DE3117250C2

DE3117250C2 -

Info

Publication number: DE3117250C2
Application number: DE3117250A
Authority: DE
Inventors: Peder Oee Farum Dk Barbesgaard; Georg Wilhelm Dipl.-Ing. Bagsvaerd Dk Jensen; Poul Broenshoej Dk Holm
Original assignee: Novo Industri AS
Current assignee: Novozymes AS
Priority date: 1980-04-30
Filing date: 1981-04-30
Publication date: 1991-12-12
Also published as: ATA191581A; GB2075028A; AT384442B; IT1210475B; HU196450B; ES501738A0; ES8306789A1; US4435307A; CH663511GA3; FR2481712A1; DE3117250A1; JPS5723699A; GB2075028B; IT8121432A0; MX158929A; FR2481712B1; DK187280A; NL192043C; JPS6116316B2; NL192043B

Description

Es ist bekannt, daß das Waschen von Baumwolle enthaltenden Textilien unter normalen Bedingungen zu einer ausgeprägten unangenehmen Rauheit der Textilien führt. Bei den heute üblichen Waschmethoden wird diese Rauheit normalerweise durch eine Behandlung der Textilien mit einem Weichmacher (Spülmittel) reduziert. Der genannte Weichmacher enthält ein kationisches Waschmittel. Diese Behandlung geschieht in einer separaten Stufe neben dem Hauptwaschgang. Die Behandlung weist jedoch eine wichtigen Nachteil auf, und zwar hält der Effekt nur eine gewisse zeitlang. Nach dem nächsten Waschen besitzt das Gewebe wieder die genannte Rauheit und muß wieder mit einem Weichmacher behandelt werden. Obwohl große Summen aufgewendet worden sind, um bessere Methoden zur Verringerung der Textilrauheit zu entwickeln, verbleibt die Tatsache, daß die bekannten Weichmacher in der Praxis dem Gewebe in einer vom Hauptwaschgang getrennten Stufe zugesetzt werden müssen, um ihren vollen Effekt ausüben zu können. Ebenso verbleibt die Tatsache, daß der genannte Effekt nur temporär ist.

Es existieren verschiedene Veröffentlichungen, die sich mit dem genannten Problem beschäftigen. Beispielsweise wird in der GB-PS 13 68 599 eine anscheinend effizientere Alternative zur Verringerung der Geweberauheit von baumwollhaltigen Geweben beschrieben, die die Behandlung des Gewebes mit Cellulase umfaßt. Es muß jedoch darauf hingewiesen werden, daß auch diese Behandlung immer in einer separaten Stufe, beispielsweise beim Vorwaschen oder beim Voreinweichen, durchgeführt wird. Dies wird detailliert weiter unten dargelegt. In der gleichen Druckschrift wird noch angegeben, daß baumwollhaltige Textilien, die mit Cellulase behandelt worden sind, ihre Weichheit auch nach mehrmaligem Waschen beibehalten. Es muß jedoch darauf hingewiesen werden, daß das cellulasehaltige Mittel kommerziell nicht erhältlich ist, obwohl die genannte Methode schon 1972 (in BE-PS 7 73 280, entsprechend der GB-PS 13 68 599) veröffentlicht worden ist. Daher muß die Lehre gemäß der GB-PS 13 68 599 (BE-PS 7 73 280) eher als eine theoretische Möglichkeit denn als eine realistische, gewerblich anwendbare Erfindung angesehen werden.

Es muß ferner darauf hingewiesen werden, daß von Bakterien stammende Cellulasen gewöhnlich sehr teuer sind, da die Ausbeute normalerweise sehr klein ist. Von Pilzen stammende Cellulasen sind vom kommerziellen Standpunkt aus die vielversprechendsten Cellulasen. Diese können nämlich in eher hohen Ausbeuten erhalten werden. Beispielsweise wird auf Seite 2, Zeilen 84-90 der "Queen's printers copy" der GB-PS 13 68 599 ausgeführt: "Viele Varianten der von Fungi stammenden Cellulasen haben ein pH-Optimum von ungefähr 5. Oberhalb pH 7 ist ihre Aktivität stark reduziert und die cellolytischen Enzyme der Fungi sollten gemäß der vorliegenden Erfindung in einem sauren Medium eingesetzt werden". Dies bedeutet, daß der Waschvorgang, welcher normalerweise bei alkalischen pH abläuft, nicht gleichzeitig mit der oben genannten Cellulasebehandlung ausgeführt werden kann. Die Cellulasebehandlung wird in einer ersten Stufe, als saures Vorwaschen oder Voreinweichen durchgeführt, und anschließend wird der Hauptwaschgang in einem zweiten Schritt in alkalischen Medium durchgeführt. Es existiert bisher keine Methode zum Waschen und Weichmachen in einem einzigen Schritt, die praktisch anwendbar wäre.

Es besteht daher dringender Bedarf an einem Hauptwaschmittel, das eine relativ billige Cellulase mit hoher Aktivität bei denjenigen pH-Werten enthält, die normalerweise in dem Hauptwaschgang auftreten.

In Chemical Abstracts 74 (3) 10 567 g ist ein Artikel von Simpson und Marsh in Develop. Ind. Microbiol. 1969, 11, 438-46 zitiert. Dieser Artikel bezieht sich auf die Fragmentierung von Baumwollfasern durch Pilzcellulasen. Nach diesem Artikel besitzen bestimmte mikrobielle Cellulasen, die von Pilzen der Gattung Humicola erzeugt werden, die Fähigkeit, Baumwollfasern zu fragmentieren bzw. aufzuspalten. Abgesehen davon, daß eine derartige Aufspaltung der Baumwollfasern bei einem Waschmittel nicht erwünscht ist, umfaßt die Gattung Humicola etwa 25 Arten, wobei die von diesen Arten gebildeten Cellulasen im allgemeinen für die erfindungsgemäßen Zwecke nicht geeignet sind.

Es hat sich nun überraschenderweise gezeigt, daß eine spezielle, von Fungi stammende Cellulase, d. h. die Pilzcellulase, die von Humicola insolens (Humicola grisea var. thermoidea) erzeugt wird, eine hohe Cellulaseaktivität bei denjenigen pH-Werten aufweist, welche normalerweise bei Hauptwaschgängen vorliegen.

Die Erfindung betrifft das im Hauptanspruch angegebene Hauptwaschmittel. Vorteilhafte Ausgestaltungen dieses Waschmittels sind in den Ansprüchen 2 bis 5 angegeben. Die Erfindung betrifft außerdem ein Waschverfahren unter Verwendung dieses Waschmittels sowie einen Textilweichmacher, der als wesentliche Komponente eine Pilzcellulase von dem Stamm Humicola insolens enthält.

Es muß darauf hingewiesen werden, daß die genannte Pilzcellulase aus Humicola insolens sowohl von regulären Stämmen von Humicola insolens wie auch von Mutanten und Varianten von Humicola insolens stammen kann.

Durch die Verwendung des Textilweichmachers für ein Hauptwaschmittel gemäß der Erfindung ist es zum ersten Mal möglich, im Hauptwaschgang eine Reduktion der Textilrauheit in einer Operation und bei einem vernünftigen Preis auszuführen. Die Reduzierung der Textilrauheit geschieht im Hauptwaschgang ohne jede Vorwäsche oder Vorbehandlung der Textilien.

In Argric. Biol. Chem. 44 (3), 481-487 (1980) und 44 (8), 1721-1728 (1980) wird beschrieben, daß Humicola Insolens ein cellulaseproduzierender thermophiler Fungus ist. Ebenso wird angegeben, daß die optimalen pH-Werten der Cellulasen, die durch Humicola insolens produziert werden, 5,3 und 5,0 sind. Diese Cellulase scheint daher zu derjenigen Kategorie von Cellulasen zu gehören, die weiter oben im Zusammenhang mit der GB-PS 13 68 599 erwähnt worden ist und daher vollständig unbrauchbar ist zur Erfüllung der Ziele dieser Erfindung. Überraschend ist aber gemäß dieser Erfindung gefunden worden, daß Humicola insolens eine Cellulase produziert, welche für die erfindungsgemäßen Ziele geeignet ist.

Humicola insolens gehört zu der Gruppe der thermophilen Humicola, die sowohl Humicola insolens als auch Humicola var. thermoidea umfaßt. Die taxonomische Unterscheidung zwischen den beiden Stämmen ist sehr unsicher.

Die Aktivität der regulären C_x-Cellulase wird anhand der Tatsache festgestellt, daß Cellulase Carboxymethylcellulose zu reduzierenden Kohlenhydraten hydrolisiert. Die reduzierende Wirkung der letzteren wird kolorimetrisch bestimmt anhand der Ferricyanidreaktion gemäß Hoffmann, W. S., Journal Biological Chemistry 120, 51 (1937).

Die Aktivität der regulären C_x-Cellulase wird auch in Beziehung zur vorgelegten Carboxymethylcellulose (CMC Hercules, 4 M6F) bestimmt.

Die Standardbestimmungen dazu sind die folgenden: pH 9,50; Pufferlösung 0,1 m Tris(hydroxymethyl)aminomethan ("Tris"); Substrat 4 g CMC/l der oben angegebenen Pufferlösung; Inkubationstemperatur 50°C und Inkubationszeit 20 min.

Eine Aktivitätseinheit der regulären C_x-Cellulase (im folgenden als reguläre C_x-Einheit bezeichnet) ist die Menge an Cellulase, welche unter den oben angegebenen Standardbedingungen diejenige Menge an reduzierendem Zucker bildet, welche äquivalent ist zu 1 µmol Glukose/min.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform enthält der erfindungsgemäße Textilweichmacher die Pilzcellulase von Humicola Stamm DSM 1800. Es hat sich gezeigt, daß dieser Stamm eine alkalische Cellulase mit hoher C_x-Aktivität bei alkalischen pH-Werten produziert. Dieser neue Humicola-Stamm wurde durch das Commenwealth Mycological Institute, Kew, England, als Humicola insolens identifiziert. Der neue Stamm wurde am 14. April 1980 bei der DSM (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen) in Göttingen, Deutschland, unter der DSM-Nummer 1800 hinterlegt.

Im folgenden werden die morphologischen und physiologischen Eigenschaften des oben angegebenen neuen Humicola-Stamms DSM 1800 beschrieben:

Oberseite (Rasen): kurz, Mycelium zuerst weiß, später dunkelgrau mit weißen Flecken; Hyphae farblos, glatt, unterteilt, ungefähr 2,8 µm Durchmesser; farblose Wassertropfen gelegentlich anwesend.
Unterseite: gelblich, später braun werdend, im Alter dunkelgrau.
Aleuriosporen: glatt, braun, einzeln, terminal auf einzelnen oder multizellulären Conidiophoren, normalerweise Globos 12,6-16,8 µm oder auch Subglobos 7×11,2 bis 14×16,8 µm im Durchmesser. Apiculus vorhanden.
Chlamydosporen: einzeln oder in Ketten produziert; glatt, braun, 11,2-16,8 µm.
Phialocondia: abwesend.
Temperaturgrenzen: kein Wuchs bei 26°C; guter Wuchs von 37-50°C. Kolonien von 8 cm im Durchmesser bei 37°C während fünf Tagen.

Die obigen Werte wurden bestimmte nach fünftägigem Wuchs bei 37°C auf YPSS Agar mit der folgenden Nährlösung:

Hefeextrakt
4,0 g
K₂HPO₄	1,0 g
MgSO₄ · 7 H₂O	0,5 g
lösliche Stärke	15,0 g
destilliertes Wasser	1000 ml
Agar	15,0 g

Es ist ebenfalls überraschenderweise gefunden worden, daß das Cellulaseprodukt, das vom Humicola insolens-Stamm DSM 1800 erhalten wird, neben der Textilweichmacher-Wirkung noch einen starken Schmutzlösungs- und Anti-Wiederablagerungseffekt zeigt.

Nach einer bevorzugten Ausführungsform wird der erfindungsgemäße Textilweichmacher an derjenigen Cellulasefraktion angereichert, welche bei pH zwischen 6,5 und 7,5 nicht an einen Anionentauscher gebunden wird.

Wie weiter unten im Detail gezeigt wird (Beispiel 6), wurde gefunden, daß diejenige Cellulasefraktion, welche bei pH-Werten zwischen 6,5 und 7,6 nicht an Anionentauscher gebunden wird (diese Fraktion wird im folgenden als AC_x┬-Fraktion bezeichnet), die signifikanteste Wirkung bezüglich Reduzierung der Textilrauheit zeigt. Es ist ebenfalls gefunden worden, daß die Temperaturstabilität der AC_x┬-Fraktion besser ist als die Temperaturstabilität der anderen Fraktionen der Cellulase von Humicola insolens. Ebenso ist die Temperaturstabilität der AC_x┬-Fraktion besser als diejenige der sauren Pilzcellulase gemäß der oben zitierten GB-PS 13 68 559.

Um den Gehalt an AC_x┬-Fraktion zu bestimmen, kann die Aktivität der modifizierten C_x-Cellulase nach der folgenden Methode bestimmt werden. Eine Phosphatpufferlösung A wird vorbereitet, in dem 26,52 g Natriumdihydroxyphosphatdihydrat in 1000 ml entionisiertem Wasser gelöst werden; die Molarität von A beträgt also 0,17. 100 ml A werden nun mit ungefähr 800 ml entionisiertem Wasser gemischt und der pH der Lösung wird auf 7,0 eingestellt. Das Gesamtvolumen der verdünnten Pufferlösung wird nun auf 1000 ml gebracht, und diese neue Pufferlösung, im folgenden Pufferlösung B genannt, weist nun eine Molarität von 0,017 auf. Nun wird eine Säule mit 1 g eines Anionentauschers (BEAE-Sepharose Cl-6B®) beladen und mit B äquilibriert. Das Enzym wird nun in B gelöst und 25 ml der so hergestellten Enzymlösung auf die Säule gegeben. Die C_x-Aktivität der Enzymlösung nach dem Durchgang durch die Säule wird ebenso bestimmt, wie weiter oben die Aktivität der regulären C_x-Cellulase. Diese C_x-Aktivität wird modifizierte C_x-Aktivität genannt und ist kleiner als die reguläre C_x-Aktivität, wenn ein Teil der C_x-Aktivität auf dem Anionenaustauscher unter den genannten Bedingungen adsorbiert wird.

Bei einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Erfindung zeigt die Pilzcellulase ein Verhältnis C_x, modifiziert zu C_x regulär von mindestens 0,6, vorzugsweise von mindestens 0,8. Es ist gefunden worden, daß ein erfindungsgemäßer Textilweichmacher, in dem die AC_x┬-Fraktion im oben genannten Verhältnis angereichert ist, eine außerordentlich gute Wirkung bezüglich Verminderung der Rauheit von Geweben zeigt.

Vorzugsweise wird die Pilzcellulase in Form eines nicht-staubenden Granulates bereitgestellt. Es ist wichtig, daß das Cellulasepräparat einen niedrigen Staubanteil aufweist. Mit hohen Staubanteilen können Komplikationen sowohl bei der Vermischung des genannten Cellulasepräparates mit dem Waschmittel als auch später bei der Anwendung des cellulasehaltigen Waschmittels auftreten. Ein granulatförmiges Cellulasepräparat kann mittels verschiedener Methoden gewonnen werden, beispielsweise mittels eines "Marumerizers®", wie er in den GB-PS 13 62 365 und 13 61 387 beschrieben ist, oder mittels einer Granuliermaschine, wie sie in "Aufbereitungstechnik" Nr. 3, 1970, Seiten 147-153 und 5/1970, Seiten 262-278 beschrieben ist. Das Präparat kann auch gemäß der BE-PS 7 60 135 erhalten werden. In allen Fällen muß aber das erhaltene Granulat minimale Verstäubungseigenschaften aufweisen.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform des erfindungsgemäßen Textilweichmachers wird das Cellulasegranulat mit einem Weißmacher, vorzugsweise TiO₂, überzogen. Der Weißmacher wird in Kombination mit einem Staubbindemittel aufgebracht. Dadurch wird ein gutaussehendes Cellulasegranulat erhalten, das zu einer minimalen Verstäubung führt.

Bei einer weiteren bevorzugten Ausführungsform des erfindungsgemäßen Textilweichmachers wird das Mittel als Flüssigkeit bereitgestellt, in welcher die Pilzcellulase als Konzentrat, suspendiert in einem nicht ionischen oberflächenaktiven Mittel, vorliegt. Das Konzentrat wird erzeugt auf der Basis einer Fermentationsbrühe. Wie oben erwähnt, ist es wichtig, daß das Cellulasepräparat einen geringen Staubanteil aufweist. Da gemäß dieser Ausführungsform der erfindungsgemäße Textilweichmacher als Flüssigkeit vorliegt, beträgt der Staubanteil Null. Die oben genannten Schwierigkeiten fallen also hier vollständig weg.

Vorzugsweise enthält das nicht ionische oberflächenaktive Mittel ein Verdickungsmittel, wenn der erfindungsgemäße Textilweichmacher eine Suspension ist. Dadurch wird die Sedimentation der Cellulase normalerweise verhindert. Als Verdickungsmittel kann beispielsweise extrem feinzerteiltes Siliciumdioxid verwendet werden, das in Hochtemperaturprozessen gewonnen wird.

Falls solches Siliciumdioxid eingesetzt wird, beträgt der Anteil des genannten Verdickungsmittels zwischen 0,5 bis 10 Gew.-%, vorzugsweise zwischen 1 und 5 Gew.-%.

Bei einer weiteren bevorzugten Ausführungsform des erfindungsgemäßen Textilweichmachers ist das Mittel eine Flüssigkeit und die Pilzcellulase wird als Cellulasekonzentrat in einem wäßrigen Medium gelöst. Dieses Medium enthält vorzugsweise einen Stabilisator. Beispiele für solche Stabilisatoren sind diejenigen Mittel, welche sowohl die Sedimentation verhindern als auch zu keinem Verlust an enzymatischer Aktivität führen.

Die Erfindung betrifft auch ein Hauptwaschmittel, das übliche Waschmittelbestandteile und eine die Rauheit von Textilien reduzierende Menge des erfindungsgemäßen Textilweichmachers enthält, wobei der pH der Lösung eines Gramms des genannten Hauptwaschmittels zu 1 l Wasser mit einer - vor der Zugabe des Hauptwaschmittels - Härte von 10°dH, im Bereich von 7-10, vorzugsweise im Bereich von 7,5-9,5 liegt.

Der Vorteil des erfindungsgemäßen Hauptwaschmittels tritt vor allem dann zutage, wenn dieses zur Wäsche in einer Stufe ohne Vor- bzw. Nachbehandlung eingesetzt wird.

Die Waschmittelkomponenten in dem Hauptwaschmittel sind nicht kritisch; die einzige Bedingung für die genannten Komponenten stellt ihre Kompatibilität mit der Pilzcellulase dar.

Daher können die genannten Komponenten und ihre Gehalte beispielsweise die folgenden sein:

1. Oberflächenaktive Stoffe, speziell anionische oder nicht ionische oberflächenaktive Stoffe, in einer Gesamtmenge von 1 bis 100 Gew.-%, typischerweise von 5 bis 45 Gew.-%. Typische anionische oberflächenaktive Stoffe sind lineare Alkylarylsulfonate ("LAS") und α-Olefinsulfonate ("AOS"). Typische nicht ionische oberflächenaktive Stoffe sind Alkylphenylethoxylate und Fettalkoholethoxylate.
2. Builders (Gerüststoffe): spezielle alkalische Builders und Enthärter in einer Gesamtmenge von 5 bis 80 Gew.-%, typischerweise in einer Menge von 25 bis 75 Gew.-%. Typische Builders sind Natriumtripolyphosphat ("STPP"), Natriumaluminiumsilicate (Zeolite), Natriumsilicate und Natriumcarbonate.
3. Bleichmittel, speziell Peroxide, in einer Gesamtmenge von 0 bis 40 Gew.-%, typischerweise entweder 0 oder 15 bis 30 Gew.-%. Typische Bleichmittel sind Natriumperborat und Natriumpercarbonat.
4. Weitere Bestandteile, vor allem Enzyme, optische Aufheller, Duftstoffe, Farbstoffe, Schaummodifikatoren, Stabilisatoren, Antiwiederablagerungsmittel, vorzugsweise nicht CMC, da diese zumindest zu einem gewissen Grad durch die Cellulase zersetzt wird, alle diese genannten weiteren Zusätze in einer Gesamtmenge von 0 bis 10 Gew.-%, typischerweise in Anteilen von 0,1 bis 5 Gew.-%.
5. Füllstoffe, spezielle Natriumsulfat und Wasser in einer solchen Menge, um die Waschmittelzusammensetzung auf 100% zu bringen.

In der Broschüre "Novo Enzymes" für die Waschmittelindustrie (B 157a-GB 2000, Februar 1977) werden andere, allgemeine Beispiele für Waschmittelzusammensetzungen angegeben, die zusammen mit dem Cellulasepräparat verwendet werden können. Diese Zusammensetzungen sind charakterisiert entweder durch spezifische Verbindungen oder Kategorien von Verbindungen und durch die entsprechenden Gehalte bzw. prozentualen Anteile.

Auf der Seite 5 der DK-Patentanmeldung Nr. 5691/78 vom 12. Dezember 1978 sind Waschmittelzusammensetzungen angegeben, die ebenfalls zusammen mit dem Cellulasepräparat verwendet werden können.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform des Hauptwaschmittels gemäß der Erfindung liegt der Textilweichmacher in einer Menge vor, die 2,5 bis 100 regulären C_x-Einheiten/g Hauptwaschmittel oder entsprechend 1,5 bis 60 modifizierten C_x-Einheiten/g Hauptwaschmittel entspricht. Die bevorzugten Beispiele der oben genannten Zusammensetzung sind 5 bis 50 reguläre C_x-Einheiten/g Hauptwaschmittel oder 3 bis 30 modifizierte C_x-Einheiten/g Hauptwaschmittel. Auf diese Weise wird ein befriedigender Effekt bezüglich Reduzierung der Rauheit erreicht, wobei zugleich ein Überschuß an Cellulase (welcher das Hauptwaschmittel unökonomisch werden ließe) vermieden werden kann.

Vorzugsweise enthält das erfindungsgemäße Hauptwaschmittel zusätzlich eine aus Bakterien gewonnene Proteinase, insbesondere eine Proteinase von Bacillus lichenformis, speziell ALCALASE (ein Novo-Enzympräparat). Überraschenderweise wurde gefunden, daß die Waschmittelzusätze Cellulase und Proteinase verträglich sind und daß sie beide einen zufriedenstellenden Effekt aufweisen, und zwar auch bei den pH-Werten des Hauptwaschvorganges. Die theoretisch mögliche Zersetzung der Cellulase durch das proteolytische Enzym tritt also nicht ein. Die kombinierten Waschmittelzusätze führen sowohl zu verbesserten Reinigungseigenschaften als auch zu einem verbesserten Effekt bezüglich Reduzierung der Rauheit, wenn sie dem Waschmittel zugesetzt werden. Falls ALCALASE und ein Granulat von Cellulase verwendet werden, kann der gemischte enzymatische Zusatz entweder durch Vermischen der vorher granulierten beiden Enzyme oder durch Vermischen eines Konzentrats von ALCALASE mit einem Konzentrat von Cellulose und anschließende Granulierung dieses Konzentratgemisches erhalten werden.

Ein bevorzugtes erfindungsgemäße Hauptwaschmittel enthält ein Perborat als einen Waschmittelbestandteil. Unter bestimmten Bedingungen verbessert das Perborat den Wascheffekt und es wurde überraschenderweise festgestellt, daß das Perborat und die Cellulase im Hauptwaschmittel gemäß der Erfindung verträglich sind.

Die Erfindung betrifft ferner ein Waschverfahren, bei dem das erfindungsgemäße Hauptwaschmittel verwendet wird.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform dieses Waschverfahrens wird die Pilzcellulase in der Waschlauge in einer solchen Konzentration eingesetzt, die 10 bis 100 regulären C_x-Einheiten pro Liter Waschlauge oder 6 bis 60 modifizierten C_x-Einheiten pro Liter Waschlauge entspricht. Die bevorzugten Bereiche der oben genannten Zusammensetzung sind 20 bis 50 reguläre C_x-Einheiten pro Liter Waschlauge oder 12 bis 30 modifizierte C_x-Einheiten pro Liter Waschlauge.

Vorzugsweise liegt der pH der Waschlauge zwischen 7 und 10, insbesondere zwischen 7,5 und 9,5. In diesem Bereich zeigt die Cellulase ihre volle Aktivität.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform wird ein signifikanter Teil des Hauptwaschvorganges bei Temperaturen unterhalb 70°C, insbesondere unterhalb 60°C durchgeführt.

Die folgenden Beispiele zeigen die Herstellung des im erfindungsgemäßen Textilweichmacher vorliegenden Enzyms mittels Fermentation (Beispiele 1, 6 und 8), das erfindungsgemäße Hauptwaschmittel und das erfindungsgemäße Waschverfahren (Beispiele 2 bis 8).

Beispiel 1

Der Stamm DSM 1800 wurde bei 37°C auf einem Agar-Substrat der folgenden Zusammensetzung kultiviert:

Hefeextrakt
4 g
K₂HPO₄	1 g
MgSO₄ · 7 H₂O	0,5 g
Glucose	15 g
destilliertes Wasser	1000 g
Agar	15 g

Eine erste Gruppe von 500 ml Schwenkflaschen wurde vorbereitet; diese Schwenkflaschen enthielten je 100 ml eines Substrates der folgenden Zusammensetzung:

Maiswasser
2,4%
Glucose	2,4%
CaCO₃	0,5%
Sojaöl	0,5%

Der pH wurde vor der Zugabe des CaCO₃ mittels 4n NaOH auf 5,5 eingestellt und durch Erwärmen auf 121°C während 20 min sterilisiert.

Nach siebentätigem Wuchs auf dem Agar-Substrat wurden die Sporen in die 500 ml Schwenkflaschen der ersten Gruppe eingefüllt.

Eine zweite Gruppe von 500 ml Schwenkflaschen wurde vorbereitet; diese enthielten je 100 ml eines Substrates der folgenden Zusammensetzung:

NH₄NO₃
0,25%
KH₂PO₄	0,56%
K₂HPO₄	0,44%
MgSO₄ · 7 H₂O	0,075%
Cellulose	2,0%
CaCO₃	0,25%
Pluronic®	0,01%

Der pH wurde vor Zugabe des CaCO₃ mittels 4n NaOH auf 6,8 bis 7,0 eingestellt und die Lösung im Autoklav bei 121°C während 20 min sterilisiert.

Nach zweimal 24stündigem Wuchs bei 37°C in den Schwenkflaschen der ersten Gruppe wurden die Schwenkflaschen der zweiten Gruppe mit je 6% aus den Schwenkflaschen der ersten Gruppe beimpft.

Nach 140stündiger Fermentation in den Schwenkflaschen der zweiten Gruppe bei 37°C betrug die Cellulaseaktivität 4,2 reguläre C_x-Einheiten pro ml Kulturbrühe. Nun wurde die Kulturbrühe auf folgende Weise gereinigt: sie wurde über Diatomeenerde filtriert, das Filtrat wurde mittels Ultrafiltration konzentriert und das Retentat gefriergetrocknet. Das gefriergetrocknete Pulver A zeigte eine C_x-Aktivität von 745 regulären C_x-Einheiten/g.

Zwei weitere Experimente wurden ausgeführt, und zwar in genau der gleichen Weise wie oben beschrieben. Nach der Fermentation in der zweiten Gruppen von Schwenkflaschen während 140 Stunden betrug die reguläre C_x-Cellulase-Aktivität in den beiden Experimenten 2,2 bzw. 6,0 C_x-Einheiten pro ml Kulturbrühe. Die entsprechenden Werte für die gefriergetrockneten Pulver waren 558 reguläre C_x (Pulver B) und 518 C_x-Einheiten pro g (Pulver C).

Beispiel 2

In diesem Beispiel wurde das Cellulasepräparat (Pulver A) aus dem Beispiel 1 untersucht hinsichtlich seiner Wirkung zur Reduzierung von Rauheiten bei gewaschenen Textilien.

Das Waschexperiment wurde in einem Waschgang durchgeführt mit einer vollautomatischen Trommelwaschmaschine. Das ausgeführte Waschprogramm war das Programm "Kochwäsche 95°C". Das Programm "Kochwäsche 95°C" arbeitet nach ungefähr dem folgenden Temperatur- Zeitprofil:

Zeit (Min.) 0 6 12 18 24 30 36 42 45
Temp. (°C) 16 27 43 61 76 85 85 82 Spülen mit kaltem Wasser

Die Waschlauge hatte die folgende Zusammensetzung: ungefähr 16 l Wasser mit einer Härte von etwa 20° dH, die 5 g/l eines handelsüblichen pulverförmigen Waschmittels mit den folgenden Hauptbestandteilen enthielten. (Die Angaben beziehen sich auf das trockene Waschpulver und sind in Gewichtsprozenten angegeben).

21% oberflächenaktiver Stoffe (7% LAS, 11% Seife, 3% Nonylphenylethoxylat)
39% Builders (32% STPP, 4% Natriumsilicat und 3% Natriumcarbonat)
26% Natriumperborat
13% Natriumsulfat.

Dieser Waschlauge wurde nun das proteolytisch wirkende Enzym in einer speziellen Verarbeitungsform zugesetzt, und zwar so, daß die entsprechende Konzentration 0,06 Anson-Einheiten pro Liter Lauge betrug. Die proteolytische Aktivität des Enzyms war gemäß der modifizierten Anson-Methode bestimmt worden, die in Novo Analytical Method Nr. AF 4.3/5-GB beschrieben ist (die Original Anson-Methode ist im Journal Gen. Physiol., 22, 79-89 (1939) beschrieben. Zu der so hergestellten Waschlauge wurde entweder nichts oder das Cellulasepräparat aus Beispiel 1 zugegeben, und zwar in einer Konzentration, welche ungefähr 40 regulären C_x-Einheiten pro Liter Lauge entspricht.

Die Testmaterialien für die beiden folgenden Parallelexperimente waren:

1. 12 Stücke eines weißen Samtgewebes aus Baumwolle von 42 cm×60 cm und
2. 12 Stücke eines weißen Interlockgewebes aus Baumwolle in der gleichen Größe.

Zu den obigen Geweben wurde soviel saubere Baumwollwäsche gegeben, daß für beide Versuche je 3 kg Wäsche bereitlagen. Das Testmaterial wurde zunächst 20mal gewaschen, und zwar mit einem handelsüblichen, perborathaltigen Waschmittel bei hohen Temperaturen.

Nach diesen 20 Wäschen war das Material bereit für die Experimente mit den Waschmitteln mit bzw. ohne Cellulasezusatz.

Das Testmaterial wurde nun sechsmal gewaschen, wobei es zwischen den Waschgängen jeweils über Nacht getrocknet wurde. Nach dem letzten Waschgang wurden alle Testgewebe (12×2×3) im gleichen Raum getrocknet.

Die Bewertung wurde von einer Gruppe von 20 Personen vorgenommen. Ohne Kenntnis der verschiedenen Testgewebe wurden die ersten 10 Personen aus der Gruppe gebeten, sechs Bewertungen vorzunehmen (d. h. drei für die weißen Samtgewebe und drei für die weißen Baumwollinterlockgewebe). Bei den genannten Bewertungen war es möglich, aus den folgenden drei Feststellungen die korrekte Feststellung auszuwählen:

1. Das Gewebe, das mit Cellulase behandelt ist, ist weicher als das Gewebe, das nicht mit Cellulase behandelt ist;
2. das Gewebe, das mit Cellulase behandelt worden ist, hat den gleichen Grad an Weichheit wie das Gewebe, das nicht mit Cellulase behandelt worden ist;
3. das Gewebe, das mit Cellulase behandelt worden ist, ist rauher als das Gewebe, das nicht mit Cellulase behandelt worden ist.

Drei Teststücke wurden aus den zwölf weißen Samtstücken aus Baumwolle ausgewählt, welche mit Cellulase behandelt worden waren. Ebenso wurden drei Stücke aus den zwölf Stücken weißer Samtstücke aus Baumwolle, die nicht mit Cellulasen behandelt worden waren, ausgewählt. Diese sechs ausgewählten Stücke wurden nun in drei Zweiergruppen aufgeteilt und jede der zehn ersten Personen aus der Gruppe wurde gebeten, alle drei Paare separat zu bewerten. Ähnliche Bewertungen wurden an dem weißen Interlock-Baumwollgewebe ausgeführt. Die restlichen zehn Personen aus der Gruppe wurden gebeten, die restlichen Teststücke auf die gleiche Art und Weise zu bewerten.

Jede Person in der Gruppe machte drei Bewertungen bezüglich des weißen Samtgewebes. Dies entspricht insgesamt 60 Bewertungen durch alle Personen in der Gruppe für das genannte Testmaterial.

Das weiße Baumwoll-Interlockgewebe wurde auf die gleiche Art und Weise bewertet; auch hier ergaben sich also 60 Bewertungen.

Die Resultate der oben beschriebenen Bewertungen sind in der folgenden Tabelle 1 zusammengestellt. Die Tabelle 1 zeigt auch den pH der Waschlauge beim Start des Waschganges, 10 min später und 20 min später (t=0, t=10 und t=20 min).

Beispiel 3

Beispiel 2 wurde wiederholt. Die Resultate sind ebenfalls in der folgenden Tabelle 1 zusammengestellt.

Beispiel 4

In diesem Beispiel wurde das Cellulasepräparat (Pulver B) aus dem Beispiel 1 als Textilweichmacher verwendet. Das Beispiel 2 wurde wiederholt, aber mit den folgenden Änderungen: die Waschmaschine wurde gefüllt mit dem Testmaterial wie in Beispiel 2, worauf die Maschine mit schmutzigem Baumwollgewebe aufgefüllt wurde, so daß im gesamten 3 kg Wäsche vorlagen. Die schmutzige Wäsche war Baumwollunterwäsche von einem Militärlager. Die Resultate sind ebenfalls in der folgenden Tabelle 1 zusammengestellt.

Beispiel 5

In diesem Beispiel wurde das Cellulasepräparat (Pulver C) aus dem Beispiel 1 als Textilweichmacher verwendet. Das Experiment aus Beispiel 2 wurde wiederholt, aber mit den folgenden Änderungen: gewaschen wurde nach dem Programm "Feinwäsche 60°C" aus der Broschüre T-52001. Dieses Programm arbeitet ungefähr nach dem folgenden Temperatur/Zeitprofil:

Zeit (min)
0 6 12 18 24 30 36 42
Temp. (°C)	16 24 35 47 57 55 54 Spülen mit kaltem Wasser.

Die Waschlösung hatte ein Volumen von ungefähr 26 Liter. Der pH der Waschlauge wurde mittels Zugabe von Citronensäure leicht angepaßt. Die Resultate sind ebenfalls in Tabelle 1 zusammengestellt.

Tabelle 1

Beispiel 6

Der Stamm DSM 1800 wurde bei 37°C auf einem Agar-Substrat kultiviert, das die gleiche Zusammensetzung hatte wie das Agar- Substrat in Beispiel 1.

300 l einer Impfbrühe oder eines Verfermentierungssubstrates mit der folgenden Zusammensetzung wurden dann 45 min bei 121°C sterilisiert:

Maiswasser
2,4%
Glucose	2,4%
CaCO₃	0,5%
Sojaöl	0,4%

(Vor der Zugabe des CaCO₃ war der pH mittels 4n NaOH auf 5,5 eingestellt worden.)

Nach vierzehntägigem Wuchs auf dem Agar-Substrat wurden die Sporen zu 300 l des obigen sterilisierten Verformentationssubstrates gegeben. Sterile Luft wurde durch das Substrat geblasen und die Fermentation wurde 49 h bei 37°C unter einem Druck von 0,5 bar und einer Luftmenge von 300 l/min durchgeführt.

Nun werden 350 l des Hauptfermentationssubstrates der folgenden Zusammensetzung während 60 min durch Sieden bei 123°C sterilisiert:

Maiswasser
10%
Cellulose	3%
CaCO₃	0,25%
NH₄NO₃	0,25%
KH₂PO₄	0,56%
K₂HPO₄	0,44%
MgSO₄	0,08%
Pluronic®	0,014%

(Vor der Zugabe des CaCO₃ war der pH mittels 4n NaOH auf 6,8 bis 7 eingestellt worden.)

Dann wurden 35 l der Vorfermentationsbrühe zu dem so sterilisierten Hauptfermentationssubstrat gegeben. Sterile Luft wurde durch die Fermentationsbrühe geblasen, und zwar unter einem Druck von 0,5 bar und in einer Menge von 300 l/min. Der pH-Wert der Brühe wurde durch Zugabe von KH₂PO₄ unter 7,0 gehalten. Die Fermentation bei 37°C dauerte 136 h. Nach dem Abschluß der Fermentation wies die gewonnene Cellulase eine Aktivität von 29 regulären C_x-Einheiten/ml auf.

Die Kulturbrühe wurde auf folgende Weise gereinigt:

Zunächst wurde die Kulturbrühe über Diatomeenerde filtriert. Das Filtrat wurde mittels Ultrafiltration konzentriert und das Retentat (im folgenden Retentat D) gefriergetrocknet. Das gefriergetrocknete Pulver D zeigte eine reguläre C_x-Aktivität von 1316 C_x-Einheiten/g und eine modifizierte C_x-Aktivität von 953 C_x-Einheiten/g.

Zwei weitere Fermentationen und Ultrafiltrationen wurden ausgeführt, und zwar wie oben beschrieben. Die entsprechenden Retentate werden mit E und F bezeichnet. F wurde gefriergetrocknet und zeigte eine reguläre C_x-Aktivität von 743 Einheiten/g und eine modifizierte C_x-Aktivität von 580 Einheiten/g.

Das gefriergetrocknete Pulver D wurde mittels Anionen-Austauscher- Chromatographie in die verschiedenen Komponenten aufgeteilt. Dazu wurden 100 g des Pulvers in 2000 ml destilliertem Wasser von 4°C gelöst. Der pH-Wert der Lösung wurde mittels Zugabe von 1m "Tris" auf 7,5 eingestellt. Die Lösung wurde nun über eine 400 ml Ionentauschersäule mit 100 g DEAE-Sephadex A-50 gegeben. Die Fig. 1 zeigt die Adsorption OD₂₈₀ bei 280 nm der verschiedenen Fraktionen aus der Säule. Die Proteine, die in der Säulenfüllung adsorbiert worden waren, wurden dann mit NaCl Gradientenlösungen eluiert. Die NaCl-Konzentration wurde gemessen und in Fig. 1 zusammen mit der Adsorption der verschiedenen Fraktionen aufgezeichnet.

Die proteinhaltigen Fraktionen wurden zusammengegeben. Dies ist durch die Klammern in Fig. 1 angedeutet. Die so erhaltenen Fraktionen Nr. 1 bis 5 wurden gefriergetrocknet.

Die gefriergetrockneten Lösungen waren charakterisiert durch ihren Gehalt an Protein, die Zusammensetzung der Proteine und die reguläre C_x-Aktivität; siehe dazu Tabelle 2. Der Isoelektrische Punkt der Proteine wurde mittels eines LKB Multiphorapparates bestimmt.

Tabelle 2

Pool 1 enthält alle alkalischen Komponenten, d. h. Proteine, die bei pH 6,5 bis 7,5 nicht an das Anionen-Austauschharz gebunden werden. Daher ist die Gesamtmenge an nicht modifizierter C_x-Cellulaseaktivität in Pool 1 vorhanden, der zugleich die gesamte cellolytische Aktivität bei pH über 6,0 enthält.

Um festzustellen, welcher der 5 Pools diejenige Fraktion der Cellulase enthält, die die beste Textilweichmacherwirkung zeigt, wurden die folgenden Experimente ausgeführt.

Ein Baumwollsamtgewebe wurde 20mal vorgewaschen, wie in Beispiel 2 beschrieben. Danach wurden daraus Stücke von 10 cm×10 cm (ungefähr 4 g) geschnitten und markiert.

Die Cellulasebehandlung wurde nun in einer Labor-Waschmaschine unter den folgenden Bedingungen ausgeführt: Waschmittel und Dosierung wie in Beispiel 2, mit der Ausnahme der Cellulasedosierung.

pH-Wert beim Start:
ungefähr 9,5
Temperatur:	50°C
Zeit:	30 min
Wasserhärte:	20°dH
Volumen pro Ansatz:	1200 ml
Anzahl Gewebeteile pro Ansatz:	10
Cellulasedosierung:	siehe folgende Tabelle; in allen Fällen 100 mg des gefriergetrockneten Pools/l

Die Bewertung wurde von einer Gruppe von 10 Personen vorgenommen, wobei jeder Person verschiedene Sätze von Gewebeteilen zur Beurteilung gegeben wurden. Jeder Satz von Gewebeteilen bestand aus drei Teilen und die bewertende Person wurde gebeten, die einzelnen Gewebeteilen gemäß deren Härte zu beurteilen. Jeweils zwei Teile waren mit einem der Mittel der oben genannten Pools gewaschen worden und jeweils ein Teil diente als Vergleichsgewebe. 9 der 10 Personen fanden, daß die Gewebeteile, die mit dem Material aus Pool 1 gewaschen worden waren, weicher waren als dasjenige Geweben, dem überhaupt kein solches Material zugesetzt worden war. Die Materialien aus den anderen Pools zeigten keine signifikante Textilweichmacherwirkung. Aus dem oben Gesagten kann geschlossen werden, daß die Fraktion 1 diejenige C_x-Aktivität enthält, welche die eigentliche Textilweichmacherwirkung ausmacht. Die C_x-Aktivitäten in den Fraktionen 3 bis 5 zeigen keine signifikante Gewebeweichmacherwirkungen bei Dosierungen, die normalerweise solche Weichmacherwirkungen zur Folgen haben.

Beispiel 7

Das Retentat E aus Beispiel 6 wurde sprühgetrocknet, wobei ein rohes Konzentrat erhalten wurde.

Dieses rohe Konzentrat wurde durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 0,5 mm gegeben. Dabei wurde ein pulverförmiges Konzentrat mit einem mittleren Durchmesser von 17,4 µm erhalten. Die Cellulaseaktivität dieses Konzentrats betrug 650 reguläre C_x-Einheiten/g.

Es wurde folgende Mischung zubereitet:

Konzentrat gemäß diesem Beispiel
2,5 kg
Cellulosepulver	1,0 kg
TiO₂	0,2 kg
NaCl (Teilchengröße<0,2 mm)	6,1 kg

Die Mischung wurde in einer Mischvorrichtung mit einer Drehgeschwindigkeit von 120 U/min und einer Messergeschwindigkeit von 3000 U/min gemischt. Zu der so vorbereiteten Mischung wurde anschließend 1 kg einer 20%igen wäßrigen Lösung von Polyvinylpyrrolidon gegeben, wobei die oben angegebenen Dreh- und Messergeschwindigkeiten beibehalten wurden. Die Zugabe der wäßrigen Lösung geschah mittels einer Druckdüse und dauerte 1 min. Die feuchte Mischung wurde nun 3 min weiter in dem gleichen Mischer gerührt, wobei die Mischgeschwindigkeit 200 U/min und die Messergeschwindigkeit 3000 U/min betrug. Dann wurden zweimal weitere Mengen Wasser zugegeben, und zwar 200 g und 100 g, beide Male gefolgt von einer Behandlung im Mischer während 3 min. Es wurde beobachtet, daß die Temperatur in der Mischmasse während der Granulation von 25 auf 30°C stieg. Das feuchte Granulat wurde in einem Fließbett getrocknet, und zwar auf einen Restwassergehalt von 1,6%.

Die regulären C_x-Aktivitäten des getrockneten Granulats betrugen:

berechnet
164 reguläre C_x-Einheiten/g
gefunden	136 reguläre C_x-Einheiten/g
prozentualer Aktivitätsverlust	17%.

Dieses Produkt lag nun als teilchenförmiges Mittel vor mit linsenförmigen Einzelteilchen. Im folgenden wird das Produkt mit Granulat E bezeichnet.

Granulat E wies die folgende Korngrößenverteilung auf:

Korngröße in µm
% der Teile
<1180
15
<1000	28
< 850	43
< 707	62
< 600	76
< 500	87
< 420	94
< 300	1,8
Mittlerer Durchmesser=790 µm

Das Granulat E wurde auf die folgende Weise oberflächenbeschichtet: 4,0 kg Granulat E wurden in einen Mischer gegeben. Die Mischung wurde auf 65°C erwärmt und dann mit 160 g geschmolzenem Polyethylenglykol 4000 (Molekulargewicht 4000) versetzt. Die Mischung wurde nun eine Minute gerührt. Anschließend wurde das Granulat mit 360 g pulverförmigem TiO₂ und 90 g Magnesiumsilicat versetzt. Die Mischung wurde weitere 5 min gerührt, wobei wiederum 40 g Polyethylenglykol 4000 auf die Mischung gegeben wurde. Nun wurde noch einmal eine Minute gerührt. Die Masse wurde nun abkühlen gelassen und anschließend 1,5 min bei 65°C in einem Fließbett staubfrei geblasen.

Die Aktivität des derart erhaltenen Granulats betrug:

Das oben angegebene oberflächenbeschichtete Granulat und das oberflächenbeschichtete und staubfreigeblasene Granulat sowie das Granulat E sind typische Ausführungsformen des erfindungsgemäßen Textilweichmachers in einer Zusatzform für Waschmittel.

Ein Waschexperiment wurde ausgeführt unter Verwendung des Granulates E, wie es in Beispiel 6 beschrieben ist. Die Änderungen waren:

Cellulasedosierung:
333, 667, 1000, 1333 und 1667 mg/l.

Die Bewertung wurde ebenso ausgeführt wie in Beispiel 6, mit den folgenden Änderungen:

Jeder Satz von Gewebeteilen bestand aus zwei Teilen. Eines davon war mit inaktivierter Cellulase im Waschmittel und das andere mit aktiver Cellulase im Waschmittel gewaschen worden. Das inaktivierte Cellulasepräparat wurde erhalten, indem 10 g Granulat E in 200 ml Wasser gelöst wurden.

Die Lösung wurde anschließend auf 90°C erwärmt und auf dieser Temperatur 10 bis 15 Minuten gehalten. Insgesamt wurden 5 Sätze von Gewebeteilen bewertet und die Resultate der genannten Bewertungen sind in der folgenden Tabelle 3 zusammengestellt.

Tabelle 3

Bewertung der Gewebeweichheit (%)

Beispiel 8

In diesem Beispiel wurden unterschiedliche Stämme von Humicola insolens verglichen, beispielsweise CBS 14764 (identisch mit ATCC 22082); DSM 2069 und DSM 2068. Diese Stämme wurden kultiviert, wie in Beispiel 1 angegeben, mit der Ausnahme, daß das Substrat für die zweite Gruppe von Schwenkflaschen neben den Bestandteilen gemäß Beispiel 1 zusätzlich 14% Maiswasser enthielt. Gefriergetrocknete Pulver wurden aus den Fermentationsbrühen hergestellt, wie dies in Beispiel 1 beschrieben ist. Die gefriergetrockneten Pulver wurden entsalzt, wieder gelöst und über einer mit Sephadex G 25 beschickten Kolonne nochmals entsalzt. Das Produkt wurde nochmals gefriergetrocknet. Diese gefriergetrockneten Pulver zeigten je 1096, 480 und 690 reguläre C_x-Einheiten/g. Auch ein Teil des gefriergetrockneten Pulvers F aus Beispiel 6 (DSM 1800) wurde in diesem Beispiel verwendet.

Das gefriergetrocknete Material aus Fraktion 1 aus Beispiel 6 wurde weiter gereinigt mittels Kationenaustausch über CM-Sepharose CL 6B. Dazu wurde eine solche Menge aus der Fraktion 1 in einer Essigsäure-Pufferlösung bei pH 5,0 gelöst, daß die Lösung 1,7 g Protein enthielt. Diese Lösung wurde nun über eine 1000 ml Säule mit dem angegebenen Kationenaustauscher gegeben. Das Protein wurde dabei adsorbiert. Eluiert wurde mit NaCl Gradientenlösungen und bei einer NaCl Konzentration von 250 mM wurde das reine CMC aktive AC_x┬-Protein eluiert. Das Molekulargewicht dieses Proteins wurde mittels SDS-Gel-Elektrophorese zu 80 000 bestimmt. Mit diesem Protein wurde nun ein Antiserum (Kaninchen) hergestellt. Das Antiserum wurde benutzt für die quantitative Bestimmung des Gehaltes an AC_x┬-Protein durch immunologische Methoden, d. h. mittels der "rocket immunoelectrophoresis", wie sie von B. Weeke in Scandinavian Journal Immun., 2 Suppl.1, Seite 37 (1973) beschrieben ist.

Die erhaltenen Eluationsabbildungen sind in der Fig. 2 zusammengestellt. Die Elektrophorese wurde über Nacht in einer Tris-maleat- Pufferlösung von pH 7 und bei einem Spannungsgradient von 1,0 Volt/cm ausgeführt.

In Fig. 2 entsprechen a) dem DSM 2069-Produkt (3 mg/ml), b) dem CBS 14764-Produkt (2 mg/ml), c) dem DSM 2068-Produkt (3 mg/ml) und d_n) dem DSM 1800-Produkt (n mg/ml).

Die oben angegebenen Cellulasepräparate von DSM 1800, CBS 14764, DSM 2068 und DSM 2069 wurden in den folgenden Waschexperimenten eingesetzt:

Zuerst wurde ein Baumwoll-Samtgewebe 20mal vorgewaschen, wie in Beispiel 2 beschrieben. Anschließend wurden aus dem Gewebe Teile von 10 cm×10 cm (ungefähr 4 g) geschnitten und markiert.

Die Cellulasebehandlung wurde in einer Terg-O-Tometer-Labor- Waschmaschine ausgeführt, und zwar unter den folgenden Bedingungen:
Waschmittel und Dosierung wie in Beispiel 2;
mit Ausnahme der Cellulasedosierung.

pH bei Beginn des Waschganges:
ungefähr 9,5
Temperatur:	50°C
Zeit:	30 min
Wasserhärte:	20°dH
Volumen pro Ansatz:	1200 ml
Anzahl der Teile pro Ansatz:	10
Cellulasedosierung:	siehe folgende Tabelle

Das Cellulasepräparat von DSM 1800 wurde in einer Dosierung von 76 regulärer C_x-Einheiten/l zugegeben. Die anderen Cellulasepräparate wurden in solchen Dosierungen zugegeben, daß die gleiche AC_x┬-Proteinkonzentration in der Waschlauge erhalten wurde wie bei dem DSM 1800-Präparat. Die genannte Proteinkonzentration wurde immunologisch gemäß dem oben beschriebenen Verfahren bestimmt.

Das Cellulasepräparat aus DSM 1800 wurde in einer Dosierung von 76 regulärer C_x-Einheiten/l zugegeben. Die anderen Cellulasepräparate wurden in solchen Dosierungen zugegeben, daß die gleiche AC_x┬-Proteinkonzentration in der Waschlauge erhalten wurden wie beim DSM 1800-Präparat. Die genannte Proteinkonzentration wurde immunologisch gemäß dem weiter oben beschriebenen Verfahren bestimmt.

Die Cellulasebehandlungen wurde 6mal wiederholt. Nach jeder Behandlung wurden die Gewebteile mit Leitungswasser gut gespült und über Nacht getrocknet.

Die Bewertung wurde nun wiederum durch eine Gruppe von 10 Personen durchgeführt. Jede Person erhielt vier verschiedene Sätze von Gewebeteilen, wobei jeder Satz aus drei Gewebeteilen bestand. Die Personen wurden gebeten, die Gewebeteilen je nach Gewebeweichheit zu klassifizieren. Das weichste Gewebe erhielt die Note 1, das nächstrauhere Note 2 usw. Die Zusammensetzung der verschiedenen bewerteten Gewebesätze und die Resultate der Bewertungen (ausgedrückt in Prozenten) sind in der folgenden Tabelle 4 zusammengestellt:

Tabelle 4

Bewertung der Weichheit (%)

Claims

1. Hauptwaschmittel, umfassend Waschmittelbestandteile und eine die Rauheit reduzierende Menge eines Textilweichmachers, wobei der pH-Wert seiner Lösung von 1 g/l in Wasser mit einer Härte von 10°dH zwischen 7 und 10, vorzugsweise 7,5 und 9,5 liegen soll, dadurch gekennzeichnet, daß es als wesentliche Komponente des Textilweichmachers eine Pilzcellulase von einem Stamm von Humicola insolens (Humicola grisea var. thermoidea) enthält.

2. Hauptwaschmittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Textilweichmacher in einer Menge entsprechend 2,5 bis 100 Einheiten C_x normal auf 1 g Hauptwaschmittel oder in einer Menge entsprechend 1,5 bis 60 Einheiten C_x, modifiziert auf 1 g Hauptwaschmittel, vorliegt.

3. Hauptwaschmittel nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß es zusätzlich eine von Bakterien stammende Proteinase enthält.

4. Hauptwaschmittel nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Bakterien-Proteinase eine solche von Bacillus licheniformis ist.

5. Hauptwaschmittel nach Anspruch 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß ein Waschmittelbestandteil ein Perborat ist.

6. Waschverfahren, dadurch gekennzeichnet, daß soviel Hauptwaschmittel nach Anspruch 1 bis 5 angewandt wird, daß die Pilzcellulase in einer Konzentration von 10 bis 100 Einheiten C_x normal auf 1 l Waschlauge oder in einer Konzentration von 6 bis 60 Einheiten C_x modifizierten, vorzugsweise in einer Konzentration von 20 bis 50 Einheiten C_x normal auf 1 l Waschlauge oder in einer Konzentration von 12 bis 30 Einheiten C_x modifiziert vorliegt.

7. Waschverfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß man den pH-Wert der Waschlauge auf 7 bis 10, vorzugsweise zwischen 7,5 und 9,5 hält.

8. Waschverfahren nach Anspruch 6 oder 7, dadurch gekennzeichnet, daß man den Hauptteil des Hauptwaschgangs bei Temperaturen unter 70°C, vorzugsweise unter 60°C, durchführt.

9. Textilweichmacher für das Hauptwaschmittel nach Anspruch 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß eine wesentliche Komponente eine Pilzcellulase von dem Stamm Humicola insolens (Humicola grisea var. thermoidea) ist.

10. Textilweichmacher nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Cellulase von Humicola insolens DSM 1800 stammt.

11. Textilweichmacher nach Anspruch 9 oder 10, dadurch gekennzeichnet, daß die Cellulase bezüglich derjenigen Cellulasefraktion angereichert vorliegt, die bei pH-Werten zwischen 6,5 und 7,5 nicht an einen Anionentauscher gebunden wird.

12. Textilweichmacher nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß die Cellulase ein Verhältnis von C_x modifiziert zu C_x normal von mindestens 0,6, vorzugsweise von mindestens 0,8, aufweist.

13. Textilweichmacher nach Anspruch 9 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß er als ein nichtstaubendes Granulat vorliegt.

14. Textilweichmacher nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, daß das nicht-staubende Granulat mit einem Weißmacher in Verbindung mit einem Staub- Bindemittel überzogen ist.

15. Textilweichmacher nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, daß der Weißmacher TiO₂ ist.

16. Textilweichmacher nach Anspruch 9 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß er eine Flüssigkeit darstellt, in der die Cellulase als Cellulasekonzentrat in einem nicht-ionischen oberflächenaktiven Mittel suspendiert vorliegt.

17. Textilweichmacher nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, daß er zusätzlich ein Verdickungsmittel enthält.

18. Textilweichmacher nach Anspruch 9 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß er eine Flüssigkeit darstellt, in der die Cellulase als Cellulasekonzentrat, gelöst in einem wäßrigen Medium vorzugsweise in Anwesenheit eines Stabilisierungsmittels, vorliegt.