2 bis 8,5 durchführt
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ZA (1) ZA726024B (de)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3920625A (en) * 1973-06-19 1975-11-18 Kabi Ab Isolation of coagulation factors from biological material using cross linked sulfated, sulfonated carbohydrates
US4022758A (en) * 1973-06-19 1977-05-10 Ab Kabi Isolation of coagulation factors I and VIII from biological material
US4054557A (en) * 1974-05-15 1977-10-18 Ab Kabi Growth promoting polypeptides and preparation method
US4103685A (en) * 1976-01-05 1978-08-01 Lupien Paul J Method and apparatus for extravascular treatment of blood
NZ180199A (en) * 1976-03-04 1978-11-13 New Zealand Dev Finance Method of testing for the presence of elevated plasma liprotein concentration
NZ180198A (en) * 1976-03-04 1978-11-13 New Zealand Dev Finance Cationic ion exchanger with a cross-linked carbohydrate marix
US4087415A (en) * 1976-06-09 1978-05-02 William L. Wilson Antithrombin III
JPS597693B2 (ja) * 1978-01-07 1984-02-20 株式会社ミドリ十字 抗トロンビン製剤及びその製法
DE2916711A1 (de) 1979-04-25 1980-11-06 Behringwerke Ag Blutgerinnungsfaktoren und verfahren zu ihrer herstellung
US4278594A (en) * 1979-06-19 1981-07-14 David Amrani Process for separation and isolation of AHF, von Willebrand's ristocetin cofactor (VWF:RCF) and fibronectin from blood plasma
US4210580A (en) * 1979-06-19 1980-07-01 David Amrani Process for separation and isolation of AHF and fibronectin from blood plasma
SE422081B (sv) * 1979-08-22 1982-02-15 Ird Biomaterial Ab Sett att pavisa proteolytiska enzymer
US4446314A (en) * 1980-09-30 1984-05-01 Cutter Laboratories, Inc. Fractionation of heparin
US4386025A (en) * 1980-09-30 1983-05-31 Cutter Laboratories, Inc. Method of preparing antithrombin
DE3038163A1 (de) * 1980-10-09 1982-05-06 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Thrombininhibitor, seine herstellung und verwendung
FR2527222A1 (fr) * 1982-05-19 1983-11-25 Christine Fougnot Procede de separation et de purification des proteases et des antiproteases de la coagulation sanguine, ainsi que du complexe protease/antiprotease
US4632981A (en) * 1982-07-30 1986-12-30 Genentech, Inc. Human antithrombin III
CA1221307A (en) * 1982-12-02 1987-05-05 Nobutaka Tani Adsorbent and process for preparing the same
US4515714A (en) * 1983-03-09 1985-05-07 Juridicial Foundation, The Chemo-Semo-Sero-Therapeutic Research Institute Method for purification of hepatitis B virus surface antigen
AT379310B (de) * 1983-05-20 1985-12-27 Immuno Ag Verfahren zur herstellung eines antithrombin iii-heparin- bzw. antithrombin iii-heparinoidkonzentrates
AT379510B (de) * 1983-05-20 1986-01-27 Immuno Ag Verfahren zur herstellung einer faktor viii (ahf) -haeltigen praeparation
CA1237998A (en) * 1984-04-14 1988-06-14 Akihiro Ginnaga Method for purification of filamentous hemagglutinin
GB8505882D0 (en) * 1985-03-07 1985-04-11 Central Blood Lab Authority Purification of blood coagulation factor viii
DE3519011A1 (de) * 1985-05-25 1986-11-27 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Verfahren zur herstellung eines materials zur affinitaetschromatographie
US4656254A (en) * 1985-12-02 1987-04-07 Miles Laboratories, Inc. Method of preparing alpha-1-proteinase inhibitor and antithrombin III
AT399095B (de) * 1986-03-27 1995-03-27 Vukovich Thomas Dr Verfahren zur auftrennung von proteinen mittels gradientenelution und vorrichtung zur durchführung des verfahrens
US4749783A (en) * 1986-07-11 1988-06-07 Miles Laboratories, Inc. Viral inactivation and purification of active proteins
CA1341379C (en) 1988-04-28 2002-07-23 Welfide Corporation Purified antithrombin-iii and methods of producing the same
US5110907A (en) * 1989-08-01 1992-05-05 Alpha Therapeutic Corporation Factor viii complex purification using heparin affinity chromatography
US7045585B2 (en) * 1995-11-30 2006-05-16 Hamilton Civic Hospital Research Development Inc. Methods of coating a device using anti-thrombin heparin
US6562781B1 (en) * 1995-11-30 2003-05-13 Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc. Glycosaminoglycan-antithrombin III/heparin cofactor II conjugates
US6491965B1 (en) * 1995-11-30 2002-12-10 Hamilton Civic Hospitals Research Development, Inc. Medical device comprising glycosaminoglycan-antithrombin III/heparin cofactor II conjugates
US5989593A (en) * 1996-11-20 1999-11-23 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. Method for producing antithrombin-III, method for purifying it, and preparation containing it
AT405739B (de) 1997-09-19 1999-11-25 Immuno Ag Verfahren zur reinigung von antithrombin iii
WO2002058638A2 (en) * 2001-01-26 2002-08-01 The General Hospital Corporation Serpin drugs for treatment of hiv infection and method of use thereof
US8563693B2 (en) * 2001-01-26 2013-10-22 Acceleration Biopharmaceuticals, Inc. Method of treating human immunodeficiency virus infection in a mammal comprising administering heparin-activated antithrombin III
SE0203770D0 (sv) * 2002-12-19 2002-12-19 Biovitrum Ab Method of separation
AU2005277190B2 (en) 2004-08-20 2011-03-03 American National Red Cross Sequential protein isolation and purification schemes by affinity chromatography

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE366760B (de) * 1967-12-18 1974-05-06 J Sjoevall
DE1907738A1 (de) * 1969-02-15 1970-08-13 Bayer Ag Verfahren zur Abtrennung des Trypsin-Plasmin-Inhibitors vom Thrombin-Inhibitor in handelsueblichen Hirudinpraeparaten und in Hirudinrohpraeparaten

Also Published As

Publication number Publication date
NL7211953A (de) 1973-03-12
DK131128C (de) 1975-11-03
FR2154483B1 (de) 1977-01-14
IE36670L (en) 1973-03-08
HU165070B (de) 1974-06-28
DE2243688B2 (de) 1978-06-15
FI50583C (fi) 1976-05-10
IL39982A0 (en) 1972-09-28
CS172957B2 (de) 1977-01-28
US3842061A (en) 1974-10-15
GB1356229A (en) 1974-06-12
ES406199A1 (es) 1975-07-01
AU461865B2 (en) 1975-06-05
NL154118B (nl) 1977-08-15
NO135302C (de) 1977-03-23
PL83490B1 (de) 1975-12-31
IL39982A (en) 1974-11-29
AU4637372A (en) 1974-03-14
CA979805A (en) 1975-12-16
DK131128B (da) 1975-06-02
JPS5545528B2 (de) 1980-11-18
SU447876A3 (ru) 1974-10-25
SE392038B (sv) 1977-03-14
IE36670B1 (en) 1977-01-19
BE787284A (fr) 1972-12-01
FI50583B (de) 1976-02-02
ZA726024B (en) 1973-05-30
CH577829A5 (de) 1976-07-30
JPS4835017A (de) 1973-05-23
AT324549B (de) 1975-09-10
NO135302B (de) 1976-12-13
DE2243688A1 (de) 1973-03-22
FR2154483A1 (de) 1973-05-11

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