DE4319728A1

DE4319728A1 - Assembly washes serum sample depositors in short time - by dunking in buffer solution and application of electrophoresis

Info

Publication number: DE4319728A1
Application number: DE19934319728
Authority: DE
Inventors: Sadahiro Watanabe
Original assignee: Olympus Optical Co Ltd
Current assignee: Olympus Corp
Priority date: 1992-06-15
Filing date: 1993-06-15
Publication date: 1993-12-16
Anticipated expiration: 2013-06-16
Also published as: JP3181688B2; DE4319728C2; JPH05346419A

Abstract

An assembly washes a sample depositor which is used to place a serum sample in an electrophoresis sample (serum) holder by means of electrophoresis. The novelty is that the assembly incorporates: a vessel (11) to hold a buffer soln.; a transporting medium (21) to hold one or more sample depositors (25), such that one end of the serum holder is brought in contact with a buffer soln. (12) in the vessel; an electrical conductor (11,51,52,53) which delivers electrical current to the serum depositor, which is in contact with the buffer soln. (12), so that the serum is set free in the soln. by electrophoresis. USE/ADVANTAGE - The assembly washes a sample depositor used to place a sample in an electrophoresis sample holder, where the depositor is used in a zoned electrophoresis process. The sample such as serum is repeatedly applied on a gel test substrate such as polyacrylamide or cellulose acetate, by the use of a sample depositor for electrophoresis analysis. ADVANTAGE - The arrangement facilitates speedy washing of the serum sample from the deposit surface.

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft eine Vorrichtung zum Wa schen eines Probenauftragteils für die Elektrophorese, wobei das Teil in einem Zonenelektrophorese-Verfahren verwendet wird, in der eine Probe, zum Beispiel Serum, wiederholt auf ein Testsubstrat, zum Beispiel ein gelartiges Medium wie Polyacrylamid oder Celluloseacetat, durch die Verwendung ei nes Probenauftragteils für die elektrophoretische Analyse aufgebracht wird.The present invention relates to a device for wa a sample application part for electrophoresis, where the part is used in a zone electrophoresis process in which a sample, for example serum, is repeated a test substrate, for example a gel-like medium such as Polyacrylamide or cellulose acetate, by using egg Sample application part for electrophoretic analysis is applied.

In konventionellen Vorrichtungen zur elektrophoretischen Analyse von Serum werden Verfahren zum Waschen eines Auf tragteils für Blutserum verwendet, wie sie beispielsweise in der veröffentlichten, ungeprüften, japanischen Gebrauchs musteranmeldung (PUJUMA) Nr. 50-154792 und in der veröffent lichten, geprüften, japanischen Gebrauchsmusteranmeldung (PEJUMA) Nr. 57-353 beschrieben werden. Insbesondere ist ein Rohr mit einer Anzahl an Poren oder Schlitzen zum Ausstoßen von Waschlösung in einem Behälter für Waschlösung vorgese hen, und ein benutztes Serumauftragteil wird gereinigt, in dem die dem Rohr zugeführte Lösung zu dem Teil hin ausge stoßen wird.In conventional electrophoretic devices Analysis of serum are procedures for washing an up Carrying part used for blood serum, such as in of published, unchecked Japanese usage sample application (PUJUMA) No. 50-154792 and published in the clear, checked, Japanese utility model application (PEJUMA) No. 57-353. In particular is a Pipe with a number of pores or slots for ejection pre-wash solution in a wash solution container hen, and a used serum application part is cleaned, in out the solution supplied to the pipe towards the part will come across.

Die PUJUMA Nr. 51-11094 offenbart ein weiteres Verfahren zum Waschen eines Serumauftragteils durch Eintauchen dessen En des in eine Waschlösung, die in einem Lösungsbehälter aufbe wahrt wird, während die Lösung gerührt wird, damit sie im Behälter fließt. PUJUMA No. 51-11094 discloses another method for Washing a serum application part by immersing its en in a washing solution, which is stored in a solution container is maintained while the solution is being stirred so that it Container flows.

Wie oben beschrieben wurde, verwenden die konventionellen Techniken das Fließen von Lösungen zum Waschen des Auftrag teils.As described above, the conventional ones use Techniques the flow of solutions for washing the job part.

Wenn eine elektrophoretische Analyse von Serum durch die Verwendung einer automatischen Elektrophoresevorrichtung durchgeführt wird, muß das Serumauftragteil jedes Mal gewa schen werden, wenn die Probe (Serum) adsorbiert und auf ge tragen ist. Selbst wenn solch ein Arbeitsvorgang (Reinigung) jedes Mal durchgeführt wird, können Proteine oder viskose Materialien, die an der Aussparung oder dergleichen des Serumauftragteils wenn auch nur in kleinen Mengen haften, nicht vollständig entfernt werden und daher muß das Auftrag teil auf einer reproduzierbaren (regular) Basis sorgfältig gereinigt werden.If an electrophoretic analysis of serum by the Use of an automatic electrophoresis device is carried out, the serum application part must be when the sample (serum) is adsorbed and coated is wearing. Even if such an operation (cleaning) every time it is carried out, proteins or viscous Materials attached to the recess or the like of the Part of the serum adheres even if only in small quantities, cannot be removed completely and therefore the job must carefully on a reproducible (regular) basis getting cleaned.

In den Fällen der PUJUMA Nr. 50-154792 und der PEJUMA Nr. 57-353 muß zum automatischen Waschen eines Serumauftragteils innerhalb kurzer Zeit eine Pumpe mit großem Leistungsvermö gen verwendet werden, um einen starken Lösungsstrahl zu er zeugen. Ferner wird eine grobe Menge Lösung benötigt.In the cases of PUJUMA No. 50-154792 and PEJUMA No. 57-353 is required for automatic washing of a serum application part a pump with great performance within a short time gene can be used to generate a strong solution jet testify. A large amount of solution is also required.

Im Fall der PUJUMA Nr. 51-11094 muß zum automatischen Wa schen eines Serumauftragteils innerhalb kurzer Zeit die Lei stung des Rührmotors angehoben werden, um die Fließge schwindigkeit der Lösung zu erhöhen. In diesem Fall bedarf es grober Aufmerksamkeit, insbesondere um nicht die Waschlö sung zu verspritzen. Das Waschen eines Serumauftragteils durch das Fließen einer Lösung hat den Nachteil, daß das Teil unzureichend von Proben gereinigt wird, die an Ausspa rungen des Auftragteils haften.In the case of PUJUMA No. 51-11094, automatic wa the lei within a short time Stung the stirring motor to the Fließge increase the speed of the solution. In this case it gross attention, especially so as not to wash out to splash solution. Washing a serum application by flowing a solution has the disadvantage that the Partly inadequately cleaned from samples sent to Ausspa of the order part are liable.

Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist daher, eine Vor richtung zum Waschen eines Auftragteils für Elektro phoreseproben zur Verfügung zu stellen, die eine Probe (Se rum), die an dem Probenauftragteil haftet, in einer kurzen Zeit ausreichend abwaschen kann.The object of the present invention is therefore a pre direction for washing an order part for electrical to make available phosphor samples that contain a sample (Se rum), which adheres to the sample application part, in a short Wash off enough time.

Diese Aufgabe wird durch die Merkmale von Anspruch 1 und Anspruch 8 gelöst. Die abhängigen Ansprüche stellen bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung dar.This object is achieved by the features of claim 1 and Claim 8 solved. Make the dependent claims preferred embodiments of the invention.

Die Erfindung beinhaltet ein Verfahren und eine Vorrichtung zum Waschen eines Probenauftagteils, das zum Auftragen einer Elektrophoreseprobe auf einem Halter verwendet wird, mittels Elektrophorese, wobei die Vorrichtung beinhaltet: einen Behälter zum Aufnehmen einer Pufferlösung; Trä germittel zum Halten von wenigstens einem Probenauftragteil in der Weise, daß ein Ende des Probenauftragteils in Kontakt mit einer Pufferlösung in dem Behälter gebracht wird; und stromführende Mittel, um einen Strom zu dem Probenauftragteil fließen zu lassen, der in Kontakt mit der Pufferlösung gebracht wurde, so daß die Probe in die Lösung durch Elektrophorese freigegeben wird.The invention includes a method and an apparatus for washing a sample application part, which is used to apply a Electrophoresis sample used on a holder Electrophoresis, the device comprising: a container for holding a buffer solution; Trä means for holding at least one sample application part in such a way that one end of the sample application part is in contact is brought into the container with a buffer solution; and current carrying means to supply a current to the To allow the sample application part to flow in contact with the Buffer solution was brought so that the sample was in the solution is released by electrophoresis.

Weitere Details und Vorteile ergeben sich aufgrund der Beschreibung von Ausführungsbeispielen sowie anhand der Zeichnung.Further details and advantages result from the Description of exemplary embodiments and based on the Drawing.

Es zeigt:It shows:

Fig. 1 ein Diagramm, das in einfacher Form den Aufbau einer Probenauftragvorrichtung zeigt, in der eine Waschvor richtung gemäß der ersten Ausführungsform der vorlie genden Erfindung verwendet wird; Fig. 1 is a diagram showing in simple form the structure of a sample application device in which a washing device according to the first embodiment of the present invention is used;

Fig. 2 ein Diagramm, das in einfacher Form den Aufbau einer Waschvorrichtung zeigt, die in der in Fig. 1 gezeig ten Probenauftragvorrichtung verwendet wird; Fig. 2 is a diagram showing in simple form the structure of a washing device used in the sample application device shown in Fig. 1;

Fig. 3 ein Diagramm, das in einfacher Form einen Teil der Auftraggeräteeinheit der Probenauftragvorrichtung zeigt; und Fig. 3 is a diagram showing a simple part of the applicator unit of the sample applicator; and

Fig. 4 ein erläuterndes Diagramm, das einen einfachen Aufbau einer Waschvorrichtung einer Probenauftragvorrichtung gemäß der zweiten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung zeigt. Fig. 4 is an explanatory diagram showing a simple construction of a washing device of a sample application device according to the second embodiment of the present invention.

Eine Waschvorrichtung gemäß der ersten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung wird nachfolgend unter Bezug auf die Fig. 1 bis 3 beschrieben.A washing device according to the first embodiment of the present invention will be described below with reference to FIGS. 1 to 3.

Fig. 1 stellt bildlich einen Waschbehälter 11 aus einem elektrisch isolierenden Material dar, wobei der Behälter als Gefäß zum Aufbewahren einer Pufferlösung 12 dient, der spä ter beschrieben wird. Der Pufferlösungsbehälter 15 zum Auf bewahren der Pufferlösung 12 steht mit dem Waschbehälter 11 über ein Ansaugrohr 13 und ein Abflußrohr 14 in Verbindung. In der Mitte des Ansaugrohrs 13 sind eine Pumpe 16 und ein Absperrventil 17 vorgesehen. In der Mitte des Abflußrohres 14 ist ein offenes/geschlossenes elektromagnetisches Ventil 18 vorgesehen. Fig. 1 depicts a washing container 11 made of an electrically insulating material, the container serving as a vessel for storing a buffer solution 12 , which will be described later. The buffer solution container 15 for storing the buffer solution 12 is connected to the washing container 11 via an intake pipe 13 and a drain pipe 14 . A pump 16 and a shut-off valve 17 are provided in the middle of the intake pipe 13 . In the middle of the drain pipe 14 , an open / closed electromagnetic valve 18 is provided.

Wenn die Pumpe 16 angetrieben wird, wird die Pufferlösung 12 in dem Pufferlösungsbehälter 15 über das Ansaugrohr 13 zu dem Waschbehälter 11 überführt und das Absperrventil 17 ver hindert den Rückfluß der Lösung. Das offene/geschlossene elektromagnetische Ventil 18 dient dazu, das Abflußrohr 14 zu öffnen oder zu schließen, und wenn das Ventil öffnet, kehrt die im Waschbehälter aufbewahrte Pufferlösung 12 in den Pufferlösungsbehälter 15 über das Abflußrohr 14 auf Grund der Schwerkraft zurück.When the pump 16 is driven, the buffer solution 12 is transferred to the washing tank 11 in the buffer solution tank 15 via the suction pipe 13 and the shut-off valve 17 prevents the solution from flowing back. The open / closed electromagnetic valve 18 serves to open or close the drain pipe 14 , and when the valve opens, the buffer solution 12 stored in the washing tank returns to the buffer solution tank 15 via the drain pipe 14 due to gravity.

Als Pufferlösung 12 können alle elektrolytischen Lösungen eines bestimmten pH-Wertes verwendet werden, wie beispiels weise Veronal/Natriumveronal und verdünnte Essigsäurelösung, mit Ausnahme jener Lösungen, die den pH-Wert des isoelektri schen Punkts des Serumproteins aufweisen, da die Proteine, die den gleichen isoelektrischen Punkt wie die Pufferlösung aufweisen, durch Elektrophorese nicht wandern.All electrolytic solutions of a certain pH value can be used as buffer solution 12 , such as veronal / sodium veronal and dilute acetic acid solution, with the exception of those solutions which have the pH value of the isoelectric point of the serum protein, since the proteins have the same have an isoelectric point like the buffer solution, do not migrate by electrophoresis.

Um den Waschbehälter 11 mit der Pufferlösung 12 zu füllen wird die Pumpe 16 über einen bestimmten Zeitraum angetrie ben, während das elektromagnetische Ventil 18 geschlossen ist. Somit wird eine notwendige Menge Pufferlösung 12 aus dem Pufferlösungsbehälter 15 in den Waschbehälter 11 über führt. Um die Pufferlösung 12 im Waschbehälter 11 zurück zum Pufferbehälter 15 zu sammeln, wird die Pumpe 16 gestoppt und das elektromagnetische Ventil 18 geöffnet. Der Antrieb der Pumpe 16 und das Öffnen und Schließen des elektromagne tischen Ventils 18 werden gemäß dem Anweisungs-Output einer nicht gezeigten Steuerschaltung ausgeführt.In order to fill the washing container 11 with the buffer solution 12 , the pump 16 is driven for a certain period of time while the electromagnetic valve 18 is closed. Thus, a necessary amount of buffer solution 12 from the buffer solution container 15 into the washing container 11 leads. In order to collect the buffer solution 12 in the washing tank 11 back to the buffer tank 15 , the pump 16 is stopped and the electromagnetic valve 18 is opened. The drive of the pump 16 and the opening and closing of the electromagnetic valve 18 are carried out according to the instruction output of a control circuit, not shown.

Eine Auftraggeräteeinheit 21 wird in eine Position oberhalb des Pufferbehälter 15 gebracht. Die Auftraggeräteeinheit 21 beinhaltet eine Mehrzahl von Auftraggeräten 23, die im sel ben Abstand auf einem Trägerarm 22 angeordnet sind, der sich in horizontaler Richtung erstreckt, wie in Fig. 2 gezeigt wird. Jeder der Auftraggeräte 23 hat ein schlitzähnliches Loch 23a, das sich in der Auf-und-Ab-Richtung erstreckt, und ist auf dem Trägerarm 22 so durch eine Schraube 24 ange bracht, daß jedes der Auftraggeräte zur Positionsanpassung nach oben oder nach unten bewegt werden kann.An applicator unit 21 is brought into a position above the buffer container 15 . The applicator unit 21 includes a plurality of applicators 23 , which are arranged at the same distance on a support arm 22 which extends in the horizontal direction, as shown in FIG. 2. Each of the applicators 23 has a slot-like hole 23 a, which extends in the up-and-down direction, and is placed on the support arm 22 by a screw 24 that each of the applicators moves up or down to adjust the position can be.

Am unteren Teil eines jeden Auftraggerätes 23 ist lösbar ein leitendes Probenauftragteil 25 durch Schrauben 26 ange bracht. Wie in Fig. 3 gesehen werden kann, ist das Proben auftragteil 25 eine dünne Platte aus leitendem Material, wie beispielsweise rostfreier Stahl, und wie ebenfalls gezeigt wird, weist es beispielsweise eine Aussparung 27 auf, die sich in der Breite der unteren Endoberfläche (tip end surface) erstreckt, und die im unteren Ende des Teils ausge bildet ist. Eine Probe (Serum oder dergleichen) haftet in der Aussparung durch Oberflächenspannung. Im mittleren Teil des Probenauftragteils 25 ist eine rechteckige, vorzugsweise quadratische Öffnung 28 beispielsweise durch Ausschneiden ausgebildet. Die Aussparung 27 steht mit der Öffnung 28 in Verbindung.At the lower part of each applicator 23 , a conductive sample applicator 25 is releasably attached by screws 26 . As can be seen in Fig. 3, the sample applicator 25 is a thin plate of conductive material, such as stainless steel, and as also shown, it has, for example, a recess 27 that extends in the width of the lower end surface (tip end surface) extends, and which is formed in the lower end of the part. A sample (serum or the like) sticks in the recess by surface tension. A rectangular, preferably square, opening 28 is formed in the middle part of the sample application part 25 , for example by cutting out. The recess 27 communicates with the opening 28 .

Die Auftraggeräteeinheit 21 ist durch eine Schraube 33 an einem Block 32 befestigt, der an ein Ende einer horizontalen Zahnstangenstange 31 eines unten beschriebenen Übertragungsmechanismus 30 montiert ist. Die horizontale Zahnstangenstange 31 befindet sich so in einem Gehäuse 34, daß sich die Stange in horizontaler Richtung bewegen kann, senkrecht zu der Richtung, in die sich der Trägerarm 22 erstreckt. Das Gehäuse 34, das die horizontale Zahnstangenstange 31 hält, ist auf einer vertikalen Zahnstangenstange 36 durch Führungen 35 befestigt. Die Zahnstange 37 der horizontalen Zahnstangenstange 31 ist mit einem Ritzelrad 39 gekoppelt, der vorwärts oder rückwärts durch einen Motor 38 gedreht wird, der in dem Gehäuse 34 vorgesehen ist. Wenn der Motor 38 angetrieben wird, bewegt sich die horizontale Zahnstangenstange 31 in Bezug auf das Gehäuse 34 in horizontaler Richtung. Die Zahnstange 41 der vertikalen Zahnstangenstange 36 ist mit einem Ritzelrad 43 gekoppelt, der vorwärts oder rückwärts durch den Motor 42 gedreht wird. Wenn der Motor 42 angetrieben wird, wird sowohl die vertikale Zahnstangenstange 36 als auch das Gehäuse 34 in vertikaler Richtung bewegt.The applicator unit 21 is fixed by a screw 33 to a block 32 which is mounted on one end of a horizontal rack 31 of a transmission mechanism 30 described below. The horizontal rack 31 is located in a housing 34 so that the rod can move in the horizontal direction, perpendicular to the direction in which the support arm 22 extends. The housing 34 , which holds the horizontal rack 31 , is fixed on a vertical rack 36 by guides 35 . The rack 37 of the horizontal rack 31 is coupled to a pinion gear 39 which is rotated forward or backward by a motor 38 provided in the housing 34 . When the motor 38 is driven, the horizontal rack 31 moves horizontally with respect to the housing 34 . The rack 41 of the vertical rack 36 is coupled to a pinion gear 43 which is rotated forward or backward by the motor 42 . When the motor 42 is driven, both the vertical rack 36 and the housing 34 are moved in the vertical direction.

Die Auftraggeräteeinheit 21 kann in einer zyklischen Bewe gung entlang zweier gerader Linien bewegt werden, d. h. in den vertikalen und horizontalen Richtungen, indem die Moto ren 38 und 42 des Übertragungsmechanismus 30 in geeigneter Weise gemäß den Anweisungen einer hier nicht gezeigten Steuereinheit angetrieben werden. The applicator unit 21 can be moved in a cyclical movement along two straight lines, that is, in the vertical and horizontal directions, by driving the motors 38 and 42 of the transmission mechanism 30 in a suitable manner according to the instructions of a control unit not shown here.

Auf der der Auftraggeräteeinheit 21 gegenüberliegenden Seite ist eine Serumplatte 47 angeordnet, auf der sich eine Probe (Serum) 46 befindet, wobei die Platte an einer Stelle einer horizontalen Bewegungsrichtung der Einheit angeordnet ist. Zwischen dem Waschbehälter 11 und der Probe (Serum) 46 ist ein Probenhalter 49 vorgesehen, der durch Rollen 48 in senk rechter Richtung zu der in Fig. 1 gezeigten Papieroberfläche bewegt wird.On the side opposite the applicator unit 21 , a serum plate 47 is arranged, on which a sample (serum) 46 is located, the plate being arranged at a point in a horizontal direction of movement of the unit. Between the washing container 11 and the sample (serum) 46 , a sample holder 49 is provided, which is moved by rollers 48 in the vertical direction to the paper surface shown in FIG. 1.

In dem Waschbehälter 11 ist eine Elektrode vorgesehen, insbesondere eine drahtförmige Elektrode (electrode line) 51 aus einem leitenden Material wie beispielsweise Platin, welche parallel zur Längsrichtung des Probenauftragteils 25 gespannt ist. Eine Gleichstromquelle 52 ist zwischen der Elektrode 51 und dem Probenauftragteil 25 der Auftrag geräteeinheit 21 angeschlossen. Insbesondere ist die Elektrode 51 an einen Pol der Stromquelle 52 angeschlossen, während an den anderen Pol das Probenauftragteil 25 über die horizontale Zahnstangenstange 31, den Block 32, den Trä gerarm 22 und das Auftraggerät 23 angeschlossen ist, die alle leitend sind. (In dem in Fig. 2 gezeigten Beispiel kön nen die horizontale Zahnstangenstange 31 und der Block 32 aus Nichtleitern sein, da die Stromquelle 52 elektrisch an den Trägerarm 22 angeschlossen ist.)An electrode is provided in the washing container 11 , in particular a wire-shaped electrode (electrode line) 51 made of a conductive material such as platinum, which is stretched parallel to the longitudinal direction of the sample application part 25 . A DC power source 52 is connected between the electrode 51 and the sample application part 25 of the order device unit 21 . In particular, the electrode 51 is connected to one pole of the power source 52 , while the sample application part 25 is connected to the other pole via the horizontal rack 31 , the block 32 , the carrier arm 22 and the application device 23 , all of which are conductive. (In the example shown in FIG. 2, the horizontal rack 31 and the block 32 may be made of non-conductors because the power source 52 is electrically connected to the support arm 22. )

Bezüglich des Gleichstroms kann die Polarität des Auftrag teils und der Pufferlösung gemäß der Kombination des isoelektrischen Punkts des Proteins in der Probe und des pH- Wertes der Pufferlösung festgelegt werden. Im allgemeinen liegen die isoelektrischen Punkte von Proteinen innerhalb eines Bereichs von 3-8. Wenn eine Barbituralpufferlösung, beispielsweise Veronal/Veronal-Pufferlösung (pH 8,6), verwendet wird, um im Probenhalter enthalten zu sein, dient das Auftragteil als Kathode und die Pufferlösung im Waschbehälter als Anode. In ähnlicher Weise dient das Auftragteil als Anode und die Pufferlösung im Waschbehälter als Kathode, wenn eine verdünnte Essigsäurelösung verwendet wird, um den Farbstoff zu entfernen, der auf den Träger nach einem Arbeitsvorgang aufgebracht wird. Sofern nötig, können Vorrichtungen zum Schalten des Anschlusses zwischen jeder Elektrode und jedem Anschluß der Gleichstromquelle gemäß den Zusammensetzungen der Probe und der verwendeten Pufferlösung vorgesehen werden.Regarding the direct current, the polarity of the job can partly and the buffer solution according to the combination of the isoelectric point of the protein in the sample and the pH Value of the buffer solution. In general the isoelectric points of proteins lie within a range of 3-8. If a barbitural buffer solution, for example veronal / veronal buffer solution (pH 8.6), is used to be contained in the sample holder the application part as cathode and the buffer solution in Washing tank as an anode. It serves in a similar way Order part as anode and the buffer solution in the washing tank as cathode when using a dilute acetic acid solution to remove the dye that is on the support after one operation is applied. If necessary, can Devices for switching the connection between everyone Electrode and each connection of the direct current source according to the Composition of the sample and the buffer solution used be provided.

Ein Heizgerät (tabular heater) 81, das sich entlang des Teils 22 erstreckt und ein Gebläse 82, das Luft in das Heizgerät zum Trocknen des Teils mit warmer Luft strömen läßt, befinden sich oberhalb und abgesetzt von dem Waschbehälter 11, so daß die Luftaustrittsöffnung 81a in den Waschbehälter 11 zeigt.A tabular heater 81 which extends along the part 22 and a blower 82 which allows air to flow into the heater to dry the part with warm air are located above and away from the washing container 11 so that the air outlet opening 81 a shows in the washing container 11 .

Wenn eine Spannung angelegt wird während der Betriebsschalter 53 durch ein nicht gezeigtes Steuerteil eingeschalten wird, wird eine Potentialdifferenz zwischen dem Auftragteil und der Elektrode 51 erzeugt. Während eines Arbeitsvorgangs wird das distale Ende des Probenauftragteils 25 in Kontakt mit wenigstens der Oberfläche der Pufferlösung 12 in dem Waschbehälter 11 in dem Gehäuse gebracht, und so mit wird eine stromführende Einrichtung so hergestellt, daß ein Strom für die Probe 46 fließt, so daß sie durch Elektrophorese zu der Pufferlösung 12 wandert.If a voltage is applied while the operation switch 53 is turned on by a control part, not shown, a potential difference is generated between the application part and the electrode 51 . During an operation, the distal end of the sample applicator 25 is brought into contact with at least the surface of the buffer solution 12 in the washing tank 11 in the housing, and so a current carrying device is made so that a current for the sample 46 flows so that it migrates to the buffer solution 12 by electrophoresis.

Der Betrieb der Vorrichtung wird nachfolgend beschrieben.The operation of the device is described below.

Wenn der Motor 42 des Übertragungsmechanismus 30 angetrieben wird, wird die vertikale Zahnstangenstange 36 angehoben und folglich wird das Probenauftragteil 25 der Auftraggeräteein heit 21 angehoben. Dann wird der Motor 38 angetrieben, so daß das Probenauftragteil 25 zur rechten Seite von Fig. 1 bewegt wird. Das Teil wird oberhalb der Probenplatte 47 ge stoppt und wieder durch den Motor 42 abgesenkt, um so etwas von der Probe 46 aufzunehmen, die an dem Auftragteil 25 durch Oberflächenspannung haftet.When the motor 42 of the transmission mechanism 30 is driven, the vertical rack 36 is raised, and thus the sample application part 25 of the applicator unit 21 is raised. Then the motor 38 is driven so that the sample application member 25 is moved to the right side of FIG. 1. The part is stopped above the sample plate 47 and lowered again by the motor 42 so as to absorb something from the sample 46 which adheres to the application part 25 by surface tension.

Nach dem Anhaften wird das Auftragteil 25 wieder angehoben, zur linken Seite von Fig. 1 bewegt und das Teil 25 wird oberhalb des Halters 49 gestoppt. Dann wird das Teil abge senkt, um die Probe 46 auf dem Halter 49 auf zutragen. Nach dem Auftragen wird das Auftragteil 25 wieder angehoben und zur linken Seite von Fig. 1 bewegt, während das Ende oben gehalten wird. Das Ende wird oberhalb des Waschbehälters 11 gestoppt und darin abgesenkt. Danach wird das elektromagne tische Ventil 18 geschlossen und die Pumpe 16 wird für einen gewissen Zeitraum angetrieben, um so die Pufferlösung 12 in dem Waschbehälter bis zu einem Niveau zuzuführen, bei dem das Probenauftragteil 25 eintaucht. Alternativ dazu kann das Auftragteil in den Behälter 11 abgesenkt und in die Puffer lösung 12 getaucht werden, die darin vorher eingebracht wurde. Es ist vorzuziehen, daß die gesamte Oberfläche des Auftragteils, an dem die Probe haftet, in die Lösung in dem Gefäß eingetaucht wird.After adhering, the application part 25 is raised again, moved to the left side of FIG. 1 and the part 25 is stopped above the holder 49 . Then the part is lowered to apply the sample 46 to the holder 49 . After application, the applicator 25 is raised again and moved to the left side of Fig. 1 while the end is held up. The end is stopped above the washing container 11 and lowered therein. Thereafter, the electromagnetic valve 18 is closed and the pump 16 is driven for a period of time so as to supply the buffer solution 12 in the washing tank to a level at which the sample application member 25 is immersed. Alternatively, the application part can be lowered into the container 11 and immersed in the buffer solution 12 that was previously introduced therein. It is preferable that the entire surface of the application part to which the sample is adhered be immersed in the solution in the vessel.

Dann wird der Betriebsschalter 53 eingeschalten und eine Spannung wird zwischen der Elektrode 51 und dem Probenauftragteil 25 angelegt. Durch die Spannung wird ein Elektrophoresephänomen erzeugt und die Proteine usw., die an der Aussparung 27 des distalen Endes des Probenauftrag teils 25 haften, werden in die Lösung freigegeben. Folglich werden die Serumproteine usw., die an der Aussparung 27 des proximalen Endes des Probenauftragteils 25 haften, in die Lösung durch das Elektrophoresephänomen freigegeben, und so mit wird das Auftragteil gereinigt.Then the operation switch 53 is turned on and a voltage is applied between the electrode 51 and the sample application part 25 . The voltage creates an electrophoresis phenomenon and the proteins etc., which adhere to the recess 27 of the distal end of the sample application part 25 , are released into the solution. As a result, the serum proteins, etc., adhering to the recess 27 of the proximal end of the sample application member 25 are released into the solution by the electrophoresis phenomenon, and thus the application member is cleaned.

Es sollte beachtet werden, daß die elektrische Mobilität von Proteinen, Nukleinsäuren und dergleichen etwa 10 4 bis 10^-5 cm/s·V beträgt. Die anzulegende Spannung hängt vom Typ der Pufferlösung 12 ab. Alles was jedoch erforderlich ist, ist, daß die Serumproteine von der Aussparung 27 des Endes des Probenauftragteils 25 in die Pufferlösung 12 freigegeben werden, die einen Reibungswiderstand aufweist, der niedriger ist als der des gelartigen Trägers, und daher kann die Elek trophoresezeit kurz sein.It should be noted that the electrical mobility of proteins, nucleic acids and the like is about 10 4 to 10 ^-5 cm / s · V. The voltage to be applied depends on the type of buffer solution 12 . However, all that is required is that the serum proteins be released from the recess 27 at the end of the sample applicator 25 into the buffer solution 12 , which has a frictional resistance lower than that of the gel-like carrier, and therefore the electrophoresis time can be short.

Nachfolgend wird der Betriebsschalter 53 ausgeschaltet, um das elektromagnetische Ventil 18 zu öffnen und die Pufferlösung 12 in dem Behälter 11 kehrt in den Behälter 15 zurück, um so den Waschbehälter 11 zu entleeren. Dann wird heiße Luft in den Waschbehälter 11 oberhalb und versetzt von dem Auftragteil 25 durch die Heizgerät-Gebläse-Anordnung geblasen, um so das Auftragsteil 25 innerhalb einer vorbestimmten Zeitdauer zu trocknen. Wenn der nächste Träger 49 durch die Rollen 48 befördert wird, wird der gleiche obige Arbeitsvorgang wiederholt.Subsequently, the operation switch 53 is turned off to open the electromagnetic valve 18 and the buffer solution 12 in the tank 11 returns to the tank 15 so as to empty the washing tank 11 . Then, hot air is blown into the washing tank 11 above and offset from the application part 25 by the heater-blower assembly so as to dry the application part 25 within a predetermined period of time. When the next carrier 49 is conveyed by the rollers 48 , the same operation as above is repeated.

Als Pufferlösung 12 kann eine verdünnte Essigsäurelösung, die zum Entfärben der Färbelösung für die elektrophoretische Vorrichtung verwendet wird, und Veronal/Natriumveronal, das eine Elektrophoresepufferlösung für den Träger 49 ist, ge meinsam verwendet werden, und daher brauchen keine weiteren Waschpufferlösungen für das Probenauftragteil hergestellt werden. Darüber hinaus kann das Auftragteil 25 innerhalb ei ner kurzen Zeit gereinigt werden, womit das Zeitintervall zwischen einem Auftragarbeitsvorgang für den Träger 49 und dem nächsten Arbeitsvorgang abgekürzt werden kann. Ferner können das Elektrophoresebild und der Einfluß auf die Daten aufgrund einer Verunreinigung vermieden werden.As the buffer solution 12 , a dilute acetic acid solution used for decoloring the staining solution for the electrophoretic device and veronal / sodium veronal, which is an electrophoresis buffer solution for the carrier 49 , can be used together, and therefore no further washing buffer solutions for the sample application part need be prepared . In addition, the application part 25 can be cleaned within a short time, which can shorten the time interval between an order operation for the carrier 49 and the next operation. Furthermore, the electrophoresis image and the influence on the data due to contamination can be avoided.

Die Aussparung 27 des Auftragteils 25 hat eine Breite von 10 mm oder weniger und eine Tiefe von 1-3 mm. Ein Waschvor gang wird innerhalb einer Stromflußzeitdauer von einer Mi nute fertiggestellt. Es konnte durch ein Experiment bestä tigt werden, daß mit Hochspannung das Waschen im kürzesten Fall innerhalb einiger Sekunden beendet werden kann. Um die erfindungsgemäße Waschwirkung zu erzielen, kann die Tempera tur der Pufferlösung im Waschbehälter frei gewählt werden, und daher kann sie bei Raumtemperatur belassen werden oder in geeigneter Weise auf einen einem Zweck entsprechenden Wert eingestellt werden.The recess 27 of the application part 25 has a width of 10 mm or less and a depth of 1-3 mm. A washing operation is completed within a current flow period of one minute. It could be confirmed by an experiment that the washing can be terminated in the shortest case within a few seconds with high voltage. In order to achieve the washing effect according to the invention, the temperature of the buffer solution in the washing container can be chosen freely, and therefore it can be left at room temperature or suitably adjusted to a value corresponding to a purpose.

Fig. 4 ist ein erläuterndes Diagramm, das den Aufbau einer zweiten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung zeigt. Eine Auftraggeräteeinheit 21 ist in ähnlicher Weise wie in der ersten Ausführungsform konstruiert. Insbesondere ist je des der Probenauftragteile 25 an jedem der Auftraggeräte 23 befestigt, die parallel zueinander auf einem Trägerarm 22 angeordnet sind. Der Trägerarm 22 ist lösbar durch eine Schraube 33 auf einem Balken 62 montiert, der horizontal bei dem oberen Teil des Waschbehälters 11 aufliegt. Die Auftrag geräteeinheit 21, die auf dem Gefäß 11 montiert ist, bein haltet eine Schraube 33, einen Trägerarm 22, Schrauben 24, Auftraggeräte 23 und ein Probenauftragteil 25, die alle aus leitenden Materialien gemacht sind. Eine Elektrode 51 ist in dem Behälter 11 gespannt, und die Pufferlösung 12 wird darin bis zu einem Niveau eingefüllt, bei der das Auftragteil in die Lösung eintaucht. Ferner ist ein Pol einer Stromquelle 52 an die Elektrode 51 angeschlossen und der andere Pol ist mit einer leitenden Klemme 64 über den Betriebsschalter 53 verbunden. Fig. 4 is an explanatory diagram showing the structure of a second embodiment of the present invention. An applicator unit 21 is constructed in a similar manner to that in the first embodiment. In particular, each of the sample application parts 25 is fastened to each of the application devices 23 , which are arranged parallel to one another on a support arm 22 . The support arm 22 is detachably mounted by a screw 33 on a beam 62 which rests horizontally on the upper part of the washing container 11 . The application device unit 21 , which is mounted on the vessel 11 , includes a screw 33 , a support arm 22 , screws 24 , application devices 23 and a sample application part 25 , all of which are made of conductive materials. An electrode 51 is clamped in the container 11 and the buffer solution 12 is filled therein to a level at which the application part is immersed in the solution. Furthermore, one pole of a current source 52 is connected to the electrode 51 and the other pole is connected to a conductive terminal 64 via the operating switch 53 .

Wenn die Klemme 64 auf den Trägerarm 22 gesetzt wird und der Betriebsschalter 53 eingeschalten wird, flieht mittels der Stromquelle 52 ein Strom zwischen jeder der Probenauftragteile 25 und der Elektrode 51. Somit wird ein Elektrophoresephänomen erzeugt und die Serumproteine, die an dem Probenauftragteil 25 haften, werden in die Lösung 12 freigegeben.When the clamp 64 is placed on the support arm 22 and the operation switch 53 is turned on, a current escapes between each of the sample application parts 25 and the electrode 51 by means of the current source 52 . An electrophoresis phenomenon is thus generated and the serum proteins adhering to the sample application part 25 are released into the solution 12 .

Die Vorrichtung dieser Ausführungsform wird insbesondere dann verwendet, wenn die Auftraggeräteeinheit 21 entfernt wird und auf einer reproduzierbaren (regular) Basis gewa schen wird, und die Elektrophorese und das Waschen durch die Verwendung des Waschbehälters 11 durchgeführt werden. Konse quenter Weise müssen die Probenauftragteile 25 nicht über einen langen Zeitraum in die Waschlösung getaucht sein, wie dies konventioneller Weise der Fall ist, oder die Aussparung 27 von jeder der Probenauftragteile 25 muß nicht durch eine Bürste gereinigt werden, womit die Beschädigung der Auftrag teile durch solch einen Bürstvorgang verhindert wird.The apparatus of this embodiment is used particularly when the applicator unit 21 is removed and washed on a reproducible (regular) basis, and the electrophoresis and washing are performed by using the washing container 11 . Consequent way, the sample application parts 25 do not have to be immersed in the washing solution for a long period of time, as is conventionally the case, or the recess 27 of each of the sample application parts 25 does not have to be cleaned by a brush, thus causing damage to the order parts such brushing is prevented.

In jeder der oben beschriebenen Ausführungsformen sind alle Teile der Auftraggeräteeinheit 21 aus einem leitenden Mate rial gemacht. Jedoch besteht auch die Möglichkeit, daß nur das Probenauftragteil 25 aus leitendem Material gemacht und mit der Leitung der Stromquelle 52 verbunden ist. In jeder Ausführungsform ist der Behälter, der die Pufferlösung ent hält, aus elektrisch isolierendem Material gemacht; jedoch besteht auch die Möglichkeit, daß man mit einem Behälter 11, der selbst aus leitendem Material gemacht ist, einen Strom zwischen dem Behälter 11 und dem Probenauftragteil 25 fließen läßt, um ein Elektrophoresephänomen ohne die Verwen dung einer Elektrode zu erzeugen. Ebenfalls wird in jeder Ausführungsform der Waschbehälter 11 einmal vor dem Trocknen des Auftragteils 25 geleert, aber es besteht auch die Möglichkeit, daß das Auftragelement 25 oberhalb des Be hälters nach dem Waschen gehalten wird und heile Luft zu dem Auftragelement 25 hin von einem Heizgerät oder einem Gebläse geblasen wird, ohne daß die Pufferlösung im Waschbehälter im Kreis geführt werden muß. Wie gerade oben beschrieben wurde, ist die vorliegende Erfindung nicht auf die oben beschriebe nen Ausführungsformen beschränkt, sondern kann in verschie dene Modifikationen umgestaltet werden, so lange der wesent liche Inhalt der Erfindung unverändert bleibt.In each of the above-described embodiments, all parts of the applicator unit 21 are made of a conductive material. However, there is also the possibility that only the sample application part 25 is made of conductive material and is connected to the line of the current source 52 . In each embodiment, the container holding the buffer solution is made of electrically insulating material; however, there is also a possibility that a current can flow between the container 11 and the sample applicator 25 with a container 11 made of conductive material itself to produce an electrophoresis phenomenon without using an electrode. Also in each embodiment, the washing container 11 is emptied once before the application part 25 dries, but there is also the possibility that the application element 25 is held above the container after washing and healthy air to the application element 25 from a heater or a Blower is blown without having to circulate the buffer solution in the washing tank. As just described above, the present invention is not limited to the above-described embodiments, but can be modified in various modifications as long as the essential content of the invention remains unchanged.

Gemäß der vorliegenden Erfindung kann die Probe (Serum), die an dem Probenauftragteil haftet, innerhalb einer kurzen Zeit mit einer kleinen Menge an Pufferlösung weggewaschen werden, was die Betriebskosten senkt. Darüber hinaus ist der Aufbau der Waschvorrichtung für das Auftragteil einfach und daher kann die Vorrichtung mit geringen Kosten hergestellt werden. Da auch der Waschvorgang innerhalb einer kurzen Zeitdauer abgeschlossen werden kann, kann die Vorrichtung effizient verwendet werden. Ferner kann ein Elektrophoresebild erhal ten werden, das frei vom Einfluß einer Verunreinigung ist, und daher sind die durch die Vorrichtung erhaltenen Daten zuverlässig.According to the present invention, the sample (serum) which adheres to the sample application part within a short time washed away with a small amount of buffer solution, which lowers operating costs. In addition, the structure the washing device for the application part simple and therefore the device can be manufactured at low cost. Since also the washing process within a short period of time can be completed, the device can be efficient be used. An electrophoresis image can also be obtained that is free from the influence of contamination, and therefore the data obtained by the device reliable.

Claims

1. An apparatus for washing a sample applicator used for applying an electrophoresis sample to a holder by electrophoresis, characterized in that it includes:
a container ( 11 ) for holding a buffer solution;
Carrier means ( 21 ) for holding at least one sample application part ( 25 ) in such a way that one end of the sample application part is brought into contact with a buffer solution ( 12 ) in the container; and
current-carrying means ( 11 , 51 , 52 , 53 ) for flowing a current to the sample application part, which is brought into contact with the buffer solution ( 12 ) so that the sample is released into the solution by electrophoresis.

2. Device according to claim 1, characterized in that the current-carrying means an electrode ( 51 ), in particular a wire-shaped electrode, which is in the buffer solution in the container ( 11 ), and a current source ( 52 ) for applying a voltage between the electrode and the sample application part.

3. Device according to one of claims 1 or 2, characterized in that the carrier means includes means ( 22 , 23 , 63 ) for carrying a plurality of sample application parts ( 25 ) in a row at a predetermined distance, and that the electrode ( 51 ) is arranged so that it is parallel to the row of sample application parts.

4. Device according to one of claims 1 to 3, characterized in that it comprises a storage container ( 15 ) for buffer solution and means ( 13 , 14 , 16 , 17 , 18 ) for circulating the buffer solution between the container ( 15 ) and the container ( 11 ) includes.

5. The device according to claim 1, characterized in that the current-carrying means includes at least a part of the loading container ( 11 ) made of conductive material to be brought into contact with the buffer solution, and by a current source ( 52 ) for applying a voltage between the conductive material and the sample part.

6. Device according to one of claims 1 to 5, characterized in that it comprises a means ( 30 ) for selectively bringing the sample application part into the container ( 11 ) and / or out of it, by moving the carrier part horizontally and / or vertically.

7. Device according to one of claims 1 to 6, characterized in that the carrier element includes means ( 22 , 24 ) which are attached to the container in order to releasably carry a plurality of sample application parts in a row.

8. A method of washing a sample applicator that is used to apply an electrophoresis sample to an electrophoresis support.
characterized in that one
provides a container ( 11 ) for containing a buffer solution;
Providing carrier means ( 21 ) for holding at least one sample application part ( 25 ) in such a way that one end of the sample application part is brought into contact with a buffer solution ( 12 );
provides live means ( 11 , 51 , 52 , 53 ); and
Allows current to flow to the sample application part, which is brought into contact with the buffer solution ( 12 ), so that components of the sample ( 46 ) still adhering to the sample application part ( 25 ) after application of the sample ( 46 ) by electrophoretic forces into the solution ( 12 ) brought and thus removed from the sample application part ( 25 ).