DE2931573C2

DE2931573C2 -

Info

Publication number: DE2931573C2
Application number: DE2931573A
Authority: DE
Inventors: Jean-Claude Prof. Reims Fr Jardillier; Yves Rilly La Montagne Fr Carpentier; Bernard Dr. Reims Fr Desoize
Original assignee: Dr Karl Thomae GmbH
Current assignee: Boehringer Ingelheim Pharma GmbH and Co KG
Priority date: 1979-08-03
Filing date: 1979-08-03
Publication date: 1988-11-24
Also published as: US4329346A; JPH0120130B2; DE2931573A1; NL8003299A; IL60726A; BE884611A; IL60726A0; ZA804713B; JPS5626816A

Description

Aus der Literatur ist bekannt, daß die Verbindung 2,6-Bis-(Di äthanolamino)-4-piperidino-pyrimido[5,4-d]pyrimidin und deren physiologisch verträgliche Säureadditionssalze aufgrund ihrer Hemmwirkung auf die Thrombozytenaggregation die Tumorzellhaftung am Gefäßendothel hemmt und somit die Metastasen-Bildung verhindert (siehe beispielsweise H. Gastphar et al. in Acta Med. Scand. 191, 269-271, 525 (1971) und Med. Welt 23, 606-608 (1972)).

Überraschenderweise wurde nun gefunden, daß 2,6-Bis-(Diäthanol amino)-4-piperidino-pyrimido[5,4-d]pyrimidin und seine physiologisch verträglichen Säureadditionssalze das Wachstum von Krebszellen, z. B. von Leukämiezellen, verhindert. Die Erfindung betrifft somit den durch den Anspruch gekennzeichneten Gegenstand.

Die Hemmwirkung auf das Wachstum, beispielsweise der Leukämiezellen, wurde wie folgt belegt:

1. Einfluß von 2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimido [5,4-d]pyrimidin auf die Vermehrung von L 1210-Tumorzellen in Zellkulturen

Unter geeigneten Zellkulturbedingungen zeigen L 1210-Zellen (Y. Carpentier et al., 1978) eine exponentielle Wachstumsrate und verdoppeln ihre Anzahl 2,23 (±0,21) mal je 24 Stunden (Mittelwert±SEM aus 16 Experimenten in Dreifachausführung).

Gibt man 2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimido [5,4-d]pyrimidin in einer Endkonzentration von 1×10^-4 Mol/l zu der Nährflüssigkeit der Zellkultur, so erreicht man eine verminderte Wachstumsrate. Diese beträgt dann 1,98 (±0,25) Zellverdoppelungen pro 24 Stunden (Mittelwert±SEM aus 6 Experimenten in Dreifachausführung). (Die 50%-Hemmdosis beträgt 2×10^-4 Mol/l).

Der Unterschied ist statistisch gesehen hoch signifikant (p=0,0002).

2. Cytotoxischer Effekt auf L 1210-Zellen in vitro

2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimido[5,4-d]pyrimidin in einer Endkonzentration von 1×10^-3 Mol/l tötet in einer Zellkultur L 1210-Tumorzellen ab. Dabei werden 5% der Zellen innerhalb von 4 Stunden abgetötet. Dieser Prozentsatz steigt schnell an auf einen Wert von 50% nach 8 Stunden und erreicht eine Absterbequote von 90% nach einem Inkubationszeitraum von 12 Stunden.

Die LD₅₀ für die 24-Stunden-Zellkultur beträgt 5×10^-4 M.

Aufgrund der guten Verträglichkeit von 2,6-Bis-(Diäthanolamino)- 4-piperidino-pyrimido[5,4-d]pyrimidin sind die zur Erzielung der gewünschten Hemmwirkung auf das Wachstum der Krebszellen, z. B. der Leukämiezellen, erforderlichen hohen Dosen ohne weiteres applizierbar. Beispielsweise beträgt die perorale akute Toxizität (LD₅₀) von 2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimido[5,4-d]pyrimidin

an der Maus465 mg/kg an der Ratte<3 g/kg am Meerschweinchen<3 g/kg

Die zur pharmazeutischen Anwendung erforderliche Tagesdosis beträgt 50 bis 100 mg/kg, also je nach dem Gewicht des zu behandelnden Menschen 1,6 bis 8 g, vorzugsweise jedoch 2 bis 6 g, verteilt auf 3 bis 4 Dosen. Die Einzeldosis beträgt somit 0,4 bis 2 g, vorzugsweise jedoch 0,5 bis 1,5 g, 3- bis 4mal täglich. Hierzu lassen sich 2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimi do[5,4-d]pyrimidin sowie seine physiologisch verträglichen Säureadditionssalze mit anorganischen oder organischen Säuren in die üblichen pharmazeutischen Zubereitungen wie Drag´es, Tabletten, Kapseln, Pulver, Lösungen, Ampullen, Suspensionen oder Zäpfchen zusammen mit üblichen Trägerstoffen und/oder Verdünnungsmitteln einarbeiten.

Die nachfolgenden Beispiele sollen die Erfindung näher erläutern:

Beispiel 1 Kapseln mit 400 mg 2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimido[5,4-d]pyrimidin Zusammensetzung

1 Kapsel enthält:

Wirksubstanz400 mg Maisstärke 80,0 mg Milchzucker 18,0 mg Magnesiumstearat 2,0 mg 500,0 mg

Herstellung

Die Bestandteile werden homogen gemischt und auf einer Kapselfüllmaschine in Hartgelatine-Steckkapseln Größe 00 abgefüllt, wobei das Kapselfüllgewicht laufend überprüft wird. Falls notwendig, werden die Kapseln anschließend noch poliert.

Kapselfüllung500 mg Kapselgröße00

Beispiel 2 Drag´es mit 500 mg 2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimido[5,4-d]pyrimidin

1 Drag´ekern enthält:

Wirksubstanz500 mg Milchzucker 50,0 mg Maisstärke 40,0 mg Polyvinylpyrrolidon 8,0 mg Magnesiumstearat 2,0 mg 600,0 mg

Herstellung

Wirkstoff, Milchzucker und Stärke werden gemischt und mit dem in Wasser gelösten Bindemittel gleichmäßig befeuchtet. Die granulierte Masse wird getrocknet, gesiebt und mit dem Schmiermittel vermischt. Die fertige Mischung wird zu Drag´ekernen verpreßt.
Stempel: 12 mm, rund bikonvex

Dragierung

Die oben beschriebenen Kerne werden in einem Dragierkessel mit einer Zuckerpaste bis 660 mg und anschließend mit Zuckersirup bis 680 mg dragiert.

Beispiel 3 Granulat mit 4 g 2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimido[5,4-d]pyrimidin pro Portion

Wirksubstanz4000,0 mg Maisstärke 500,0 mg Rohrzucker 500,0 mg 5000,0 mg

Herstellung

Wirkstoff und Maisstärke werden homogen gemischt und mit einer 70%igen Lösung des Zuckers in Wasser granuliert. Das Granulat wird getrocknet. Nach dem Absieben der Pulverbestandteile wird das Granulat in einem Dragierkessel mit Zuckersirup überzogen.

Beispiel 4 Ampullen mit 500 mg 2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimido[5,4-d]pyrimidin pro 10 ml

1 Ampulle enthält:

Wirksubstanz500,0 mg Weinsäure130,0 mg Natriumchlorid 45,0 mg Wasser für Injektionszwecke bzw. ad 10,0 mg

Herstellung

In der vorgelegten Weinsäurelösung werden die Wirkstoffbase und das Isotonans gelöst und mit Wasser für Injektionszwecke auf das Endvolumen aufgefüllt.

Beispiel 5 Infusionslösung mit 8 g 2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimido[5,4-d]pyrimidin pro 500 ml

Wirksubstanz8000,0 mg 1 n HClq. s. 1 n NaOH, ad, pH 5,5q. s. Natriumchlorid4000,0 mg Wasser für Injektionszwecke, ad 500,0 ml

Herstellung

Zu einer Wirkstoffsuspension wird unter leichtem Erwärmen Salzsäure zugetropft bis zur völligen Auflösung der Wirkstoffbase. Durch Zugabe der Hauptmenge des Wassers für Injektionszwecke wird die Lösung auf Raumtemperatur gebracht und mit Natriumhydroxid auf pH 5,5 eingestellt. Nach Auflösung des Isotonans wird mit Wasser für Injektionszwecke auf das Endvolumen aufgefüllt.

Claims

Verwendung von 2,6-Bis-(Diäthanolamino)-4-piperidino-pyrimi do[5,4-d]pyrimidin und seinen physiologisch verträglichen Säureadditionssalzen mit anorganischen oder organischen Säuren zur Bekämpfung des Wachstums von Krebszellen.