DE69838338T2

DE69838338T2 - Verwendung von antimykotica zur topischen behandlung von pilz-induzierten schleimhautentzündungen

Info

Publication number: DE69838338T2
Application number: DE69838338T
Authority: DE
Inventors: Jens Rochester Ponikau
Original assignee: Jens Rochester Ponikau
Current assignee: Mayo Foundation for Medical Education and Research
Priority date: 1997-10-22
Filing date: 1998-10-22
Publication date: 2008-05-21
Anticipated expiration: 2018-10-23
Also published as: EP1857113A2; KR20060002015A; CA2308201A1; US20030091510A1; DK1024814T3; AU1195999A; JP2006096770A; HK1029935A1; BR9814615A; WO1999020261A3; WO1999020261A2; HUP0004170A2; US20050124561A1; US6291500B2; US20010002400A1; BG104371A; ES2292210T3; IS5463A; KR100883149B1; HUP0004170A3

Description

HINTERGRUND
1. Technisches Gebiet
Die Erfindung betrifft Verfahren und Materialien, die an der Behandlung und Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Entzündung von Schleimhautgewebe beteiligt sind.
2. Hintergrundinformation
Mukositis, die Entzündung des Schleimhautgewebes, ist ein ernsthaftes medizinisches Problem, das weltweit Millionen von Menschen betrifft. Zum Beispiel zeigen konservative Schätzungen, dass zwischen 20 und 40 Millionen Amerikaner an chronischer Rhinosinusitis leiden, einer Entzündung der Nasenhöhle und/oder der Nasennebenhöhlen.
Die Ursache der chronischen Rhinosinusitis ist größtenteils unbekannt. Bei einem kleinen Anteil der Patienten scheinen jedoch nichtinvasive Pilzorganismen beteiligt zu sein, die im Schleim leben. Patienten mit diesem Krankheitsbild, das jetzt als allergische Pilzsinusitis (Allergic Fungal Sinusitis, AFS) bekannt ist, wurden in den frühen achtziger Jahren des 20. Jahrhunderts zuerst beschrieben (Miller JW et al., Prod. Scot. Thor. Soc. 36:710 (1981) und Katzenstein ALA et al., J. Allergy Clin. immunol. 72:89–93 (1983)). Insbesondere wurden drei bis acht Prozent der chronischen Rhinosinusitisfälle, die aufgrund einer durch Polypenbildung verursachten Nasenobstruktion eine chirurgische Behandlung erforderten, als AFS klassifiziert. Kurz gesprochen wird AFS durch das Vorhandensein eingedickten Schleims in Nasenhöhle und Nasennebenhöhlen diagnostiziert. Typischerweise enthält dieser Schleim Klumpen oder Schichten von nekrotischen Eosinophilen, Charcot-Leyden-Kristallen und nichtinvasiven Pilzhyphen. Weiterhin haben Patienten mit AFS typischerweise eine Krankheitsgeschichte der Polypose in Nasenhöhle und Nasennebenhöhlen und können mehrfache chirurgische Eingriffe durchlaufen haben. Die Entzündung kann alle Nasen- und Nasennebenhöhlen betreffen, aber kann auch asymmetrisch sein und nur eine Seite erfassen. Computertomographie(CT)-Scans von AFS-Patienten haben ein typisches Erscheinungsbild und zeigen oftmals Knochenerosion in angrenzenden Strukturen. Tatsächlich wurde eine Zerstörung von an Höhlen- und Nasenbereiche angrenzenden Knochen in einem Anteil von 19 bis 80 Prozent berichtet.
Obwohl Pilzorganismen der auslösende Faktor von AFS zu sein scheinen, gibt es noch immer keine erfolgreiche Behandlung. Gegenwärtig erhalten AFS-Patienten, ebenso wie die meisten Patienten mit chronischer Rhinosinusitis, eine chirurgische Behandlung mit oder ohne Steroid-Therapie. Die chirurgische Behandlung trägt dazu bei, die Nasen- und Nasennebenhöhlen zu reinigen, wenn sie durch Polypen obstruiert sind, und die Steroid- Therapie trägt dazu bei, entzündliche Reaktionen unter Kontrolle zu bringen, die vermutlich die Gewebs- und Knochenzerstörung auslöst. Bedauerlicherweise erleben lediglich chirurgisch behandelte Patienten fast immer wiederkehrende Rhinosinusitissymptome und zusätzliches Polypenwachstum. Weiterhin geht eine verlängerte Steroid-Anwendung mit erheblichen Nebenwirkungen einher, und das Absetzen der Steroid-Therapie führt ebenfalls zu wiederkehrenden Rhinosinusitisepisoden. Aus diesen Gründen erleben Menschen, die unter chronischen Rhinosinusitiskrankheitsbildern leiden, typischerweise wiederholte Zyklen der intensiven Entzündung, des chirurgischen Eingriffs und der Steroid-Therapie, gefolgt von wiederkehrender heftiger Entzündung. Somit ist weder die chirurgische noch die Steroid-Behandlung als langfristige Behandlung für chronische rhinosinusitische Krankheitsbilder besonders wirksam oder wünschenswert.
ZUSAMMENFASSUNG
Die vorliegende Erfindung betrifft allgemein Verfahren und Materialien zur Behandlung und Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Mukositis. Der Begriff „Mukositis" wird hier verwendet, um eine Entzündung als Gegenbegriff zu einer Infektion einer Schleimhaut zu bezeichnen. Die vorliegende Erfindung basiert auf der Entdeckung, dass das als AFS bekannte Krankheitsbild erfolgreich behandelt werden kann, indem man ein Anti-Pilz-Mittel in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg anwendet, die wirksam sind, um die Entzündung zu verringern, die von der Gegenwart von Pilzorganismen im Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim verursacht wird. Weiterhin beruht diese Erfindung auf der Entdeckung, dass die Verwendung eines Anti-Pilz-Mittels in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg, die wirksam sind, ein verringertes Niveau von Pilzorganismen im Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim zu erhalten, die AFS-Symptome verhindern kann. insbesondere umfasst die Erfindung die Verwendung eines Anti-Pilz-Mittels zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung oder Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze induzierter Rhinosinusitis, wobei das Anti-Pilz-Mittel auf den Schleim eines Säugetiers einwirkt und die Gegenwart von Pilzorganismen im Schleim verringert. Abgesehen davon, dass sie das einzige bekannte Verfahren zur erfolgreichen Behandlung und Vorbeugung von AFS ist, ist die Verwendung eines Anti-Pilz-Mittels besonders vorteilhaft für einen Patienten im Vergleich zu anderen gegenwärtig verfügbaren medizinischen Behandlungen der AFS, wie z.B. chirurgischen Behandlungen und Steroid-Therapien. Solche medizinischen Ansätze können Nebenwirkungen haben, teuer sein und mit Unannehmlichkeiten für den Patienten einhergehen.
Die vorliegende Erfindung basiert auch auf der Entdeckung, dass die meisten, wenn nicht alle, chronischen Rhinosinusitis-Krankheitsbilder eine Pilz-Ätiologie haben und dass die meisten, wenn nicht alle, Fälle der chronischen Rhinosinusitis behandelt werden können, indem man ein Anti-Pilz-Mittel in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg verwendet, die wirksam sind, um die Gegenwart von Pilzorganismen im Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim zu verringern. Weiterhin kann die Verwendung eines Anti-Pilz-Mittels in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg, die wirksam sind, ein verringertes Niveau an Pilzorganismen im Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim zu erhalten, die Symptome der chronischen Rhinosinusitis verhindern.
Diese Entdeckung widerspricht dem gegenwärtigen Bild der chronischen Rhinosinusitis und hat weitreichende Implikationen innerhalb der Medizin. Zum Beispiel beschreiben zahlreiche medizinische Forschungsartikel, dass etwa drei bis acht Prozent der chronischen Rhinosinusitisfälle, die einen chirurgischen Eingriff erfordern, AFS seien, ein Rhinosinusitis-Krankheitsbild mit einer Ätiologie nichtinvasiver Pilze. Tatsächlich wurden in der Literatur im Laufe der letzten 15 Jahre weniger als 150 AFS-Fälle berichtet. Es wird angemerkt, dass das mangelnde Bewusstsein für die Ätiologie nichtinvasiver Pilze der Krankheitsbilder einer chronischen Rhinosinusitis dadurch bedingt sein kann, dass betroffene Personen häufig bakterielle Infektionen (d.h. invasive Bakterien) haben. Vermutlich führt der Schaden, der durch eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Entzündung verursacht wird, zu einem häufigeren Eintreten bakterieller Infektionen in diesen geschädigten Regionen. Somit können überlagerte bakterielle Infektionen bei betroffenen Personen die zugrunde liegende Ursache, Pilzorganismen im Schleim, maskiert haben.
Für die Zwecke der vorlegenden Erfindung umfasst der Begriff „durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis" AFS ebenso wie jedes andere Krankheitsbild einer Nasen- und Nasennebenhöhlen-Mukositis mit einer Ätiologie nichtinvasiver Pilze.
Die Behandlung und Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis, ob als AFS diagnostiziert oder irgendein Rhinosinusitis-Krankheitsbild mit einer Ätiologie nichtinvasiver Pilze, durch Verwendung eines Anti-Pilz-Mittels umgeht die Notwendigkeit chirurgischer Behandlungen und Steroid-Therapien, die dem Patienten ein erhebliches Maß an Schmerz und Leiden bereiten. Weiterhin richtet die Verwendung von Anti-Pilz-Mitteln zur Behandlung und Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis die Behandlung tatsächlich gegen den ätiologischen Auslöser (d.h. den Pilz), im Gegensatz zu chirurgischen Behandlungen, Steroid-Therapien und antibakteriellen Behandlungen.
Der Begriff „chronisch" wird hier verwendet, um Erkrankungen zu bezeichnen, die über mindestens drei Monate hinweg vorliegen. Es versteht sich, dass Erkrankungen, die wie hier beschrieben behandelt werden und asymptomatisch werden, als chronisch klassifi ziert werden können. Somit können chronische Erkrankungen symptomatisch oder asymptomatisch sein.
Insbesondere stellt die Erfindung Verfahren und Materialien zur Behandlung und Vorbeugung einer großen Anzahl von mukoinflammatorischen Erkrankungen durch Verwendung eines Anti-Pilz-Mittels bereit. Die Verwendung eines Anti-Pilz-Mittels ist ein sicherer und hocheffizienter Behandlungsansatz, der es umfasst, ein Anti-Pilz-Mittel in einer Menge mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg an die Schleimhaut zu verabreichen, die wirksam sind, um eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis zu verringern, zu verhindern oder zu eliminieren. Der Begriff „Verabreichung an die Schleimhaut" wird hier verwendet, um jede Art von Verabreichung zu bezeichnen, die ein verabreichtes Mittel in Kontakt mit dem Schleim bringt. Die Erfindung stellt auch spezifische Anti-Pilz-Formulierungen bereit, die an den verschiedenen Teilen eines Säugers, die Schleim enthalten, aufgetragen werden können. Darüber hinaus stellt die Erfindung medizinische Geräte bereit, die verwendet werden können, um Anti-Pilz-Formulierungen aufzutragen. Diese Geräte sind besonders vorteilhaft, da sie von einer Person verwendet werden können, um eine wirksame Dosis einer bestimmten Anti-Pilz-Formulierung auf die betreffende Körperfläche aufzutragen. Weiterhin stellt die Erfindung verbesserte Verfahren und Materialien zur Gewinnung und Kultur von Pilzorganismen aus Schleimproben bereit. Diese Kulturtechniken können verwendet werden, um die Anzahl von Pilzspezies im Schleim während einer bestimmten Anti-Pilz-Behandlungskur zu überwachen. Weiterhin sind diese Pilzsammel- und Kulturverfahren und -materialien nützlich zur Identifikation von Genotyp und Phänotyp bestimmter Pilzorganismen, die durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis verursachen. Die Identifikation und Charakterisierung nichtinvasiver Pilzorganismen, die im Schleim eines bestimmten Individuums gefunden werden, können Klinikern helfen, richtige Behandlungs- und Vorbeugeansätze festzulegen. Diese Information kann z.B. dabei helfen, das spezifische Anti-Pilz-Mittel, seine Menge, seinen Verabreichungsweg und die Anzahl der anzuwendenden Verabreichungen ebenso wie mögliche Kombinationstherapien festzulegen, die andere Medikationen und Verfahren umfassen können, wie z.B. Steroide, antibakterielle Mittel und Chirurgie.
Grundsätzlich beschreibt die Erfindung ein Verfahren zur Behandlung eines Säugers (z.B. eines Menschen) mit durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis. Bei diesem Verfahren appliziert man eine Formulierung in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg, die wirksam sind, um eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu verringern oder zu eliminieren, in mindestens einem Teil der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie des Säugers auf die Schleimhaut. Diese Formulierung enthält ein Anti-Pilz-Mittel oder eine Mehrzahl von Anti-Pilz-Mitteln und kann in einer festen, flüssigen oder aerosolischen Form vorliegen (z.B. als Pulver, kristalline Substanz, Gel, Paste, Öl, Salbe, Creme, Lösung, Suspension, Teilflüssigkeit, Spray, Nebel, atomisierter Dampf, Aerosol und Tinktur). Weiterhin kann die Formulierung eine Form haben, die zur Selbstverabreichung an die Schleimhaut durch einen Menschen geeignet ist.
Weiterhin kann die Formulierung einen pharmazeutisch akzeptablen wässrigen Trägerstoff (z.B. Kochsalzlösung und Wasser) enthalten. Zum Beispiel kann eine Flüssigform der Formulierung etwa 0,00001 Prozent bis etwa 20 Prozent eines Anti-Pilz-Mittels enthalten, bestimmt als Gewicht des Anti-Pilz-Mittels pro Volumen des wässrigen Trägerstoffs. Weiterhin kann die Formulierung in einigen Ausführungsformen der Erfindung etwa 0,01 ng bis etwa 1000 mg eines Anti-Pilz-Mittels (z.B. Amphotericin B) pro Liter enthalten oder in anderen Ausführungsformen der Erfindung etwa 1 ng bis etwa 500 mg pro Liter eines Anti-Pilz-Mittels, oder in noch anderen Ausführungsformen der Erfindung etwa 100 mg pro Liter eines Anti-Pilz-Mittels. Weiterhin kann eine wirksame Menge dieser wässrigen Formulierungen in einigen Ausführungsformen der Erfindung etwa 0,01 ml bis etwa 1 l der Formulierung pro Nasenloch oder in anderen Ausführungsformen der Erfindung etwa 5 ml bis etwa 100 ml der Formulierung pro Nasenloch, oder in noch anderen Ausführungsformen der Erfindung etwa 40 ml Formulierung pro Nasenloch betragen. Alternativ kann in einigen Ausführungsformen der Erfindung eine wirksame Menge einer Formulierung etwa 0,01 ng bis etwa 1000 mg Anti-Pilz-Mittel pro kg Körpergewicht des Säugers oder in anderen Ausführungsformen der Erfindung etwa 1 ng bis etwa 500 mg Anti-Pilz-Mittel pro kg Körpergewicht des Säugers betragen. Die wirksame Menge einer Formulierung kann sich über einen wirksamen Zeitraum hinweg ändern oder gleich bleiben. Die wirksame Häufigkeit der direkten Verabreichung an die Schleimhaut kann in einigen Ausführungsformen der Erfindung von etwa vier Mal am Tag bis etwa ein Mal in jeder zweiten Woche, oder in anderen Ausführungsformen der Erfindung von etwa zwei Mal am Tag bis etwa ein Mal in der Woche, oder in noch anderen Ausführungsformen der Erfindung etwa zwei Mal am Tag sein. Weiterhin kann die wirksame Häufigkeit der direkten Verabreichung an die Schleimhaut größer als ein Mal am Tag oder größer als ein Mal in der Woche sein. Der wirksame Zeitraum kann größer als etwa 7, 14, 30, 60 oder 90 Tage sein.
Der Säuger kann atopisch oder nichtatopisch und immunkompetent oder immunkompromittiert sein. Weiterhin kann die durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis durch Polypenbildung oder polypoide Veränderung gekennzeichnet sein. Die durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis kann auch ein chronischer Krankheitszustand sein. Die Verabreichung an die Schleimhaut kann eine Spülung wenigstens eines Teils der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie mit einer flüssigen Form der Formulierung sein. Al ternativ kann es die Verabreichung an die Schleimhaut umfassen, dass man eine Aerosolform der Formulierung auf mindestens einen Teil der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie aufträgt. Ein Anti-Pilz-Mittel kann in einer festen, in einer flüssigen oder in einer Aerosolform vorliegen. Weiterhin kann ein Anti-Pilz-Mittel ein Polyenmakrolid, ein Tetraenmakrolid, ein Pentaenmakrolid, ein fluoriniertes Pyrimidin, ein Imidazol, ein Azol, ein Triazol, ein halogenierter Phenolether, ein Thiocarbamat, ein Allylamin, ein Sterolinhibitor und ein Mittel, das sich zwischen Pilzzellwandbestandteile einbaut, sein. Zu solchen Anti-Pilz-Mitteln gehören Amphotericin B, Flucytosin, Ketoconazol, Miconazol, Itraconazol, Fluconazol, Griseofulvin, Clotrimazol, Econazol, Terconazol, Butoconazol, Oxiconazol, Sulconazol, Saperconazol, Voriconazol, Ciclopiroxolamin, Haloprogin, Tolnaftat, Naftifin, Terbinafinhydrochlorid, Morpholin, Nystatin, Natamycin, Butenafin, Undecylensäure, Whitefield's Ointment, Propionsäure und Caprylsäure. Zusätzlich zu einem Anti-Pilz-Mittel kann die Formulierung ohne Beschränkung darauf einen pharmazeutisch akzeptablen wässrigen Trägerstoff, einen pharmazeutisch akzeptablen festen Trägerstoff, ein Steroid, ein Mukolytikum, ein antibakterielles Mittel, ein antiinflammatorisches Mittel, ein Immunsuppressivum, einen Dilator, einen Vasokonstriktor, ein abschwellendes Mittel, einen Leukotrieninhibitor, anticholinerge, antihistaminische, therapeutische Verbindungen und Kombinationen davon enthalten.
Das Verfahren kann es auch umfassen, dass man eine zweite Formulierung verabreicht, die ohne Beschränkung darauf ein Anti-Pilz-Mittel, ein antibakterielles Mittel, ein Steroid, ein Mukolytikum, ein antiflammatorisches Mittel, ein Immunsuppressivum, einen Dilator, einen Vasokonstriktor, ein abschwellendes Mittel, einen Leukotrieninhibitor, anticholinerge, antihistaminische, therapeutische Verbindungen oder eine Kombination davon enthält. Ebenso kann das Verfahren einen zusätzlichen Schritt nach der direkten Verabreichung an die Schleimhaut umfassen. Dieser zusätzliche Schritt kann eine prophylaktische Verabreichung einer prophylaktischen Formulierung an die Schleimhaut des Säugers in einer Menge mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg sein, die wirksam eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis verhindern. Diese prophylaktische Formulierung enthält auch ein Anti-Pilz-Mittel und kann in einer festen, flüssigen oder aerosolen Form vorliegen (z.B. als Pulver, kristalline Substanz, Gel, Paste, Öl, Salbe, Creme, Lösung, Suspension, Teilflüssigkeit, Spray, Nebel, atomisierter Dampf, Aerosol, Tinktur, Pille, Kapsel, Tablette, Gelcap). Weiterhin kann die prophylaktische Verabreichung an die Schleimhaut eine direkte oder indirekte Verabreichung an die Schleimhaut sein. Zum Beispiel kann die prophylaktische Verabreichung an die Schleimhaut eine Spülung mindestens eines Teils der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie mit einer flüssigen Form der prophylaktischen Formulierung, ein Auftragen einer Aerosolform der prophylaktischen Formulierung auf mindestens einen Teil der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie oder eine orale Verabreichung der prophylaktischen Formulierung des Säugers in der Form eines Feststoffes oder einer Flüssigkeit sein.
Es versteht sich, dass jedes der zusätzlichen Merkmale der Erfindung, die oben beschrieben sind, auf die folgenden weiteren Ausführungsformen und Aspekte der Erfindung angewandt werden kann. Zum Beispiel können Verfahren zur prophylaktischen Behandlung eines Säugers, der gefährdet ist, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu entwickeln, und Verfahren zur Behandlung von Asthma eine Formulierung verwenden, in der das Anti-Pilz-Mittel etwa 0,00001 Prozent bis etwa 20 Prozent (Gewichtsprozent oder Volumenprozent) einer Formulierung beträgt usw.
In einer anderen Ausführungsform beschreibt die Erfindung ein Verfahren zur prophylaktischen Behandlung eines Säugers, der gefährdet ist, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu entwickeln. Bei diesem Verfahren appliziert man auf die Schleimhaut des Säugers eine Formulierung in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg der Schleimhaut, die wirksam eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis verhindert. Diese Formulierung enthält ein Anti-Pilz-Mittel.
Eine andere Ausführungsform der Erfindung beschreibt ein Verfahren zur Behandlung eines Säugers mit durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis. Bei diesem Verfahren identifiziert man den Säuger (z.B. durch Diagnose) und appliziert auf die Schleimhaut des Säugers eine Formulierung in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg, die wirksam eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis verhindert. Diese Formulierung enthält ein Anti-Pilz-Mittel.
In einer anderen Ausführungsform beschreibt die Erfindung ein Verfahren zur prophylaktischen Behandlung eines Säugers, der gefährdet ist, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu entwickeln. Bei diesem Verfahren identifiziert man den Säuger (z.B. durch Diagnose) und appliziert auf die Schleimhaut des Säugers eine Formulierung in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg, die wirksam eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis verhindert. Diese Formulierung enthält ein Anti-Pilz-Mittel.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung einen Fertigungsgegenstand, der Verpackungsmaterial (z.B. Schachteln, Verpackungen, Phiolen und andere Behälter) und eine Formulierung, enthalten in Verpackungsmaterial, enthält. Diese Formulierung enthält ein Anti-Pilz-Mittel. Das Verpackungsmaterial enthält ein Etikett oder eine Verpackungseinlage, die anzeigt, dass die Formulierung in mindestens einem Teil der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie eines Säugers mit durch nichtinvasive Pilze induzierter Rhinosinusitis in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg auf die Schleimhaut verabreicht werden kann, die wirksam sind, um die durch nichtinvasive Pilze induzierte Rhinosinusitis zu verringern oder zu eliminieren.
In einer anderen Ausführungsform beschreibt die Erfindung einen Fertigungsgegen stand, der Verpackungsmaterial und eine Formulierung, enthalten in Verpackungsmaterial, enthält. Diese Formulierung enthält ein Anti-Pilz-Mittel und das Verpackungsmaterial enthält ein Etikett oder eine Verpackungseinlage, die anzeigt, dass die Formulierung in mindestens einem Teil der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie eines Säugers mit durch nichtinvasive Pilze induzierter Rhinosinusitis in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg auf die Schleimhaut verabreicht werden kann, die wirksam sind, um die durch nichtinvasive Pilze induzierte Rhinosinusitis zu verringern oder zu eliminieren.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine Anti-Pilz-Formulierung, die ein Anti-Pilz-Mittel, einen Geschmacksstoff und Wasser enthält. Das Wasser stellt mindestens etwa 50 Prozent der Formulierung dar. Zum Beispiel kann das Wasser mindestens etwa 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 oder 99 Prozent der Formulierung darstellen.
In einer anderen Ausführungsform beschreibt die Erfindung ein Anti-Pilz-Mittel, das Itraconazol und Wasser enthält. Das Itraconazol ist in der Formulierung mit einer Konzentration von mehr als etwa 25 μg pro ml gelöst. Zum Beispiel kann das Itraconazol in der Formulierung mit einer Konzentration von mehr als etwa 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170 oder 180 μg pro ml gelöst sein. Weiterhin stellt das Wasser mindestens etwa 50 Prozent der Formulierung dar. Zum Beispiel kann das Wasser mindestens etwa 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 oder 99 Prozent der Formulierung darstellen. Die Formulierung kann auch Polyethylenglykol enthalten (z.B. PEG-200, PEG-400, PEG-800 usw.). Die Formulierung kann auch Geschmacksstoffe enthalten (z.B. Pfefferminzöl, Kirscharoma, Sirup und dergleichen).
In einer anderen Ausführungsform beschreibt die Erfindung eine Anti-Pilz- Formulierung, die Itraconazol und Wasser enthält. Das Itraconazol ist in der Lösung in einer Konzentration von mehr als etwa 25 μg pro ml suspendiert. Zum Beispiel kann das Itraconazol in der Formulierung mit einer Konzentration von mehr als etwa 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170 oder 180 μg pro ml suspendiert sein. Weiterhin stellt das Wasser mindestens etwa 50 Prozent der Formulierung dar. Zum Beispiel kann das Wasser mindestens etwa 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 oder 99 Prozent der Formulierung darstellen. Die Formulierung kann auch Polyethylenglykol enthalten (z.B. PEG-200, PEG-400, PEG-800 usw.). Die Formulierung kann auch Geschmacksstoffe enthalten (z.B. Pfefferminzöl, Kirscharoma, Sirup und dergleichen).
In einer anderen Ausführungsform beschreibt die Erfindung eine Anti-Pilz-Formulierung, die ein Anti-Pilz-Mittel, einen Geschmacksstoff und Wasser enthält. Das Wasser stellt mindestens etwa 50 Prozent der Formulierung dar. Zum Beispiel kann das Wasser mindestens etwa 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 oder 99 Prozent der Formulierung darstellen. Außerdem kann das Anti-Pilz-Mittel Amphotericin B, Ketoconazol, Saperconazol, Voriconazol, Flucytosin, Miconazol, Fluconazol, Griseofulvin, Clotrimazol, Econazol, Teconazol, Butoconazol, Oxiconazol, Sulconazol, Ciclopiroxolamin, Haloprogin, Tolnaftat, Naftifin, Terbinafinhydrochlorid, Morpholine, Nystatin, Natamycin, Butenafin, Undecylensäure, Whitefield's Ointment, Propionsäure und Caprylsäure sein.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung einer Anti-Pilz-Formulierung. Die Formulierung enthält Itraconazol und Wasser. Das Itraconazol ist in der Lösung in einer Konzentration von mehr als etwa 25 μg pro ml gelöst. Zum Beispiel kann das Itraconazol in der Formulierung mit einer Konzentration von mehr als etwa 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170 oder 180 μg pro ml gelöst sein. Das Wasser stellt mindestens etwa 50 Prozent der Formulierung dar. Zum Beispiel kann das Wasser mindestens etwa 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 oder 99 Prozent der Formulierung darstellen. Das Verfahren umfasst die Zugabe von Wasser zu einer Stammlösung, die das Itraconazol enthält.
In einem anderen Aspekt betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Kultur von Pilzen aus dem Schleim eines Säugers. Dieses Verfahren umfasst, dass man (1) den Schleim mit einem Mukolytikum in Kontakt bringt, um die Viskosität des Schleimes zu verringern, (2) den Pilz von dem Schleim mit verringerter Viskosität abtrennt, (3) den abgetrennten Pilz mit Pilzkulturmedium in Kontakt bringt, um eine Pilzkultur zu erstellen, und (4) die Pilzkultur inkubiert, so dass der abgetrennte Pilz wächst.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung ein Verfahren zum Erhalt eines Pilzantigens. Das Verfahren umfasst, dass man (1) den Schleim mit einem Mukolytikum in Kontakt bringt, um die Viskosität des Schleimes zu verringern, (2) den Pilz von dem Schleim mit verringerter Viskosität abtrennt, (3) den abgetrennten Pilz mit Pilzkulturmedium in Kontakt bringt, um eine Pilzkultur zu erstellen, (4) die Pilzkultur inkubiert, so dass der abgetrennte Pilz wächst und (5) das Antigen von dem kultivierten Pilz isoliert.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung eines pilzspezifischen Antikörpers. Das Verfahren umfasst, dass man (1) den Schleim mit einem Mukolytikum in Kontakt bringt, um die Viskosität des Schleimes zu verringern, (2) den Pilz von dem Schleim mit verringerter Viskosität abtrennt, (3) den abgetrennten Pilz mit Pilzkulturmedium in Kontakt bringt, um eine Pilzkultur zu erstellen, (4) die Pilzkultur inkubiert, so dass der abgetrennte Pilz wächst, (5) das Antigen von dem kultivierten Pilz isoliert und (6) ein Tier mit dem Pilzantigen immunisiert, um den Antikörper herzustellen.
Im anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine Vorrichtung zum Sammeln von Nasenschleim. Die Vorrichtung umfasst einen Sammelbehälter, ein Sammelröhrchen und ein Verbindungsteil. Der Sammelbehälter ist geeignet, um Schleim aufzunehmen. Das Sammelröhrchen erstreckt sich von dem Sammelbehälter und definiert ein distales Ende und ein Lumen, so dass sich der Schleim durch das Lumen von dem distalen Ende des Sammelröhrchens zu dem Sammelbehälter bewegen kann. Das Sammelröhrchen ist grundsätzlich in mindestens einem Bereich der Röhrchenlänge flexibel, so dass das Sammelröhrchen von einem Anwender selektiv in eine gewünschte Position während des Gewinnungsverfahrens gebracht werden kann. Das Sammelröhrchen ist weiterhin grundsätzlich verformbar, so dass das Sammelröhrchen grundsätzlich die gewünschte Konfiguration beibehält, bis der Anwender es in eine andere Konfiguration bringt. Das Verbindungsteil erstreckt sich von dem Sammelbehälter und definiert ein zweites Lumen, das mit dem Inneren des Sammelbehälters kommuniziert. Das Verbindungsteil ist darauf ausgelegt, eine Vakuumquelle anzuschließen. Weiterhin kann die Vorrichtung ein Ventil enthalten, das die Öffnung des zweiten Lumens einstellt. Der Sammelbehälter kann von dem Sammelröhrchen und dem Verbindungsteil abtrennbar sein.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung, die ein Anti-Pilz-Mittel enthält.
In einer anderen Ausführungsform beschreibt die Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung, die ein Anti-Pilz-Mittel und ein Mukolytikum enthält.
Eine andere Ausführungsform beschreibt eine pharmazeutische Zusammensetzung, die ein Anti-Pilz-Mittel und ein Steroid enthält.
Eine andere Ausführungsform beschreibt eine pharmazeutische Zusammensetzung, die ein Anti-Pilz-Mittel und ein abschwellendes Mittel enthält.
Eine andere Ausführungsform beschreibt eine pharmazeutische Zusammensetzung, die ein Anti-Pilz-Mittel und ein Antibiotikum enthält.
Eine andere Ausführungsform beschreibt eine pharmazeutische Zusammensetzung, die ein Anti-Pilz-Mittel und ein Antiinflammatorikum enthält.
Eine andere Ausführungsform beschreibt eine pharmazeutische Zusammensetzung, die ein Anti-Pilz-Mittel und ein Antihistaminikum enthält.
Eine andere Ausführungsform beschreibt eine pharmazeutische Zusammensetzung, die ein Anti-Pilz-Mittel und ein Anticholinergikum enthält.
Eine andere Ausführungsform beschreibt eine pharmazeutische Zusammensetzung, die ein Anti-Pilz-Mittel und ein Leukotrieninhibitor enthält.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine Zusammensetzung zur Behandlung einer Immunreaktion auf einen Pilz bei einem Säuger, gekennzeichnet durch ein Mittel, das zur direkten Verabreichung auf die Schleimhaut des Säugers konfiguriert ist und Anti-Pilz-Mittel zur Elimination oder Verringerung des Pilzes unterhalb einem Schwellenwert hat, wodurch der Pilz aufhört, die Einwanderung von Eosinophilen in den betroffenen Bereich zu aktivieren.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung eines mit einem Pilz im Zusammenhang stehenden Krankheitsbildes in der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie eines Säugers, wobei diese Zusammensetzung eine wirksame Dosis eines Anti-Pilz-Mitteis, wie hier beschrieben, enthält.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung eines mit einem Pilz im Zusammenhang stehenden Krankheitsbildes in der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie oder Darmanatomie eines Säugers, wobei diese Zusammensetzung eine wirksame Dosis eines Anti-Pilz-Mittels und mindestens eines anderen Mittels oder Inhibitors, wie hier beschrieben, enthält.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung eines mit einem Pilz im Zusammenhang stehenden Krankheitsbildes in der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie oder Darmanatomie eines Säugers, wobei diese Zusammensetzung eine wirksame Dosis eines Anti-Pilz-Mittels enthält, die zur langfristigen Verwendung innerhalb der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie geeignet ist.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine Medikation zur Behandlung einer Sinusitis, die ein Mukolytikum und ein Anti-Pilz-Mittel, wie hier beschrieben, enthält.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine medizinische Spülung zur Behandlung eines entzündeten Nasenbereichs eines Patienten, wobei die Entzündung des Nasenbereichs durch die Gegenwart eines Pilzes verursacht ist und die medizinische Spülung wirksame Dosen eines Anti-Pilz-Mittels und eines Steroids, wie hier beschrieben, enthält.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine medizinische Spülung zur Behandlung eines entzündlichen Nasenbereichs eines Patienten, wobei die Entzündung des Nasenbereichs durch die Gegenwart eines Pilzes verursacht ist und die medizinische Spülung wirksame Dosen eines Anti-Pilz-Mittels und eines Mukolytikum, wie hier beschrieben, enthält.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine medizinische Spülung zur Behandlung eines entzündeten Nasenbereichs eines Patienten, wobei die Entzündung des Nasenbereichs durch die Gegenwart eines Pilzes verursacht ist und die medizinische Spülung wirksame Dosen eines Steroids und eines Mukolytikums, wie hier beschrieben, enthält.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine medizinische Spülung zur Behandlung eines entzündeten Nasenbereichs eines Patienten, wobei die Entzündung des Nasenbereichs durch die Gegenwart eines Pilzes verursacht ist und die medizinische Spülung wirksame Dosen eines Anti-Pilz-Mittels, eines Steroids und eines Mukolytikums, wie hier beschrieben, enthält.
In einem anderen Aspekt beschreibt die Erfindung eine medizinische Spülung zur Behandlung eines entzündeten Nasenbereichs eines Patienten, wobei die Entzündung des Nasenbereichs durch die Gegenwart eines Pilzes verursacht ist und die medizinische Spülung wirksame Dosen eines Anti-Pilz-Mittels, eines Steroids, eines Mukolytikums und beliebige Kombinationen davon, wie hier beschrieben, enthält.
Soweit nicht anders definiert, haben alle technischen und wissenschaftlichen Ausdrücke, die hier verwendet werden, die gleiche Bedeutung, wie sie normalerweise vom Durchschnittsfachmann im relevanten Wissensgebiet verstanden ist. Obwohl zur Überprüfung oder Ausführung der vorliegenden Erfindung zu den hier beschriebenen ähnliche oder äquivalente Verfahren oder Materialien verwendet werden können, werden geeignete Verfahren und Materialien nachfolgend beschrieben. Alle Publikationen, Patentanmeldungen, Patente und andere Quellen, die hier angegeben werden, sind vollständig durch Bezugnahme aufgenommen. Im Konfliktfall gilt die vorliegende Beschreibung einschließlich der Definitionen. Weiterhin sind die Materialien, Verfahren und Beispiele nur illustrativ und nicht als beschränkend zu verstehen. Andere Merkmale und Vorteile der Erfindung sind aus der nachfolgenden detaillierten Beschreibung und den Ansprüchen zu entnehmen.
BESCHREIBUNG DER ZEICHNUNGEN
1 ist ein CT-Scan eines Patienten mit bilateraler chronischer Rhinosinusitis.
2 ist ein CT-Scan des Patienten aus 1, vier Monate später, nach Behandlung mit Anti-Pilz-Spülungen.
3 ist ein Diagramm, das eine Vorrichtung zum Sammeln von Schleim darstellt.
4 ist ein Diagramm, das eine Vorrichtung zum Sammeln von Schleim darstellt.
DETALLIERTE BESCHREIBUNG
Die Erfindung umfasst Verfahren und Materialien zur Behandlung und Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Mukositis. Insbesondere umfasst die Erfindung, ein Anti-Pilz-Mittel in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg auf eine Schleimhaut zu applizieren, die wirksam sind, eine chronische durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu verhindern, zu verringern oder zu eliminieren. Die Erfindung stellt auch Verfahren und Materialien zur Diagnose einer chronischen durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Rhinosinusitis und zur Kultur nichtinvasiver Pilze aus einer Säugerschleimprobe sowie spezifische Anti-Pilz-Formulierungen und medizinische Geräte zur Behandlung und Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis bereit.
Ohne Beschränkung auf irgendeine bestimmte Wirkungsweise, beruht die vorliegende Erfindung, die die Behandlung und Vorbeugung einer durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Entzündung von Schleimhautgewebe durch Verwendung eines Anti-Pilz-Mittels umfasst, auf dem folgenden vorgeschlagenen Mechanismus der Krankheitsprogression, der aus den hier beschriebenen Entdeckungen abgeleitet wurde. Im Allgemeinen leben im Schleim der meisten, wenn nicht aller, Individuen Pilzorganismen. Normalerweise tolerieren die meisten Individuen diese nichtinvasiven Organismen und leben ein normales Leben ohne Erkrankung. Aus unbekannten Gründen tolerieren einige Individuen diese Pilzorganismen nicht und beginnen, eine Immunantwort gegen sie zu lancieren. Mit dem Fortschreiten der Immunantwort akkumulieren Eosinophile in dem lokalen Gewebe. Diese Eosinophilenakkumulation kann zur Bildung von obstruktiven Gewebsmassen (z.B. Polypen oder polypoiden Strukturen) sowie zur Transmigration aktivierter Eosinophile aus dem Gewebe (im Körperinneren) in den Schleim (außerhalb des Körpers) beitragen. Diese obstruktiven Gewebsmassen scheinen eine normale Reinigung der Körperhöhlen zu verhindern und können somit weiteres Pilzwachstum begünstigen. Sobald Eosinophile in dem Schleim sind, können sie den Inhalt ihrer Granula entleeren, vermutlich aufgrund einer Aktivierung von oberflächenständigen Fc-Rezeptoren. Eosinophilengranula enthalten viele toxische Moleküle, wie z.B. Eosinophilen-Kationprotein (ECP), Eosinophilen-Peroxidase (EPO) und Major Basic Protein (MBP). Bei der Freisetzung können diese toxischen Moleküle sowohl die fremden Mikroorganismen (z.B. Pilze), gegen die sie gerichtet sind, wie auch die körpereigenen Gewebe schädigen. Das Ausmaß des durch die Eosinophilenakkumulation und Eosinophilendegranulation verursachten Schadens variiert in erheblichen Ausmaße von leichtem entzündlichen Schmerz und Unbehagen bis zu größeren strukturellen Abnormitäten, wie Gewebs- und Knochenzerstörung und Bildung von Polypen, polypoiden Strukturen und anderen Tumoren. Sobald die körpereigenen Gewebe beschädigt sind, kann das Individuum auch eine erhöhte Empfindlichkeit gegenüber bakteriellen Infektionen haben. Somit werden die charakteristischen Entzündungsreaktionen, die sich daraus ergebenden Schäden und sich daraus ergebenden bakteriellen Infektionen, die bei den meisten, wenn nicht allen, chronischen Rhinosinusitis-Patienten beobachtet werden, tatsächlich durch nichtinvasive Pilzorganismen ausgelöst.
Es verdient Erwähnung, dass unter Bedingungen einer extremen Mukositis mit Gewebs- und Knochenzerstörung Pilzorganismen einfach deswegen innerhalb des Gewebes beobachtet werden können, weil die Barriere (d.h. das Epithel) zwischen dem Körperinneren und der Körperaußenseite beschädigt oder zerstört wurde. In diesen Situationen hält der Umstand, dass man lediglich die Gegenwart einer kleinen Anzahl von Pilzorganismen innerhalb eines umrissenen Gebietes der Gewebeschädigung beobachtet, nicht von der Tatsache ab, dass die Erkrankung eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis und keine Infektion ist.
Wie oben beschrieben, ist eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis eine Entzündung und keine Infektion. Im Allgemeinen sind Entzündungen grundsätzlich und klinisch von Infektionen verschieden. Eine Infektion ist definiert als das Wachstum eines Organismus innerhalb von Gewebe. Weiterhin ist eine Infektion gekennzeichnet als eine invasive Erkrankung, was bedeutet, dass ein infektiöser Organismus in das Gewebe eines Wirts eindringt und dann eine Wirtsimmunreaktion auslöst und/oder Schaden verursacht. Somit ist die Rolle des infektiösen Organismus typischerweise die eines invasiven Pathogens. Weiterhin kann ein infiziertes Individuum immunkompetent oder immunkompromittiert sein. Wenn das infizierte Individuum immunkompromittiert ist, wird die Infektion oftmals als „opportunistische" Infektion bezeichnet. Weiterhin können Infektionen in Abhängigkeit von mehreren Faktoren, wie z.B. der Kompetenz des Immunsystems des infizierten Individuums, der Natur des invasiven Pathogens und der Verfügbarkeit medizinischer Behandlungen, akut oder chronisch sein.
Im Gegensatz dazu ist eine Entzündung gekennzeichnet als eine lokale Schutzantwort, die dazu dient, ein schädliches Agens oder eine Wunde zu zerstören, zu verdünnen und/oder zu sequestrieren. Weiterhin führt eine inflammatorische Antwort typischerweise zu Rötung, Schwellung, Hitze und Schmerz. Im Fall einer durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Mukositis ist die lokalisierte Schutzantwort gegen einen nichtinvasiven Pilzorganismus gerichtet, der außerhalb des Gewebes lebt (z.B. im Schleim). Typischerweise sind einige Individuen, die an einer durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Mukositis leiden, atopisch und/oder immunkompetent. Weiterhin ist die Rolle des schädlichen Agens (d.h. des Pilzes) die eines nichtinvasiven Allergens. Somit ist eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis eine allergische Reaktion, die von dem Immunsystem des Individuums gegen einen Pilzorganismus, der außerhalb des Gewebes des Individuums lebt, lanciert wird.
Wie hier beschrieben, stellt die Erfindung Verfahren und Materialien bereit, die die Gegenwart von Pilzorganismen im Schleim auf ein Niveau und über einen Zeitraum hinweg reduzieren, so dass die charakteristische entzündliche Antwort und die sich daraus erge benden Schädigungen, die mit der Mukositis einhergehen, beendet, behandelt oder verhindert werden. Zur Verdeutlichung ähnelt die Verringerung der vorhandenen Pilzorganismen im Schleim zur Behandlung oder Vorbeugung von Mukositis der Entfernung eines Allergens (z.B. Pollen) aus der Gegenwart eines an einer allergischen Reaktion (z.B. Heuschnupfen) leidenden Individuums. Die allergische Reaktion gegen z.B. Pollen ist wiederum keine Infektion, sondern eine Entzündung. Weiterhin betont die Einfachheit dieser Erfindung die weitreichenden klinischen Implikationen, die sich aus diesen Entdeckungen ergeben. Zum Beispiel werden Millionen von Menschen imstande sein, gesündere, glücklichere und produktivere Leben zu führen, wenn die Kliniker verstanden haben werden, dass die meisten, wenn nicht alle Fälle chronischer Rhinosinusitis durch nichtinvasive Pilzorganismen verursacht werden und dass diese entzündliche Erkrankung dadurch behandelt und ihnen vorgebeugt werden kann, dass man das Niveau der nichtinvasiven Pilzorganismen im Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim verringert, wobei man die hier beschriebenen Verfahren und Materialien verwendet.
Identifikation von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Mukositis
Eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis ist definiert als eine Entzündung eines beliebigen Schleimhautgewebes, die durch einen nichtinvasiven Pilzorganismus ausgelöst wird. Zu den Beispielen von Schleimhäuten gehören ohne Beschränkung darauf die Schleimhäute des Mundes, des Darmes, der nasalen Atemwege, der Nasennebenhöhlen, der Lungenatemwege, der Luftröhre, des Mittelohres, des eustachischen Tubus, der Vagina und der Harnleiter. Grundsätzlich kann eine Entzündung einer Schleimhaut durch jedes beliebige dem Fachmann vertraute Verfahren festgestellt werden. Beispielsweise kann eine unter einer Entzündung einer Schleimhaut leidende Person anhand der Untersuchung einer Gewebsbiopsie, sowie durch visuelle Untersuchung, endoskopische Analyse und bildgebende Verfahren (z.B. Röntgen, CT-Scans und Magnetresonanzscans (MRI)) identifiziert werden, da die verschiedenartigen entzündeten Schleimhautanatomien im Allgemeinen beobachtbare abnormale Merkmale zeigen.
Es können mehrfache diagnostische Verfahren verwendet werden, um zu bestimmen, ob eine bestimmte Mukositis eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis ist. Im Allgemeinen gehören zu solchen diagnostischen Verfahren ohne Beschränkung darauf die Berücksichtigung der vorangegangenen Krankheitsbilder und Behandlungen der befallenen Person, Befragung und Bewertung der befallenen Person und Gewinnung und Analyse von biologischen Proben von der befallenen Person.
Die Berücksichtigung der Krankengeschichte einer befallenen Person kann dazu beitragen, zu bestimmen, ob eine bestimme Mukositis eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis ist, da solche Entzündung typischerweise wiederkehrend und chronisch sind. Somit legen die Zeichen einer vorangegangenen durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Mukositisepisode nahe, dass eine gegenwärtige Mukositis ebenfalls eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis ist. Zu anderen nützlichen Informationen in der Krankengeschichte einer Person könnten ohne Beschränkung darauf Allergien, chirurgische Eingriffe und andere Erkrankungen, wie zystische Fibrose und Cilienmotilitätsmangelsyndrome, gehören.
Die Befragung und Bewertung einer befallenen Person kann auch dazu beitragen, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis zu identifizieren. Zum Beispiel können Personen, die unter Symptomen chronischer Mukositis leiden, wie z.B. Atemwegsobstruktionen, Geruchsverlust, Gehörverlust, Röcheln, Atemnot, Husten, Kopfschmerzen und Gesichtsdruck, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis haben. Weiterhin kann eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis bei Patienten ausgeschlossen werden, die die Symptome einer Infektion zeigen, wie z.B. Fieber, Ausbreitung von Pilz, Pilze im Blut, Zunahme der polymorphkernigen Leukozyten und akuter Ausbruch. Es sei darauf hingewiesen, dass wiederkehrende bakterielle Infektionen ein zugrunde liegendes Krankheitsbild einer durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Mukositis anzeigen können, da eine chronische Entzündung zu der Zerstörung des Epithels führen und somit die Empfindlichkeit der Person gegenüber bakterieller Infektion erhöhen können. Weiterhin können mehrfache diagnostische Tests durchgeführt werden, um zu der Identifizierung einer durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Mukositis beizutragen. Zum Beispiel kann eine herkömmliche Allergieprobe unter Verwendung einer Serie von pilzlichen und nichtpilzlichen Antigenen verwendet werden, um zu bestimmen, ob ein Individuum atopisch ist, da einige Fälle einer durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis atopische Individuen betreffen. Weiterhin können immunbasierte Tests auf die Gegenwart von Antikörpern gegen pilzliche Antigene, Test auf abnormale Lungenfunktion mit oder ohne Methacholin, Audiogramme und Tympanogramme verwendet werden, um eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis zu identifizieren.
Das Sammeln und die Analyse von biologischen Proben einer betroffenen Person können dazu beitragen, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis zu identifizieren. Grundsätzlich können biologische Proben, wie Schleim, Stuhl, Urin, Sputum und Blut, gewonnen und auf Anzeichen untersucht werden, die die Beteiligung eines nichtinvasiven Pilzorganismus anzeigen. Zu solchen Anzeichen gehören ohne Beschränkung darauf die Gegenwart eines beliebigen antigenischen Markers für durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis; die Gegenwart von Eosinophilen, Eosinophilenprodukten (z.B. MBP und ECP), Antikörper, Pilzantigen oder Pilzorganismen in einer Schleim-, Stuhl-, Urin- oder Sputumprobe; und das Fehlen von Pilzorganismen in einer Blutprobe. Zum Beispiel kann die Identifizie rung von allergischem Schleim (d.h. Schleim, der Anzeichen vorhandener Eosinophile aufweist) eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis anzeigen. Zu solchen Anzeichen von Eosinophilen gehören ohne Beschränkung darauf die Gegenwart intakter Eosinophiler, nekrotischer Eosinophiler und von Eosinophilenprodukten. Viele Verfahren zur Detektion der Gegenwart dieser verschiedenen Anzeichen und Marker innerhalb einer biologischen Probe sind aus dem Stand der Technik bekannt und können verwendet werden. Zum Beispiel kann die Gegenwart von Eosinophilen in allergischem Schleim unter Verwendung einer Hämatoxylin-/Eosin-Färbung und anschließende mikroskopische Untersuchung bestimmt werden.
Weiterhin kann eine Gewebsbiopsie genommen und auf ein Fehlen von invasiven Pilzen analysiert werden. Wie oben beschrieben, können Pilzorganismen innerhalb des Gewebes unter extremen Mukositiszuständen der Gewebs- und Knochenzerstörung beobachtet werden, wenn man eine Gewebsbiopsie untersucht, einfach deswegen, weil die Barriere (d.h. das Epithel) zwischen der Körperinnenseite und Außenseite zerstört oder beschädigt worden ist. In diesen Situationen hält der Umstand, dass man lediglich die Gegenwart einer kleinen Anzahl von Pilzorganismen innerhalb eines umrissenen Gebietes der Gewebeschädigung beobachtet, nicht von der Tatsache ab, dass die Erkrankung eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis und keine Infektion ist.
Weiterhin können immunbasierte Assays verwendet werden, um die Gegenwart verschiedener Anzeichen einer durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Mukositis in einer biologischen Probe zu detektieren. Viele immunbasierte Assays sind aus dem Stand der Technik wohlbekannt, darunter ohne Beschränkung darauf enzymverbundene Immunosorbenzassays (ELISA) und Radioallergosorbenztests (RASTS). Die RAST verwendenden Verfahren sind z.B. in McRury J et al. (Clin Exp Immunol 65:631–638 (1986)), Mabry RL und Manning S (Otolaryngol Head Neck Surg. 113:721–723 (1995) und Lynch NR et al. (Int Arch Allergy Immunol 114:59–67 (1997)) beschrieben. Immunbasierte Assays können polyklonale Antikörper, monoklonale Antikörper oder Fragmente davon verwenden, die Spezifität für ein Antigen besitzen, das als diagnostischer Marker für durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis verwendet werden kann. Zum Beispiel können monoklonale Antikörper mit Spezifität für Pilzorganismen, von denen bekannt ist, dass sie durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis auslösen, hergestellt und zum Screenen biologischer Proben verwendet werden. Solche Antikörper können unter Verwendung von an anderen Orten beschriebenen Verfahren (Zeidan et al., Experimental Approaches in Biochemistry and Molecular Biology, William C. Brown Publisher (1996) und Seaver, Commercial Production of Monoclonal Antibodies: A Guide for Scale-Up, Marcel Dekker Inc., New York, NY (1987)) hergestellt werden. Zusammengefasst kann eine Maus mit einer Probe eines Pilzorganismusisolats immunisiert wer den. Einige Wochen später werden Lymphozyten aus der Milz der immunisierten Maus zurückgewonnen und mit Myelomzellen zu Hybridomzellen fusioniert. Hybridomzellen mit Spezifität für das immunisierende Pilzisolat können dann isoliert und Präparationen monoklonaler Antikörper hergestellt werden.
Da die spezifischen Verfahren und Materialien, die verwendet werden, um eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis zu identifizieren, abhängig von der spezifischen Lage der Mukositis variieren können, wird nachfolgend eine detailliertere Beschreibung bereitgestellt.
Nasen/Nasennebenhöhlen
Der äußere knochige Rahmen der Nase besteht aus zwei länglichen Nasenknochen. Auf jeder Seite einer Mittellinie befindet sich ein Nasenknochen, wobei die beiden Knochen eine gewölbte Querschnittsform bilden. Das Nasenseptum teilt die Nasenhöhlen in Hälften. Die seitliche Nasenwand hat drei Nasenmuscheln, die die Schleimhautoberfläche der Nasenhöhle oder des Vestibüls vergrößern. Das Nasenvestibül wird begrenzt von dem Nasenseptum und der seitlichen Wand. Diese große Oberfläche der Nasenmuscheln und des Nasenseptums befördert extensiven Kontakt mit der eingeatmeten Luft, was die Befeuchtung, Partikelentfernung und Temperaturregulation der eingeatmeten Luft erleichtert.
Die Nasennebenhöhlen sind lufthaltige Räume, die mittels Öffnungen oder Ostien an die Nasenhöhle angeschlossen sind. Obwohl sie paarweise vorliegen, sind die Nasennebenhöhlen üblicherweise in Form und Lage asymmetrisch, und zu ihnen gehören die Maxillar-, Frontal-, Ethmoid- und Sphenoidhöhlen. Zu den vorgeschlagenen Funktionen der Nasennebenhöhlen gehören die Verringerung des Gewichts des Schädelknochens, Bereitstellung von Schleim für die Nasenhöhle und eine Funktion als Resonanzboden für die Tonerzeugung. Die Maxillarhöhlen sind die größten der Nasennebenhöhlen. Jeder Maxiallarsinus befindet sich in der Maxilla und öffnet sich in den mittleren Meatus. Die Frontalhöhlen sind im Stirnknochen gelegen und liegen oberhalb und in der Mitte der Augenhöhlen. Auch die Frontalhöhlen öffnen sich in dem mittleren Meatus. Die Ethmoidhöhlen sind zahlreiche und unregelmäßig geformte Lufträume, die sich in die mittleren und die oberen Meatusse öffnen. Die Sphenoidhöhle befindet sich im Sphenoidknochen und liegt hinter sowohl dem Auge als auch dem oberen Teil der Nasenhöhle. Die Sphenoidhöhle entleert sich in den höheren Meatus.
Schleimhaut kleidet sowohl die Nasenhöhle als auch die Nasennebenhöhlen aus und umfasst grundsätzlich eine Epithelschicht, Bindegewebe und Schleimdrüsen. Normalerweise bedeckt eine Schleimschicht die Schleimhaut. Schleim, der von der Schleimhaut sezerniert wird, dient dazu, Partikel einzufangen und ein Austrocknen der Nasen- und Nasenneben höhlengewebe, die ansonsten der Luft ausgesetzt wären, zu verhindern. Der Schleim wird normalerweise durch Zilien in Richtung des Nasenpharynx transportiert und geschluckt.
An Rhinosinusitis leidende Personen können anhand bekannter Verfahren identifiziert werden. Zu den Symptomen der Rhinosinusitis gehören ohne Beschränkung darauf Verstopfung der Nasenluftwege, Verlust des Geruchssinns, Gesichtsschmerz, Kopfschmerz, rückwärts gerichtetes Laufen der Nase und Rhinorrhö. Bei der Untersuchung zeigt die Gegenwart von dickem Schleim oder die visuelle Identifikation einer Nasen- oder Nasennebenhöhlenobstruktion mit Schleim oder Polypen oftmals ein Rhinosinusitis-Krankheitsbild. Nasenpolypen sind Auswüchse aus der Nasen- und Nasennebenhöhlenschleimhaut, die typischerweise glatt, gelatinös, halb durchsichtig, rund oder birnenförmig und hell sind. Nasenpolypen sind im Allgemeinen an der Seitenwand der Nase gelegen, üblicherweise im mittleren Meatus oder entlang der mittleren und oberen Nasenmuschel. Die meisten Nasenpolypen entstehen aus der Ethmoidhöhle, aber einige Polypen entstehen aus den Maxillar- und Sphenoidhöhlen. Die Masse eines Nasenpolyps besteht hauptsächlich aus ödematöser Flüssigkeit mit wenigen fasrigen Zellen und einigen Schleimdrüsen. Das Oberflächenepithel von Nasen- und Nasennebenhöhlenpolypen zeigt im Allgemeinen schuppige Metaplasie. Eosinophile liegen in Polypen üblicherweise in mäßigen bis großen Zahlen vor, und es ist jetzt bekannt, dass Nasenpolypflüssigkeit übernormal hohe Konzentration an IgA-, IgE-, IgG- und IgM-Antikörpern und abnormal hohe Konzentrationen an IL-5, einem Zytokin, das zur Aktivierung zur Überlebung von Eosinophilen beiträgt, enthält. Wie hier gezeigt, ist die Gegenwart von Nasenpolypen kein Risikofaktor für Rhinosinusitis, sondern vielmehr ein Endstadium der chronischen Entzündung.
Die folgenden Verfahren und Materialien können verwendet werden, um Personen zu identifizieren, die an durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis leiden. Wie oben beschrieben, ist das als AFS bekannte Krankheitsbild ein durch nichtinvasive Pilze ausgelöstes Rhinosinusitis-Krankheitsbild. Somit kann jedes aus dem Stand der Technik bekannte Verfahren, das zur Identifikation von AFS verwendet wird, verwendet werden, um durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu identifizieren (Cody DT et al. Laryngoscope 104:1074–1079 (1994) und Kupferberg SB et al., Otolaryngol. Head Neck Surg 117:35–41 (1997)). Beispielsweise kann durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis anhand der Gegenwart von verdicktem Schleim identifiziert werden, der Klumpen oder Schichten von nekrotischen Eosinophilen, Charcot-Leyden-Kristalle und nichtinvasive Pilzhyphen enthält. Des Weiteren kann Bildanalyse wie MRI und CT-Scans verwendet werden, um durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu identifizieren, da solche Krankheitsbilder oft typischerweise ein charakteristisches Erscheinungsbild zeigen und oftmals Knochenerosion in angrenzenden Strukturen verursachen (Quraishi et al., Otolaryngol. Head Neck Surg. 117:29–34 (1997); Manning et al., Laryngoscope 107:170–176 (1997); Kinsella et al., Head & Neck 18:211–217 (1996); Allbery et al., RadioGraphics 15:1311–1327 (1995); Roth MR, Ear, Nose & Throat J. 73:928–930 (1994); und Bartynski et al., Otolaryngol. Head Neck Surg. 103:32–39 (1990)). Des Weiteren können Personen mit durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis eine Krankengeschichte der Nasen- und Nasennebenhöhlenpolypose haben und mehrfache chirurgische Eingriffe durchlaufen haben.
Ergebnisse unter Verwendung der gegenwärtig verfügbaren diagnostischen Methodologie zeigen, dass etwa drei bis acht Prozent der Rhinosinusitisfälle, die einen chirurgischen Eingriff benötigen, AFS-Fälle sind. Im Allgemeinen umfassen diese gegenwärtigen diagnostischen Verfahren für AFS Kriterien, wie z.B. die Gegenwart eines charakteristischen Erscheinungsbildes bei einem CT-Scan, das Vorliegen von allergischem Schleim und das Vorliegen von Pilzorganismen in Schleimproben, bestätigt entweder durch Histologie oder durch Pilzwachstum in der Kultur. Die vorliegende Erfindung zeigt, basierend auf einem besseren Verständnis der Rhinosinusitis, verbesserten diagnostischen Verfahren und der eindrucksvollen Erfolgsrate der hier beschriebenen Ansätze mit einer Anti-Pilz-Behandlung, dass mehr als etwa 90 Prozent aller chronischen Rhinosinusitisfälle eine Pilz-Ätiologie haben. Des Weiteren zeigt die vorliegende Erfindung, dass die Fähigkeit, Pilzorganismen aus einer Schleimprobe zu züchten, kein nützliches Kriterium zur Diagnose eines durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Rhinosinusitis-Krankheitsbildes, wie z.B. AFS, ist, da die meisten, wenn nicht alle, Menschen Pilzorganismen in ihrem Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim haben (siehe Beispiel 1). Es wird jedoch festgehalten, dass Gewinnung, Analyse und/oder Kultur von Pilzorganismen aus einer Nasen- und Nasennebenhöhlen-Schleimprobe nützliche diagnostische Informationen liefern kann. Zu solchen Informationen können ohne Beschränkung darauf Informationen über das Niveau der Pilzorganismen und die in einer bestimmten Schleimprobe vorhandene Anzahl verschiedener Pilzspezies gehören.
Das mangelnde Verständnis für die auf nichtinvasiven Pilzen beruhende Ätiologie chronischer Rhinosinusitis scheint aus mehreren Gründen eingetreten zu sein. Zuerst scheint das Vertrauen auf inadäquate Schleimsammel- und Pilzkulturtechniken zu einer Fehlinterpretation negativer Pilzwachstumsergebnisse geführt zu haben. Wie hier gezeigt, waren diese Negativergebnisse aller Wahrscheinlichkeit falsch negative Ergebnisse, da Pilzorganismen aus Nasen- und Nasennebenhöhlenschleimproben kultiviert werden können, die von den meisten, wenn nicht allen Menschen gewonnen werden. Demgemäß ist die Fähigkeit, Pilzorganismen aus einer Nasen- und Nasennebenhöhlenschleimprobe zu kultivieren, als diagnostisches Kriterium für durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis- Krankheitsbilder, einschließlich von AFS, grundsätzlich bedeutungslos. Zweitens waschen Kliniken während des chirurgischen Eingriffs routinemäßig den Schleim von den Nasen- und Nasennebenhöhlen ab oder verwerfen ihn, bevor sie einen Polyp entfernen und auf die Präsenz von allergischem Schleim untersuchen. Somit resultierte das Versagen in der Detektion von allergischem Schleim höchstwahrscheinlich aus der Entnahme falschen Mediums zur Untersuchung. Dies kann wiederum zu der allgemein medizinisch anerkannten Theorie geführt haben, dass die Polypose die Ursache bestimmter entzündlicher Krankheitsbilder in der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie sei. Wie oben diskutiert, kann die Polypose als letztes Stadium der klinischen Entzündung betrachtet werden. Drittens können chronische inflammatorische Krankheitsbilder, wie hier beschrieben, zu wiederkehrenden bakteriellen Infektionen führen, die ein zugrunde liegendes durch nichtinvasive Pilze ausgelöstes Rhinosinusitis-Krankheitsbild maskiert haben können. Weiterhin kann jede vorübergehende Erleichterung, die nach antibakterieller Behandlung beobachtet wird, die Diagnose eines Krankheitsbildes mit einer Ätiologie nichtinvasiver Pilze erschwert haben.
Unabhängig davon lehrt die vorliegende Erfindung, dass besondere Sorgfalt angewandt werden sollte, den Schleim für die Untersuchung zu bewahren, und dass die Gegenwart von allergischem Schleim verwendet werden kann, um eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu identifizieren. Weiterhin können wiederkehrende bakterielle Infektionen in der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis bezeichnen.
Jede Person mit einer vorangegangenen Rhinosinusitisepisode ist gefährdet, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu entwickeln. Des Weiteren sind ältere Personen sowie Personen mit zystischer Fibrose, Asthma und einer Familiengeschichte von Nasenproblemen oder Allergien potenziell gefährdet, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu entwickeln. Weiterhin können Personen, die erheblichen Allergenmengen (z.B. Pilzsporen, Pollen und Chemikalien) ausgesetzt sind, gefährdet sein, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis zu entwickeln.
Pilzorganismen
Jeder Pilzorganismus, der im Schleim eines Säugers lebt, kann ein nichtinvasiver Pilzorganismus sein, der imstande ist, eine Mukositis auszulösen, da die bloße Gegenwart des Organismus im Schleim eines intoleranten Individuums die Entzündung verursachen kann. Zum Beispiel können alle bislang in Schleimproben von AFS-Patienten identifizierten Pilzorganismen nichtinvasive Pilzorganismen sein, die imstande sind, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis auszulösen, darunter ohne Beschränkung darauf Absidia, Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus glaucus, Aspergillus nidulans, Aspergil lus versicolor, Alternaria, Basidiobolus, Bipolaris, Candida albicans, Candida lypolytica, Candida parapsilosis, Cladosporium, Conidiobolus, Cunninahamella, Curvularia, Dreschlera, Exserohilium, Fusarium, Malbranchia, Paecilomvces, Penicillium, Pseudallescheria, Rhizopus, Schizophylum und Sporothrix. Weiterhin können Pilzorganismen, die bislang nicht in Schleimproben von positiv auf AFS diagnostizierten Patienten identifiziert wurden, nichtinvasive Pilzorganismen sein, die imstande sind, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis auszulösen, darunter ohne Beschränkung darauf Acremonium, Arachniotus citrinus, Aurobasidioum, Beauveria, Chaetomium, Chryosporium, Epicoccum, Exophilia jeanselmei, Geotrichum, Oidiodendron, Phoma, Pithomyces, Rhinocladiella, Rhodoturula, Sagrahamala, Scolebasidium, Scopulariopsis, Ustilago, Trichoderma und Zygomycete. Eine Liste weiterer Pilzorganismen, die nichtinvasive Pilzorganismen sein können, die imstande sind, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis auszulösen, kann in den meisten taxonomischen Mykologielehrbüchern gefunden werden.
Sammeln von Schleimproben
Grundsätzlich kann Schleim von der Oberfläche jeder beliebigen Schleimhaut durch Verwendung einer Sammellösung zur Spülung der schleimhaltigen Höhle gesammelt werden. Richtige Schleimsammeltechniken sollten die Gewinnung einer Schleim enthaltenden Sammellösung maximieren, indem sie eine genügende Durchdringung der jeweiligen anatomischen Höhle erlauben und die Aufnahme der Sammellösung durch das Individuum verringern. Vasokonstriktive Mittel können verwendet werden, um die Schleimgewinnung zu maximieren, und mukolytische Mittel können verwendet werden, um obstruktiven Schleim aufzulösen, so dass die Durchdringung mit der Sammellösung verbessert wird.
Somit kann vor der Gewinnung einer Schleimprobe eine Person mit einem Vasokonstriktionsmittel und/oder einem mukolytischen Mittel behandelt werden, so dass eine hinreichende Vasokonstriktion und/oder mukolytische Wirkung in der geeigneten Region ausgelöst werden. Zu geeigneten Vasokonstriktionsmitteln gehören ohne Beschränkung darauf Phenylephrinhydrochlorid (NEO-SYNEPHRINE^®; Sanofi Pharmaceuticals), Kokain und Epinephrin. Ein mukolytisches Mittel ist ein beliebiges Mittel, das Schleim verflüssigt, so dass er von dem Patienten gewonnen werden kann. Zu geeigneten mukolytischen Mitteln gehören ohne Beschränkung darauf N-Acetyl-L-cystein (MUCOSIL^TM; Dey Laborstories) und rekombinante menschliche DNase (PULMOZYME^®; Genentech, Inc.). Jedes verabreichte Vasokonstriktionsmittel oder mukolytische Mittel sollte man wirken lassen, indem man nach der Verabreichung hinreichend lange wartet, z.B. etwa zwei bis fünf Minuten.
Die folgenden Verfahren und Materialien können verwendet werden, um eine Probe von Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim zu gewinnen. Zuerst wird eine Person darauf vorbereitet, eine Sammellösung in mindestens einem Nasenloch oder einer Nasennebenhöhle zu erhalten, indem man die Person anweist, einzuatmen und das Kinn zu senken, oder auf eine andere Weise den Zugang von Flüssigkeiten aus dem Mund und dem Ösophagus abwärts zu beschränken. Bei einer aufrecht sitzenden oder stehenden Person neigen diese Manöver dazu, den Verlust oder die Ingestion der Sammellösung zu minimieren. Andere Manöver sind ebenfalls möglich, sofern dieses Ziel erreicht wird. Zweitens wird ein Injektions- und Sammelsystem konfiguriert. Im Allgemeinen ist die Konfiguration so, dass eine Sammellösung einem Nasenloch einer Person verabreicht und dann effizient in einem Behälter aufgefangen werden kann. Das Injektionssystem kann ohne Beschränkung darauf eine Spritze mit einer gebogenen stumpfen Nadel- oder Röhrenstruktur sein. Der Behälter kann jede beliebige Art von Behälter sein, die Flüssigkeit aufnimmt. Darüber hinaus kann der Behälter ohne Beschränkung darauf ein Lagerungsbehälter sein, der zur Verwendung als Transporter geeignet ist, oder eine verschließbare Vorrichtung, so dass die gewonnene Probe gehandhabt oder verschickt werden kann. Diese Behälter können auch ein Mittel wie z.B. ein Konservierungsmittel oder ein antibakterielles Mittel enthalten, in Abhängigkeit von der gewünschten Verwendung der Schleimprobe. Drittens wird eine Sammellösung einem Nasenloch einer Person verabreicht und gewonnen. Vor der Verabreichung kann die Person angewiesen werden, die Sammellösung auszustoßen, sobald sie die Flüssigkeit in ihrer Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie verspürt. Alternativ kann die Person instruiert werden, die Sammellösung gleichzeitig mit der Verabreichung auszustoßen. Während der Verabreichung kann die Sammellösung unter Druck in mindestens ein Nasenloch oder mindestens eine Seite der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie injiziert werden. Das Volumen der Sammellösung kann in Abhängigkeit von der Person und dem Ausmaß der Mukositis variieren. Zum Beispiel können Flüssigkeitsvolumina ohne Beschränkung darauf etwa 0,1 ml bis etwa 100 ml oder spezifisch etwa 0,1 ml bis etwa 25 ml betragen. Die Sammellösung kann ohne Beschränkung darauf eine Kochsalzlösung, Wasser oder irgendeine andere geeignete Lösung, die geeignet ist, um mit Schleimhautgewebe in Kontakt gebracht zu werden, sein. Weiterhin kann die Sammellösung andere Mittel enthalten, die zur Gewinnung von Schleim nützlich sein können, wie z.B. ein mukolytisches Mittel.
Ein Ziel einer Sammellösung ist es, Schleim innerhalb von schleimhaltigen Höhlen zu lösen und zu entfernen. Zusätzlich zu der Wirkung einer Sammellösung als natürlichem Spülmittel kann die durchdringende Wirkung eines mukolytischen Mittels in einer Sammellösung dazu beitragen, dicken obstruktiven Schleim zu verflüssigen. Weiterhin kann die Kombination des Drucks der Verabreichung mit dem beinahe gleichzeitigen Ausstoßen unter Druck durch eine Person dazu beitragen, Schleim zu lösen und zu sammeln. Typischerweise kann eine Sammellösung innerhalb eines Zeitraums von weniger als etwa fünf Sekunden pro Seite verabreicht werden. Weiterhin kann eine Sammellösung während eines Zeitraums von weniger als etwa drei Sekunden verabreicht werden. Alternativ kann der Zeitraum der Verabreichung der Sammellösung auf über fünf Sekunden ausgedehnt werden, in Abhängigkeit von spezifischen Faktoren, wie z.B. dem Grad der Entzündung, dem Vorliegen von Obstruktionen und der Größe der Person. Darüber hinaus kann eine länger als fünfsekündige Verabreichung verwendet werden, wenn sehr kleine Volumina oder Ströme der Sammellösung erwünscht sind.
Es können auch andere Sammelverfahren zur Gewinnung von Schleimproben verwendet werden, insbesondere wenn eine Person außerstande ist, sich an einem Flüssigsammelverfahren zu beteiligen. Solche weiteren Verfahren sind im Stand der Technik wohlbekannt, und ohne Beschränkung darauf gehören hierzu die chirurgische Entfernung von Schleim, ein mechanisiertes oder auf Abstrich beruhendes Schleimextraktionsverfahren, und Druck- oder Vakuumsysteme, die Schleim extrahieren. Weiterhin können diese anderen Sammelverfahren ebenso wie die hier beschriebenen Verfahren und Materialien modifiziert oder angepasst werden, um biologische Flüssigkeiten aus anderen Körperteilen, wie z.B. dem Mittelohr und den Därmen zu gewinnen.
Nach der Gewinnung einer Schleimprobe kann die Probe auf die Gegenwart von Markern untersucht werden, die die Beteiligung einer durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Mukositis anzeigen. Zum Beispiel kann eine Schleimprobe untersucht werden, um die Gegenwart von allergischem Schleim zu bestimmen. Weiterhin können Pilzorganismen aus einer Schleimprobe unter Verwendung der hier beschriebenen Techniken ebenso wie der aus dem Stand der Technik bekannten Techniken kultiviert und analysiert werden.
Die 3 und 4 stellen eine beispielhafte Vorrichtung 10 zum Absaugen und Gewinnen von Schleim und anderen Flüssigkeiten dar. Die Vorrichtung 10 umfasst ein oberes Element 12, einen Sammelbehälter 14 und ein Sammelröhrchen 16. Das obere Element 12 umfasst einerseits allgemein ein Mittelteil 22, ein Gewindeteil 24, ein Verbindungsteil 26 und ein das Röhrchen aufnehmende Element 28. Das Mittelteil 22 kann grundsätzlich eine Öffnung 29 definieren. Das Ventil 30 ist funktionsfähig innerhalb der Öffnung 29 untergebracht. Das Gewindeteil 24 kann sich von dem Mittelteil 22 abwärts erstrecken. Das Verbindungsteil 26 erstreckt sich radiär vom Mittelteil 22, ist in dieser Ausführungsform im Querschnitt grundsätzlich rund und definiert die Öffnung 32. Die Öffnung 32 verbindet das Äußere der Vorrichtung 10 mit ihrem Innenteil. Das das Röhrchen aufnehmende Element 28 erstreckt sich grundsätzlich radiär vom Mittelteil 22. Das das Röhrchen aufnehmende Element 28 ist in dieser Ausführungsform grundsätzlich gegenüber vom Verbindungsteil 26 untergebracht.
Das das Röhrchen aufnehmende Element 28 definiert die Öffnung 34. Wie die Öffnung 32 verbindet die Öffnung 34 das Äußere der Vorrichtung 10 mit ihrem Inneren.
In dieser Ausführungsform ist der Behälter 14 schraubbar auf dem Gewindeteil 24 montiert. Der Behälter 14 kann jedoch durch andere bekannte Mittel an dem Mittelteil 22 gesichert werden. Obwohl eine kegelförmige Bodenkonfiguration dargestellt ist, kann der Behälter 14 eine Vielzahl von Konfigurationen annehmen und in den Rahmen dieser Erfindung fallen. Das Sammelröhrchen 16 erstreckt sich von der Öffnung 34 und steckt darin. Ein Stück des Röhrchens 16 kann im Inneren des Behälters 14 untergebracht sein, um das Einbringen des gesammelten Materials zu erleichtern. Das Sammelröhrchen 16 definiert ein Lumen 36, durch das sich der gewonnene Schleim bewegt. In einer Ausführungsform umfasst das Röhrchen 16 ein flexibles Gedächtnismittel, um die Anpassung an verschiedene Patientenanatomien zu erleichtern. D.h., das Röhrchen 16 bleibt an eine gewünschte Konfiguration angepasst, wie z.B. durch die Phantomlinien in 3 dargestellt. Weitere Mittel zur Erleichterung der Bewegung des Schleims durch das Sammelröhrchen und die Vorrichtung 10 sind z. B. ein Röhrchen oder eine Vorrichtung, deren Materialeigenschaften so entworfen sind, dass sie die Haftung des Schleimes minimieren.
In einer Ausführungsform ist die Vorrichtung 10 für eine einzelne Verwendung vorgesehen. Die Vorrichtung 10 kann aus einer Anzahl von Materialien hergestellt sein, jedoch können synthetische Harze, wie z.B. Polyethylen verwendet werden. Das Verbindungsteil 26 verbindet die Vorrichtung 10 mit einem Vakuumschlauch 38. Somit kann das Verbindungsteil 26 eine solche äußere Konfiguration haben, dass sich eine luftdichte Verbindung mit dem Vakuumschlauch 38 bildet. Das Ventil 30 stellt das Maß des durch das Lumen 36 kommunizierten Vakuums ein. Durch Einstellen des Ventils 30 kann eine graduell zunehmende oder abnehmende Menge Vakuum appliziert werden. In diesem Beispiel umfasst das Ventil 30 einen im Allgemeinen länglichen Schlitz, der mit einer Gleitblende konfiguriert ist. Die Gleitblende kann von dem Anwender so eingestellt werden, dass die Gesamtheit, nichts oder ein Teil des länglichen Schlitzes exponiert wird, wodurch das Vakuum eingestellt wird, das auf das Lumen 36 einwirkt. Jedoch fällt eine große Anzahl anderer Einstellmittel zur Regulation des Vakuums in den Rahmen dieser Erfindung. Ein anderes Beispiel ist ein Ventil vom „IV"-Typ mit einem Rollradventil, um einstellbar ein Saug- oder Sammelröhrchen zu verengen.
Im Gegensatz zu anderen Geräten erstrecken sich das das Röhrchen aufnehmende Element 28 und das Sammelröhrchen 16 grundsätzlich senkrecht von einer Längsachse des Behälters 14. Dies ermöglicht es den Anwendern, das Sammelröhrchen 16 besser zu positionieren, wenn sie Schleim und andere Flüssigkeiten sammeln. Es wird anerkannt, dass im Rahmen dieser Erfindung andere Sammelbehälter möglich sind, die bequem zur Gesichts anatomie eines Patienten passen, und die entweder vom Patienten oder einem Gesundheitsbediensteten ohne Weiteres in Position gehalten werden können. Solche Ausführungsformen können auf Vakuum, Schwerkraft oder anderen Sammelmechanismen beruhen, sofern sie leichten Zugang für in den Patienten injizierte Flüssigkeiten gewähren, während sie zugleich ein Absaugen oder eine Entfernung der Flüssigkeiten und des Schleims von dem Patienten erlauben.
In dieser Ausführungsform hat das Lumen 36 einen Durchmesser von etwa 1 mm bis 10 mm und eine Gesamtlänge von etwa 5 cm bis 50 cm. Ein beispielhafter Behälter 14 hat grundsätzlich von etwa 1 Zoll bis 3 Zoll Durchmesser und 3 Zoll bis 6 Zoll Höhe, obwohl verschiedene andere Größen verwendbar sein können.
Die Vorrichtung 10 wird vorteilhafterweise verwendet, um Schleim oder Flüssigkeitsproben aus der Nasen-, Nasennebenhöhlen- oder Lungenanatomie zu erhalten. Bei der Schleim- oder Flüssigprobenentnahme ist die Vorrichtung 10 an eine Vakuumquelle angeschlossen, und das Ventil 30 ist wie gewünscht eingestellt. Das Röhrchen 16 ist auf eine gewünschte Position eingestellt. Das Röhrchen 16 wird dann in einen Teil der Anatomie des Patienten eingeführt, von dem Schleim oder Flüssigkeit erhalten werden soll. Das Ventil 30 wird weiter so eingestellt, wie es notwendig ist, um die Probe zu erhalten, aber dennoch Sicherheit für den Patienten zu gewährleisten. Der erhaltene Schleim oder die erhaltene Flüssigkeit wird im Behälter 14 aufgefangen. Sobald die Gewinnung vollständig ist, kann der Behälter 14 von dem oberen Element 12 zur Lagerung oder zum Versand der erhaltenen Schleim- oder Flüssigkeitsprobe abgelöst werden.
Kultur von Pilzorganismen aus einer Schleimprobe
Eine Schleimprobe kann zur Kultur von Pilzorganismen vorbereitet werden, indem man die Probe mit einem mukolytischen Mittel, wie N-Acetyl-L-cystein oder Dithiothreitol (DTT) behandelt, um die Verflüssigung des Schleims zu ermöglichen oder weiter zu verbessern. Nach Zugabe eines mukolytischen Mittels kann die Schleimprobe gemischt und bei Raumtemperatur inkubiert werden. Diese Verflüssigung ermöglicht es, dass in dem Schleim vorliegende Pilzorganismen freigesetzt werden. Nach der Verflüssigung kann der Schleim durch Zentrifugation oder andere Mittel isoliert werden, da der Schleim typischerweise eine von der anderen Lösung (d.h. der Sammellösung) getrennte Schicht bildet. Nach der Isolierung kann der Schleim gemischt und ein Aliquot davon mit einem geeigneten Pilzwachstumsmedium in Kontakt gebracht werden, z.B. Wachstumsmedium-Agarplatten. Ein Pilzwachstumsmedium ist ein beliebiges Medium, das das Wachstum eines Pilzorganismus unterstützen kann, einschließlich von ohne Beschränkung darauf RPMI-1649, Delbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM), Inhibitory Mold Agar (IMA) und Bay-Agar. Das Pilzwachs tumsmedium kann antibakterielle Mittel (z.B. Chloramphenicol und Ciprofloxacin) enthalten, um das Wachstum von Bakterien zu verhindern.
Nachdem der verflüssigte Schleim in Kontakt mit einem geeigneten Pilzwachstumsmedium gebracht worden ist, können die Kulturen bei einer Optimaltemperatur inkubiert werden, z.B. von etwa 20°C bis etwa 37°C und in einigen Fällen von etwa 25°C bis etwa 35°C. Eine Idealtemperatur kann bestimmt werden, indem man Duplikatkulturen bei verschiedenen Temperaturen inkubiert und die Wachstumsraten vergleicht. Typischerweise werden die Kulturen von etwa zwei bis etwa 35 Tage lang bei etwa 30°C inkubiert. Sobald Pilzwachstum beobachtet wird, können die Pilzspezies anhand von aus dem Stand der Technik wohlbekannten Verfahren identifiziert werden, und der Phänotyp und Genotyp jedes Pilzisolates können charakterisiert werden. Zum Beispiel kann ein Pilzisolat zur Bestimmung von Pharmakonempfindlichkeit oder Pharmakonresistenz untersucht werden.
Behandlung und Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Mukositis
Anti-Pilz-Mittel können auf die Schleimhaut eines Säugers in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über einen Zeitraum hinweg aufgetragen werden, die wirksam zur Behandlung oder Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis sind. Ein „Anti-Pilz-Mittel" ist jedes Mittel, das gegen einen Pilzorganismus aktiv ist. Zum Beispiel ist ein Anti-Pilz-Mittel jedes Mittel, das den Wachstum eines Pilzorganismus verhindert oder ihn abtötet, wie z.B. Antipilz-Polyenmakrolide, Tetraenmakrolide, Pentaenmakrolide, fluorinierte Pyrimidine, Imidazole, Triazole, Azole, halogenierte Phenoläther, Thiocarbamate und Allylamine. Weiterhin können Anti-Pilz-Mittel Mittel sein, die sich zwischen Pilzzellwand-Bestandteile einfügen oder als Sterolinhibitoren fungieren. Zu spezifischen Anti-Pilz-Mitteln innerhalb des Rahmens der Erfindung gehören ohne Beschränkung darauf Amphotericin B, Flucytosin, Ketoconazol, Miconazol, Itraconazol, Fluconazol, Griseofulvin, Clotrimazol, Econazol, Terconazol, Butoconazol, Oxiconazol, Sulconazol, Saperconazol, Voriconazol, Ciclopiroxolamin, Haloprogin, Tolnaftat, Naftifin, Nystatin, Natamycin, Terbinafinhydrochlorid, Morpholine, Butafinundecylensäure, Whitefield's Ointment, Propionsäure und Caprylsäure ebenso wie diejenigen Mittel, die unter Verwendung von aus dem Stand der Technik wohlbekannten Verfahren als Anti-Pilz-Mittel identifiziert werden können. Es wird darauf hingewiesen, dass ein individueller Patient einen als ätiologischen Auslöser fungierenden Pilzorganismus besitzen kann, der gegenüber einem bestimmten Anti-Pilz-Mittel resistent ist. In einem solchen Fall umfasst es ein wichtiger Aspekt dieser Erfindung, diesen Patienten mit einem wirksamen Anti-Pilz-Mittel zu behandeln (z.B. einem Anti-Pilz-Mittel, das das Wachstum des Pilzorganismus, der als ätiologischer Auslöser fungiert, verhindert oder ihn abtötet).
Solche als ätiologische Auslöser fungierende Pilzorganismen können unter Verwendung der hier beschriebenen Gewinnungs- und Kulturverfahren identifiziert werden.
Der Begriff „Applikation auf die Schleimhaut" wird hier verwendet, um jede Art von Verabreichung zu bezeichnen, die ein verabreichtes Mittel mit dem Schleim in Kontakt bringt. Somit wird jedes intravenös verabreichte Mittel, das den Blutstrom nicht verlässt, nicht als an die Schleimhaut verabreichtes Mittel betrachtet, da das Mittel nicht mit dem Schleim in Kontakt kommt. Des Weiteren kann der Begriff „Applikation auf die Schleimhaut" in „direkte" und „indirekte" Applikation auf die Schleimhaut unterteilt werden. Der Begriff „direkte Applikation auf die Schleimhaut" wird hier verwendet, um jede Art von Verabreichung zu bezeichnen, die ein verabreichtes Mittel in direkten Kontakt mit einem anvisierten Schleim bringt, bevor es das Epithel überquert. Erfindungsgemäß versteht es sich, dass Injektionen eines Mittels in eine Schleim enthaltende Höhle als direkte Applikation auf die Schleimhaut betrachtet werden, wenn das Mittel mit Schleim in Kontakt kommt, selbst wenn ein Injektionsmittel (z.B. Nadel, Röhrchen oder Katheter) verwendet werden kann, um ein Epithel zu durchqueren. Somit wird die Verwendung einer Nadel zur Überquerung des Trommelfells und Injektion eines Mittels ins Mittelohr als direkte Applikation auf die Schleimhaut betrachtet, die auf den Schleim des Mittelohres gerichtet ist.
Es folgt hieraus, dass jedes intravenös verabreichte Mittel, das nachfolgend den Blutstrom verlässt, ein Epithel überquert und mit Schleim in Kontakt tritt, nicht als direkt auf die Schleimhaut appliziertes Mittel betrachtet wird, da das Mittel vor dem Kontakt mit dem Schleim ein Epithel überquert. In diesem Fall jedoch wird das intravenös verabreichte Mittel als indirekt auf die Schleimhaut appliziertes Mittel betrachtet, da der Begriff „indirekte Applikation auf die Schleimhaut" jede Art von Verabreichung bezeichnet, die ein verabreichtes Mittel nach der Überquerung eines Epithels in Kontakt mit einem anvisierten Schleim bringt. Abermals bedeutet die Verwendung eines Injektionsmittels, wie z.B. einer Nadel, einer Röhre oder eines Katheters, zur Abgabe eines Mittels über ein Epithelium hinweg und in direktem Kontakt mit dem Schleim nicht notwendigerweise, dass die Verabreichung eine indirekte Applikation auf die Schleimhaut ist.
Es folgt hieraus auch, dass eine orale Verabreichung in Abhängigkeit von dem anvisierten Schleim entweder eine direkte oder indirekte Applikation auf de Schleimhaut sein kann. Zum Beispiel kann ein Mittel geschluckt werden und dann die Speiseröhre, den Magen und den Dünndarm durchqueren, um in direkten Kontakt mit dem Schleim im Dickdarm zu kommen, ohne dass es hierbei ein Epithel überquert hat (d.h. direkte Verabreichung an die Schleimhaut). Gleichzeitig könnte das oral verabreichte Mittel von dem Darm aufgenommen werden, sich systematisch akkumulieren und das Nasenepithel überqueren, um in Kontakt mit dem Nasenschleim zu kommen (d.h. indirekte Applikation auf die Schleimhaut). Somit hängt die direkte und indirekte Natur der Applikation auf die Schleimhaut von dem spezifischen Verabreichungsweg ebenso wie von der spezifischen Lage des anvisierten Schleims ab. Typische Wege der direkten und indirekten Applikation auf die Schleimhaut sind nachfolgend für verschiedene Schleimlokalisationen eines Säugers beschrieben.
Eine wirksame Menge eines Anti-Pilz-Mittels oder einer ein Anti-Pilz-Mittel enthaltenden Formulierung kann jede Menge sein, die bei Applikation auf die Schleimhaut in einem Säuger eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis verringert, verhindert oder eliminiert, ohne bei dem Säuger wesentliche Toxizität auszulösen. Typischerweise kann eine wirksame Menge jede Menge sein, die größer oder gleich der minimalen inhibitorischen Konzentration (MIC) für einen Pilzorganismus oder ein Pilzisolat ist, der/das im Schleim einer bestimmten Person vorliegt, die bei Applikation auf die Schleimhaut keine wesentliche Toxizität bei der Person auslöst. Einige Anti-Pilz-Mittel können einen relativ großen Konzentrationsbereich haben, der wirksam ist, während andere einen relativ schmalen Konzentrationsbereich haben können. Weiterhin kann die wirksame Menge in Abhängigkeit von dem spezifischen Pilzorganismus oder Isolat variieren, da bestimmte Organismen oder Isolate empfindlicher oder weniger empfindlicher gegenüber bestimmten Anti-Pilz-Mitteln sind. Solche wirksamen Mengen können für einzelne Anti-Pilz-Mittel unter Verwendung allgemein verfügbarer oder leicht erhältlicher Information bestimmt werden, wozu gegen Pilze wirksame Konzentrationen, für Tiere toxische Konzentrationen und Gewebsdurchdringungsraten gehören. Zum Beispiel können ungiftige Anti-Pilz-Mittel typischerweise in jeder Menge, die Antipilzwirkung im Schleim zeigt, direkt oder indirekt auf die Schleimhaut appliziert werden. Weiterhin können Anti-Pilz-Mittel, die das Schleimhautepithel nicht durchqueren, typischerweise in jeder Menge, die Antipilzwirkung im Schleim zeigt, direkt auf die Schleimhaut appliziert werden. Unter Verwendung der hier bereitgestellten Informationen können solche wirksamen Mengen auch durch Routineexperimente in vitro oder in vivo bestimmt werden. Zum Beispiel kann ein Patient mit einem durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Mukositis-Krankheitsbild eine direkte Verabreichung eines Anti-Pilz-Mittels auf die Schleimhaut in einer Menge erhalten, die nahe an der aus in vitro-Analysen berechneten minimalen inhibitorischen Konzentration (MIC) liegt. Wenn der Patient hierauf nicht anspricht, dann kann die Menge erhöht werden, z.B. auf das Zehnfache. Nach Erhalten dieser höheren Konzentration kann der Patient sowohl auf Ansprechen auf die Behandlung als auch auf Toxizitätssymptome überwacht werden, und es können entsprechende Einstellungen vorgenommen werden.
Für Amphotericin B kann eine wirksame Menge von etwa 0,01 ng bis etwa 1000 mg pro kg Körpergewicht des Säugers pro Verabreichung sein, wenn es direkt an die Schleimhaut verabreicht wird. Wenn es als Nasenspülungslösung verwendet wird, kann eine wirksame Menge an Volumen von etwa 0,01 ml bis etwa 1 l pro Nasenloch pro Verabreichung einer Lösung mit einem Gehalt von etwa 0,01 ml Amphotericin B pro l zu etwa 1000 mg Amphotericin B pro l sein. Alternativ kann eine wirksame Menge 20 ml pro Nasenloch pro Verabreichung (z.B. zwei bis vier Mal täglich) einer Waschlösung sein, die etwa 100 mg Amphotericin B pro l Kochsalzlösung oder Wasser enthält. Typischerweise ist die Salzlösung oder das Wasser steril. Die wirksame Menge kann konstant bleiben oder kann abhängig von dem Ansprechen der Person auf die Behandlung gleitend oder über die variable Dosis eingestellt werden. Wirksame Mengen für andere Anti-Pilz-Mittel können vom Durchschnittsfachmann unter Verwendung von Routineexperimenten im Hinblick auf die hier beschriebenen mehrfachen Lehren festgelegt werden.
Typischerweise kann eine wirksame direkt an die Schleimhaut verabreichte Menge irgendeines Anti-Pilz-Mittels (z.B. von Itraconazol, Ketoconazol und Voriconazol) etwa 0,01 ng bis etwa 1000 mg pro kg und Körpergewicht des Säugers pro Verabreichung betragen. Die MIC-Werte für Voriconazol liegen im Bereich von etwa 0,003 μg/ml bis etwa 4 μg/ml in Abhängigkeit von dem zu testenden spezifischen Pilzorganismus oder Isolat. Für Fluconazol liegen die MIC-Werte im Bereich von etwa 0,25 μg/ml bis mehr als etwa 64 μg/ml.
Um die Bestimmung wirksamer Mengen verschiedener Anti-Pilz-Mittel zu unterstüt zen, kann es nützlich sein, Bezug auf ein wirksames Mengenäquivalent zu nehmen, basierend auf der wirksamen Menge eines üblichen Anti-Pilz-Mittels. Zum Beispiel ist die direkte Verabreichung an die Schleimhaut von etwa 20 ml pro Nasenloch pro Verabreichung (z.B. zwei Mal täglich) einer Amphotericin B-Spüllösung mit einem Gehalt von etwa 100 mg Amphotericin B pro Liter eine wirksame Menge, wie hier gezeigt. Die von dieser wirksamen Menge ausgelösten Wirkungen können als Bezugsgröße verwendet werden, um die bei anderen Anti-Pilz-Mitteln, die in verschiedenen Konzentrationen verwendet werden, beobachteten Wirkungen zu vergleichen. Wenn eine äquivalente Wirkung beobachtet wird, kann die spezifische wirksame Menge für das jeweilige Anti-Pilz-Mittel bestimmt werden. In diesem Fall würde diese bestimmte Menge als zu der wirksamen Menge von Amphotericin B äquivalent bezeichnet werden.
Verschiedene Faktoren können die bei einer bestimmten Anwendung verwendete tatsächliche wirksame Menge beeinflussen. Zum Beispiel können die Häufigkeit der Verabreichung an die Schleimhaut, die Dauer der Behandlung, die Kombination mit anderen Anti-Pilz-Mitteln, der Ort der Verabreichung, der Grad der Entzündung und die anatomische Kon figuration des behandelten Bereichs eine Steigerung oder Verringerung der an die Schleimhaut verabreichten tatsächlichen Menge erfordern.
Die Häufigkeit der Verabreichung an die Schleimhaut kann jede Häufigkeit sein, die durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis bei einem Säuger verringert, verhindert oder eliminiert, ohne eine nennenswerte Toxizität bei dem Säuger zu verursachen. Zum Beispiel kann die Häufigkeit der Verabreichung an die Schleimhaut für etwa vier Mal täglich bis etwa ein Mal monatlich oder insbesondere von etwa zwei Mal täglich bis etwa ein Mal in der Woche sein. Weiterhin kann die Häufigkeit der Verabreichung an die Schleimhaut über die Behandlungsdauer hinweg konstant bleiben oder variieren. Wie bei der wirksamen Menge können verschiedene Faktoren, die tatsächliche Häufigkeit der Mukoadministration, die zu einer bestimmten Anwendung verwendet wird, beeinflussen. Zum Beispiel können die Häufigkeit der Verabreichung an die Schleimhaut, die Dauer der Behandlung, Kombinationen anderer Anti-Pilz-Mittel, der Ort der Verabreichung, der Grad der Entzündung und die anatomische Konfiguration des behandelten Bereichs eine Steigerung oder Verringerung der an die Schleimhaut verabreichten tatsächlichen Menge erfordern.
Eine effektive Dauer für die Verabreichung eines Anti-Pilz-Mittels an die Schleimhaut kann jede Dauer sein, die durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis bei einem Säuger verringert, verhindert oder eliminiert, ohne eine nennenswerte Toxizität bei dem Säuger zu verursachen. Somit kann die effektive Dauer von mehreren Tagen bis zu mehreren Wochen, Monaten oder Jahren variieren. Im Allgemeinen kann die effektive Dauer der Behandlung der durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Mukositis von mehreren Tagen bis zu mehreren Monaten reichen. Nach Absetzen der Antipilzbehandlung kann jedoch von neuem eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis auftreten. Somit kann die wirksame Dauer für die Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis mindestens in einigen Fällen für die gesamte Lebensdauer der Person sein.
Für weniger sterile Umgebungen, wie z.B. die Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie, kann jedoch eine wirksame Dauer im Bereich von etwa 30 Tagen bis zu mehr als etwa 80 Tagen liegen. Abermals sind prophylaktische Behandlungen typischerweise von längerer Dauer und können sich über die ganze Lebenszeit einer Person erstrecken.
Mehrere Faktoren können die tatsächliche wirksame Dauer beeinflussen, die für ein bestimmtes Behandlungs- oder Vorbeugungsregime verwendet wird. Zum Beispiel kann eine wirksame Dauer mit der Häufigkeit der Verabreichung des Anti-Pilz-Mittels, der wirksamen Menge des Anti-Pilz-Mittels, der Kombination mehrfacher Anti-Pilz-Mittel, dem Ort der Verabreichung, dem Grad der Entzündung und der anatomischen Konfiguration des behandelten Gebiets variieren. Weiterhin kann das jeweils verwendete Anti-Pilz-Mittel die tatsächliche wirksame Dauer beeinflussen. Zum Beispiel kann eine wirksame Dauer zur Behandlung durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis für Amphotericin B etwa 30 Tage und für Itraconazol etwa 7 Tage betragen.
Die Verfahren des diagnostischen Algorithmus können so gestaltet werden, dass sie geeignete wirksame Dosen, Dauern und Häufigkeiten bestimmen oder widerspiegeln.
Mindestens ein Anti-Pilz-Mittel enthaltende Formulierungen
Eine ein Anti-Pilz-Mittel enthaltende Formulierung kann jede beliebige Form haben, sofern die Formulierung einem Säuger in einer Menge, mit einer Häufigkeit und über eine Dauer hinweg auf die Schleimhaut verabreicht werden kann, die wirksam sind, um eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis zu verhindern, zu verringern, oder zu eliminieren. Zum Beispiel kann eine erfindungsgemäße Formulierung die Form eines Feststoffs, einer Flüssigkeit und/oder eines Aerosols haben, wozu ohne Beschränkung darauf Puder, kristalline Substanzen, Gele, Pasten, Ölungen, Salben, Creams, Lösungen, Suspensionen, Teilflüssigkeiten, Sprays, Nebel, Dämpfe, atomisierte Dämpfe, Tinkturen, Pillen, Kapseln, Tabletten und Gelcaps gehören. Überdies kann die Formulierung einen Cocktail von Anti-Pilz-Mitteln enthalten. Zum Beispiel kann die erfindungsgemäße Formulierung ohne Beschränkung darauf ein, zwei, drei, vier, fünf oder mehr verschiedene Anti-Pilz-Mittel enthalten. Weiterhin können erfindungsgemäße Formulierungen zusätzliche Inhaltsstoffe enthalten, darunter ohne Beschränkung darauf pharmazeutisch akzeptable wässrige Trägerstoffe, pharmazeutisch akzeptable feste Trägerstoffe, Steroide, mukolytische Mittel, antibakterielle Mittel, antiinflammatorische Mittel, Immunosuppressiva, Dilatoren, Vasokonstriktoren, entstauende Mittel, Leukotrieninhibitoren, Anticholinergika, Antihistaminika, therapeutische Mittel und Kombinationen davon. Weiterhin kann eine Formulierung jede beliebige Verbindung oder Kombination von Verbindungen enthalten, von der bekannt ist, dass sie wirksam bei der Unterdrückung des Würgereflexes eines Säugers sind.
Ein pharmazeutisch akzeptabler wässriger Trägerstoff kann z.B. jede wässrige Lösung sein, die imstande ist, ein Anti-Pilz-Mittel zu lösen und für das jeweils die Formulierung erhaltende Individuum nicht toxisch ist. Zum Beispiel gehören zu pharmazeutisch akzeptablen wässrigen Trägerstoffen ohne Beschränkung darauf Kochsalzlösung, Wasser und Essigsäure. Typischerweise sind pharmazeutisch akzeptable wässrige Trägerstoffe steril. Ein pharmazeutisch akzeptabler fester Trägerstoff kann so formuliert werden, dass das Anti-Pilz-Mittel für die orale Verabreichung geeignet ist. Zum Beispiel können Kapseln oder Tabletten ein Anti-Pilz-Mittel in magensaftresistenter Form enthalten. Die von jeder Kapsel oder Tablette bereitgestellte Dosis kann variieren, da eine wirksame Menge dadurch erreicht werden kann, dass man entweder eine oder mehrere Kapseln oder Tabletten verabreicht. Jedes wohlbekannte pharmazeutisch akzeptable Material, wie z.B. Gelatine und Zellulosederivate, kann als pharmazeutisch akzeptabler fester Trägerstoff verwendet werden. Weiterhin kann ein pharmazeutisch akzeptabler fester Trägerstoff ein fester Träger sein, darunter ohne Beschränkung darauf Stärke, Zucker oder Bentonit. Weiterhin kann eine Tabletten- oder Pillenformulierung eines Anti-Pilz-Mittels herkömmlichen Verfahren folgen, die feste Trägerstoffe, Schmiermittel und dgl. verwenden.
Steroide können jede beliebige Verbindung sein, die eine Hydrocyclopentanophenanthrenringstruktur enthält. Zu Beispielen von Steroiden gehören ohne Beschränkung darauf Prednison, Dexamethason und Hydrocortison. Mukolytische Mittel können jede Verbindung sein, die Schleim verflüssigen. Zu geeigneten mukolytischen Mitteln können ohne Beschränkung darauf N-Acetyl-L-cystein (MUCOSIL^TM; Dey Laborstories) und rekombinante menschliche DNase (PULMOZYME^®; Genentech, Inc.) gehören. Ein antibakterielles Mittel kann jede beliebige Verbindung sein, die gegen Bakterien wirksam ist, wie z.B. Penizillin, Erythromycin, Neomycin, Gentamicin und Clindamycin. Ein antiinflammatorisches Mittel kann jede Verbindung sein, die einer Entzündung entgegenwirkt, wie z.B. Ibuprofen und Salicylsäure. Ein Immunsuppressivum kann jede Verbindung sein, die die normale Immunfunktion supprimiert oder mit ihr interferiert, wie z.B. Cyclosporin. Ein Dilator kann jede Verbindung sein, die die Ausdehnung einer Öffnung verursacht, wie z.B. Albuterol. Ein Vasokonstrikor kann jede Verbindung sein, die Blutgefäße konstringiert oder verengt, wie z.B. Phenylephrinhydrochlorid (NEO-SYNEPHRINE^®; Sanofi Pharmaceuticals), Kokain und Epinephrin. Ein entstauendes Mittel kann jedes Mittel sein, das so wirkt, dass es Nasen- und Nasennebenhöhlenstauung oder -anschwellung verringert, wie z.B. Pseudoephedrinhydrochlorid, Phenylpropanolamin und Oxymetazolin. Ein Leukotrieninhibitor kann jede Verbindung sein, die die Funktion oder Bildung eines Leukotriens inhibiert, wie z.B. Azelastine^®. Ein Anticholinergikum kann jede Verbindung sein, die parasympathische Nervenimpulse blockiert, wie z.B. Ipratropiumbromid. Ein Antihistaminikum kann jede Verbindung sein, die die Wirkung von Histamin oder seine Freisetzung aus den Zellen (z.B. Mastzellen) entgegenwirkt, wie z.B. Terfenadin und Astemizol.
Eine therapeutische Verbindung kann Verbindung sein, die bei der Verabreichung eine therapeutische Wirkung hat. Zum Beispiel kann eine therapeutische Verbindung jede Verbindung sein, die die Interaktion eines Eosinophilen mit an ein Pilzantigen gebundenem Immunglobulin blockiert und damit interferiert, indem sie z.B. Interaktionen des Fc-Rezeptors oder des S-Typ-Lectinfaktorrezeptors (z.B. Galectin-3) ansteuern. Zu solchen Verbindungen können ohne Beschränkung darauf Antikörper, z.B. IgE, IgA, IgG, IgM und IgD gehören ebenso wie Antikörperfragmente, wie z.B. Fab, F(ab')₂, FcγRI, FcγRII, FcαR, FcεRII und FcεRI.
Verabreichung an die Schleimhaut, die auf die Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie zielt
Die Verabreichung eines Mittels an die Schleimhaut der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie kann jede Art von Verabreichung sein, die das Mittel in Kontakt mit dem Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim bringt. Eine direkte Verabreichung an die Schleimhaut der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie kann ohne Beschränkung darauf Nasenspülungen, Nasensprays, Naseninhalation und Nasenpackungen umfassen, bei denen z.B. ein gesättigter Dunst dafür sorgt, dass das verabreichte Mittel mit dem Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim in Kontakt kommt, bevor es das Epithel überquert. Weiterhin werden Injektionen in die Nasen- und Nasennebenhöhlen unter Verwendung z.B. von einer Nadel oder einem Katheterröhrchen als direkte Verabreichung an die Schleimhaut betrachtet, sofern das verabreichte Mittel nach dem Austritt aus der Nadel oder dem Katheterröhrchen vor der Überquerung des Epithels mit dem Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim in Kontakt kommt. Jede Vorrichtung kann verwendet werden, um ein Mittel direkt auf die Schleimhaut der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie zu verabreichen, darunter ohne Beschränkung darauf eine Spritze, ein Kolben, ein Inhalator, ein Kanister, eine Spraydose, ein Vernebler und eine Maske. Zum Beispiel kann ein 20 ml-Kolben verwendet werden, um die Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie mit einer flüssigen Form einer Formulierung zu spülen, die ein Anti-Pilz-Mittel enthält. Solch eine flüssige Form einer Formulierung kann bei –20°C, 0°C oder Raumtemperatur gelagert werden. Wenn sie unter Raumtemperatur gelagert wird, wird die Formulierung typischerweise vor der Applikation auf die Nasen- und Nasennebenhöhlen erwärmt.
Zur indirekten Verabreichung an die Schleimhäute der Nasen- und Nasennebenhöhlen können ohne Beschränkung darauf orale, intravenöse, intradermale und intraperitoneale Verabreichungen gehören, sofern das verabreichte Mittel mit dem Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim in Kontakt kommt. Weiterhin kann jede Vorrichtung verwendet werden, um indirekt ein Mittel an die Schleimhaut der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie zu verabreichen, darunter ohne Beschränkung darauf eine Spritze und eine Kapsel mit kontrollierter Freisetzung.
Der jeweilige Verabreichungsweg kann die wirksame Menge und Dauer einer Behandlung mit Anti-Pilz-Mitteln ebenso wie die Häufigkeit der Verabreichung an die Schleimhaut beeinflussen. Zum Beispiel können oral an die Schleimhaut verabreichte Anti-Pilz-Mittel höhere Konzentrationen benötigen, um eine wirksame Menge an den Nasen- und Nasenne benhöhlenschleim abzugeben, als bei direkter Verabreichung an die Schleimhaut durch Nasenspülungen.
Zusätzliche Behandlungen
Andere Behandlungen können in Kombination mit einer ein Anti-Pilz-Mittel enthaltenden Formulierung verwendet werden, um dazu beizutragen, die Behandlung oder Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Mukositis-Krankheitsbildern zu verbessern. Zu solchen zusätzlichen Behandlungen können ohne Beschränkung darauf chirurgische Eingriffe und die Verabreichung einer zweiten Formulierung gehören. Zu den chirurgischen Eingriffen können ohne Beschränkung darauf die Entfernung von polypoiden Gewächsen oder anderen Tumoren, die physische Öffnung einer Höhlung und die Einführung von Katheterröhrchen oder dgl. gehören. Zu einer zweiten Formulierung können ohne Beschränkung darauf Anti-Pilz-Mittel, mukolytische Mittel, antibakterielle Mittel, antiinflammatorische Mittel, Immunosuppressiva, Dilatoren, Vasokonstriktoren, entstauende Mittel, Steroide, Anticholinergika, Leukotrieninhibitoren, Antihistamine, therapeutische Verbindungen und Kombinationen davon gehören. Weiterhin kann diese zweite Formulierung einem Säuger auf jedem beliebigen Weg verabreicht werden. Zum Beispiel können orale, intraperitoneale, intradermale, intravenöse, subkutane, intramuskuläre, topische, intranasale und intrabronchiale Administration verwendet werden, um eine zweite Formulierung einem Säuger zu verabreichen.
Die Erfindung wird in den nachfolgenden Beispielen detaillierter beschrieben, die den Bereich der Erfindung, in den Ansprüchen beschrieben, nicht beschränkt.
BEISPIELE
Beispiel 1 – Sammeln und Untersuchung von Schleimproben
Die folgenden Verfahren und Materialien wurden verwendet, um Schleim von 202 Patienten zu sammeln und zu untersuchen. Vor dem Sammeln des Schleims wurde jeder Patient angewiesen, einzuatmen und dann sein oder ihr Kinn auf die Brust zu senken, um den Fluss der Sammellösung aus den Nasen- und Nasennebenhöhlenwegen durch den normalen Abfluss im Hintergrund des Rachens zu minimieren oder zu verhindern. Die Sammellösung war entweder eine sterile Salzlösung oder steriles Wasser. Weiterhin wurde jeder Patient so positioniert, dass der Ausstrom der Sammelflüssigkeit aus den Nasenwegen minimiert oder verhindert wurde. Einige Patienten erhielten eine Verabreichung eines Vasokonstriktors, wie z.B. Phenylephrinhydrochlorid (1–2 Sprühstöße pro Nasenloch) oder Kokain (Pulver oder Flüssigkeit zur lokalen Anwendung; weniger als vier mg pro kg Körpergewicht). Einige Patienten erhielten ein Spray von etwa drei ml einer 20%igen Lösung von N-Acetyl-L-cystein. Patienten, die beide erhielten, erhielten zuerst den Vasokonstriktor und dann etwa zwei Minuten später N-Acetyl-L-cystein.
Nach der Vorbereitung des Patienten wurde ein Sammelbehälter unter dem Nasenloch oder den Nasenlöchern platziert, aus dem bzw. aus denen die Schleimprobe zu sammeln war. Ein Injektionsgerät, wie etwa eine spritzenartige Vorrichtung mit einem Röhrenteil oder einer stumpfen gekrümmten Nadel, wurde dann in eines der Nasenlöcher des Patienten oder seiner Nasennebenhöhlenanatomie eingebracht, so dass die Sammellösung durch die Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie des Patienten gezwängt werden konnte. In einigen Fällen wurden etwa fünf ml bis etwa 30 ml einer Sammellösung in ein Nasenloch über einen Zeitraum von etwa 0,5 und fünf Sekunden injiziert. In den meisten Fällen wurden etwa 10 ml bis etwa 20 ml einer Sammellösung in ein Nasenloch über einen Zeitraum von zwischen 0,5 und drei Sekunden injiziert.
Im Allgemeinen schnäuzte jeder Patient die Sammellösung aus oder entleerte sie forciert, entweder gleichzeitig mit der Injektion oder wenn ihr Eindringen ins Nasenloch verspürt wurde. Das forcierte Entleeren der injizierten Sammellösung trug erheblich zur Ablösung von Schleim in den Nasen- und Nasennebenhöhlenlumina des Patienten bei. Wiederum wurde besondere Sorgfalt darauf verwendet, den Verlust von Sammellösungsvolumen zu verringern oder zu verhindern. Nach dem Ausstoßen wurde die den Schleim von den Nasenlöchern des Patienten enthaltende Sammellösung in dem unter dem Nasenloch platzierten Behälter aufgefangen. Nach dem Sammeln des Nasen- und Nasennebenhöhlenschleims wurde der Schleim nach einem der beiden folgenden Verfahren kultiviert. Im ersten Verfahren wurde ein ml einer 20%igen N-Acetyl-L-cystein-Lösung zu etwa 10 ml der gewonnenen Sammellösung zugesetzt, die den Schleim enthielt. Dieses Gemisch wurde dann 30 Sekunden lang auf einem Vortex gemischt und 15 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubiert. Nach der Inkubation wurde das Gemisch fünf Minuten lang bei 4800 rpm in einem 50 ml-Röhrchen zentrifugiert. Nach der Trennung wurde der Überstand verworfen, und der übrig gebliebene Schleim wurde 30 Sekunden lang auf einem Vortex gerührt. Ein 0,5 ml-Aliquot des isolierten Schleims wurden dann jeder Kulturplatte zugesetzt, wobei jeweils eine IMA-Platte Chloramphenicol und eine IMA-Platte Ciprofloxacin enthielt. Die Platten wurden dann bei 30°C inkubiert und als Routinepilzkultur behandelt. Das Wachstum individueller Isolate wurde von etwa zwei Tagen bis etwa 35 Tagen beobachtet.
Im zweiten Verfahren wurden 10 ml DTT mit 90 ml sterilem destillierten Wasser verdünnt. Ein gleiches Volumen dieser frisch verdünnten DTT-Lösung wurde der gewonnenen Sammellösung zugesetzt, die den Schleim enthielt, und das Gemisch wurde 30 Sekunden lang auf einem Vortex gerührt. Dieses Gemisch wurde 15 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubiert. Nach der Inkubation wurde das Gemisch 10 Minuten lang bei 3000 g in einem 50 ml-Röhrchen zentrifugiert. Nach der Trennung wurde der Überstand verworfen, und der üb rig gebliebene Schleim wurde 30 Sekunden lang auf einem Vortex gerührt. Ein 0,5 ml-Aliquot des isolierten Schleims wurden dann jeder Kulturplatte zugesetzt, wobei eine IMA-Platte Chloramphenicol enthielt und eine Bay-Agar-PlatteCiprofloxacin enthielt. Die Platten wurden dann bei 30°C inkubiert und als Routinepilzkultur behandelt. Das Wachstum individueller Isolate wurde von etwa zwei Tagen bis zu etwa 35 Tagen beobachtet.
Sobald Pilzwachstum beobachtet wurde, wurden die Organismen unter Verwendung standardmäßiger mykologischer Techniken identifiziert, darunter visuelle, histologische und immunologische Techniken. Zu den identifizierten Pilzgattungen- und -arten gehörten zahlreiche zuvor aus AFS-Patienten isolierte Pilzorganismen wie z.B. Absidia, Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus glaucus, Aspergillus nidulans, Aspergillus versicolor, Alternaria, Basidiobolus, Bipolaris, Candida albicans, Candida lypolytica, Candida parapsilosis, Cladosporium, Conidiobolus, Cunninahamella, Curvularia, Dreschlera, Exserohilium, Fusarium, Malbranchia, Paecilomvces, Penicillium, Pseudallescheria, Rhizopus, Schizophylum und Sporothrix. Weiterhin wurden Pilzorganismen identifiziert, die in Schleimproben von positiv auf ASF diagnostizierten Patienten nicht zuvor identifiziert worden waren, wie z.B. Acremonium, Arachniotus citrinus, Aurobasidioum, Beauveria, Chaetomium, Chryosporium, Epicoccum, Exophilia jeanselmei, Geotrichum, Oidiodendron, Phoma, Pithomyces, Rhinocladiella, Rhodoturula, Sagrahamala, Scolebasidium, Scopulariopsis, Ustilago, Trichoderma und Zygomycete.
Zur Bestimmung der optimalen Temperatur zur Kultur von Pilzorganismen, die eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Mukositis auslösen, wurden von zwei Patienten gewonnene verflüssigte Schleimproben auf IMA-Platten kultiviert, die entweder Chloramphenicol oder Ciprofloxacin enthielten. Zwei Platten (von denen eine Chloramphenicol und die andere Ciprofloxacin enthielt) für jede Probe wurden dann bei 25°C, 28°C, 30°C, 32°C, 33°C, 35°C und 37°C inkubiert. Jede Platte wurde über einen Zeitraum von etwa zwei Tagen bis etwa 35 Tagen nach dem Beginn der Kultivierung durch Inspektion an jedem zweiten Tag auf Pilzwachstum und -entwicklung visuell bewertet. Die Werte für jede Temperatur wurden gemittelt, was einen geschätzten Wert der optimalen Temperatur für die Sporenkeimung und nachfolgendes Wachstum oder Entwicklung von Pilzorganismen lieferte. Die Ergebnisse zeigten, dass die Optimaltemperatur für das Pilzwachstum in Abhängigkeit von der spezifischen Pilzspezies oder dem spezifischen Pilzisolat variiert. Es wurde gefunden, dass 30°C im Allgemeinen das Wachstum der größten Anzahl von Pilzspezien und Isolaten unterstützten.
Man verwendete das folgende Verfahren, um wirksame Anti-Pilz-Mittel und wirksame Konzentrationen von Anti-Pilz-Mitteln zu bestimmen, so dass die aus den Patienten isolierten Pilzorganismen am Wachstum gehindert oder abgetötet werden konnten.

17 Pilzisolate wurden aus acht Rhinosinusitis-Patienten gewonnen und auf Empfindlichkeit gegen Amphotericin B, Ketoconazol und Itraconazol getestet. Jedes Pilzmittel wurde an diesen Pilzisolaten unter Verwendung der Macro-Broth-Verdünnungstechnik gemäß dem Protokoll des National Committee an Clinical Laborstory Standards (NCCLS) getestet. Eine 48-stündige MIC-Aufzeichnung wurde durchgeführt und gemäß den NCCLS-Richtlinien interpretiert, um jede Kultur als empfindlich, intermediär oder resistent gegenüber dem Pilzmittel bei den getesteten Konzentrationen zu klassifizieren. Die Ergebnisse dieses Verfahrens lieferten eine Einschätzung der Wirksamkeit von Anti-Pilz-Mitteln gegen spezifische Pilzisolate in vitro. Grundsätzlich wurde gefunden, dass die MIC-Werte für dieses Anti-Pilz-Mittel für jedes Isolat in einem weiten Bereich zwischen 0,03 und 100 μg/ml variierten (Tabelle I). TABELLE I. Aus 64 von 66 Rhinosinusitis-Patienten isolierte Pilzorganismen, untersucht unter Verwendung von 17 Amphotericin B-, Ketoconazol- und Itraconazol-MIC-Werten für ausgewählte Isolate aus acht Rhinosinusitis-Patienten.

Pilzorganismus	Anzahl der Spezies/Isolate	Amphotericin B MIC (μg/ml)	Ketoconazol MIC (μg/ml)	Itraconazol MIC (μg/ml)
Acremonium	1
Alternaria	40	0,2	1,56	neg*
		0,8	3,13	neg
		> 5	12,5	neg
Arachniotus citrinus	2
Aspergillus	21
Aurobasidium	2
Candida	13	0,2	50	0,03
		0,4	1,56	neg
		0,1	0,39	neg
		0,2	> 100	neg
Cladosporium	21	3	1,56	neg
		0,4	0,05	neg
		0,1	0,05	0,125
Chryosporium	1
Epicoccum	6
Exophilium Jeanselmei	2

Fusarium	18	> 5	> 100	37°C**
		2	100	1
		> 5	12,5	> 16
Geotrichum	5	0,1	0,05	37°C
Mucor	2
Oididendron	1
Paecilomyces lilacinus	2
Papularia	1
Penicillium	30	0,4	3,13	0,5
		1	1,56	0,25
Phoma	1
Pithomyces	2
Rhodoturula	1
Scolebasidium	1
Trichoderma	3	4	50	37°C
Ustilago	2
nicht identifiziert (2 Monila, 3 Hautpilze)	7

*, neg bedeutet, dass der Organismus in dem Testmedium (PEG 400) nicht wuchs; **, 37°C bedeutet, dass der Organismus bei 37°C nicht wuchs

Die folgende Untersuchung wurde durchgeführt, um die Häufigkeit von Rhinosinusitis-Krankheitsbildern mit einer Ätiologie nichtinvasiver Pilze zu bestimmen. Für diese Untersuchung wurden die folgenden Kriterien verwendet, um zu bestimmen, ob ein Patient durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis hat: (1) Vorliegen einer sichtbaren Erkrankung innerhalb der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie, (2) Vorliegen von allergischem Schleim, und (3) Vorliegen von Pilzorganismen im Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim.
Jeder Patient hatte einen CT-Scan unter Verwendung von Standardverfahren, um das Vorliegen einer sichtbaren Erkrankung in der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie zu bestimmen. Zur Bestimmung des Vorliegens von allergischem Schleim wurde eine chirurgische Probe von jedem Patienten gewonnen und histologisch bewertet. Besondere Sorgfalt wurde beim Sammeln jeder chirurgischen Probe darauf verwendet, sicherzustellen, dass keine Schleimproben weggewaschen wurden. Um die Gegenwart von Pilzorganismen im Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim zu bestimmen, wurden die hier beschriebenen Ver fahren und Materialien zur Gewinnung und Kultur von Pilzorganismen aus dem Schleim eines Patienten verwendet.
73 Rhinosinusitis-Patienten wurden in die Studie aufgenommen. Das Alter dieser Patienten reichte von 13 bis 73 Jahren, mit einem Durchschnitt von 50,1 Jahren. 39 der 73 Patienten waren weiblich und 34 waren männlich. Die Anzahl der vorangegangenen chirurgischen Eingriffe im Hinblick auf Rhinosinusitis reichte für jeden Patienten von 0 bis 25, mit einem Durchschnitt von 3,41 chirurgischen Eingriffen pro Patient. 70 der 73 Patienten hatten zuvor einen Rückfall in Polypose und Rhinosinusitis erlebt.
Sieben Patienten wurden nachfolgend aufgrund eines Mangels an akzeptablen Schleimproben aus der Studie ausgeschlossen. Von den restlichen 66 Patienten wurden 66 (100 %) als CT-Scan-positiv, 62 (94 %) als positiv für das Vorliegen von allergischem Schleim und 64 (97 %) mit positiven Pilzkulturen diagnostiziert. Zusammengenommen erfüllten 60 von 66 Fällen (91 %) alle drei Kriterien. Mit anderen Worten hatten 91 % der 66 hier bewerteten Rhinosinusitis-Patienten, legt man die obigen Kriterien zugrunde, eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis. Dieser Anteil von 91 % stellt eine dramatische Steigerung der Anzahl der Rhinosinusitisfälle dar, an denen nichtinvasive Pilzorganismen beteiligt sind. Zum Beispiel berichten zahlreiche medizinische Forschungsartikel, dass etwa drei bis acht Prozent der chronischen Rhinosinusitisfälle, die einen chirurgischen Eingriff erfordern, AFS-Fälle seien, ein Rhinosinusitis-Krankheitsbild mit einer Ätiologie nichtinvasiver Pilze. Somit zeigen die hier dargestellten Ergebnisse, dass die Beteiligung von nichtinvasiven Pilzorganismen in Rhinosinusitis-Krankheitszuständen erheblich höhere Prävalenz hat als zuvor wahrgenommen.
Insgesamt wurden aus Schleimproben von diesen Patienten mit durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis 25 verschiedene Pilzspezies identifiziert. 16 Organismen, die nie zuvor als koinzident mit AFS vorliegend beschrieben wurden, wurden in den 64 Schleimproben detektiert, die Pilzwachstum zeigten. Deren Anzahl reichte von etwa ein bis sieben Pilzorganismen pro Patient mit einem Durchschnitt von etwa 2,9 Pilzspezies pro Patient. 63 Prozent der Kulturen umfassten Alternaria, 47 Prozent umfassten Penicillium, 33 Prozent befassten Cladosporium, 33 Prozent umfassten Aspergillus, 28 Prozent umfassten Fusarium und 20 Prozent umfassten Candida.
In einer separaten Untersuchung wurden Schleimproben von 12 Kontrollpersonen (d.h. Personen ohne chronische Rhinosinusitis) gewonnen und wie hier beschrieben analysiert. Alle 12 (100 %) hatten positive Pilzkulturen. Spezifisch wurden insgesamt sieben verschiedene Pilzorganismen kultiviert, mit einem Durchschnitt von etwa 2,25 verschiedenen Pilzorganismen pro Person und einem Bereich von einem bis vier. 50 Prozent der Kulturen umfassten Cladosporium, 4 Prozent umfassten Alternaria, 33 Prozent befassten Geotrichum, 33 Prozent umfassten Aspergillus, 25 Prozent umfassten Penicillium, 8 Prozent umfassten Acremonium und 8 Prozent umfassten Candida. Diese Ergebnisse zeigen, dass Pilzorganismen im Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim der meisten, wenn nicht allen, Menschen leben.
Beispiel 2 – Behandlung und Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis
132 konsekutive Rhinosinusitis-Patienten wurden in eine Studie aufgenommen, um die Verwendung eines Anti-Pilz-Mittels zur Behandlung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis zu evaluieren. Nach der diagnostischen Analyse hatten 125 der 132 Patienten (95 %) die folgenden Kriterien: (1) Vorliegen einer sichtbaren Erkrankung in der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie, wie durch einen CT-Scan gezeigt, (2) Vorliegen von allergischem Schleim, nachgewiesen durch histologische Untersuchung einer chirurgischen Probe, und (3) Vorliegen von Pilzorganismen im Nasen- und Nasennebenhöhlenschleim, dadurch nachgewiesen, dass man Pilzorganismen aus einer Schleimprobe kultivieren konnte. Die 125 Patienten mit durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis wurden anfänglich mit einer Anti-Pilz-Behandlung von etwa 20 ml einer Amphotericin B-Lösung pro Nasenloch, zwei bis vier Mal täglich über einen Zeitraum von wenigstens drei Monaten, behandelt. Die Konzentration der Amphotericin B-Lösung war etwa 100 mg pro Liter Kochsalzlösung oder Wasser. Ein 20 ml-Kolben wurde von den Patienten verwendet, um die Amphotericin B-Lösung auf die Schleimhaut in der Nasen- und Nasennebenhöhlenanatomie des Patienten zu verabreichen. Daten wurden für 53 der Patienten, die zur Dreimonats-Nachfolge-Analyse zurückgekehrt waren, zusammengestellt.
Außer Patientenbefragung, CT-Scan-Analyse, optischer Inspektion und Pilzkulturanalyse wurden zwei Arten von Evaluation verwendet, um den Erfolg der Behandlung zu bewerten: eine endoskopische Untersuchung und eine Bewertung der Patientensymptome.
Diese Evaluationen wurden wie folgt bewertet:
Endoskopische Evaluation

Stufe 0: kein Hinweis auf eine Erkrankung
Stufe 1: polypoide Veränderungen/Polypen nur durch Endo skopie zu sehen
Stufe 2: Polypen im Mittelmeatus
Stufe 3: Polypen füllen die Nasenhöhle

Evaluation der Patientensymptome

Stufe –2: sehr schlecht/viel schlechter
Stufe –1: schlecht/schlechter
Stufe 0: wie anfänglich/keine Veränderung
Stufe 1: gut/verbessert
Stufe 2: sehr gut/symptomfrei

Die endoskopische Evaluation zeigte, dass 33 der 53 Patienten von Stufe 2 oder 3 nach drei Monaten auf Stufe 0 gelangt waren. Sechs dieser 33 Fälle, die keine Anzeichen einer Erkrankung zeigten, wurden durch CT-Scans bestätigt. Zum Beispiel wurde bei einem Patienten, der keine chirurgischen Eingriffe in jüngerer Zeit gehabt hatte und keine Steroide einnahm, eine bilaterale Rhinosinusitis diagnostiziert, da ein CT-Scan bilaterale Beteiligung zeigte (1). Der Patient erhielt dann die Behandlung mit 20 ml Amphotericin B-Lösung (100 mg/l) pro Nasenloch zwei Mal am Tag. Nach vier Monaten kontinuierlicher Anti-Pilz-Behandlung wurde ein CT-Scan aufgenommen, um das komplette Verschwinden von Trübung und der für Rhinosinusitis charakteristischen Symptome zu zeigen (2).
11 der 53 Patienten veränderten sich von der endoskopischen Evaluationsstufe 2 oder 3 nach drei Monaten auf Stufe 1. Die anderen neun Patienten sprachen auf die Behandlung nicht an. Von fünf der neun nicht ansprechenden Patienten waren zuvor abgenommene Schleimproben zur Untersuchung verfügbar. Eine Untersuchung dieser fünf verfügbaren Proben zeigte, dass alle fünf Patienten Pilzorganismen in ihrem Schleim hatten, die gegen Amphotericin B, das zur Behandlung verwendete Anti-Pilz-Mittel, resistent waren.
Die Evaluation der Patientensymptome zeigte, dass 44 der 53 Patienten sich eine Stufe 2 gaben, drei der 53 eine Stufe 1, und sechs der 53 eine Stufe 0 nach der Behandlung. Die neun Patienten, die sich selbst eine Stufe 1 oder 0 gaben, waren die gleichen neun Patienten, die keinerlei durch die endoskopische Bewertung gemessenes Ansprechen zeigten; für fünf davon wurde gezeigt, dass sie gegen Amphotericin B resistente Pilzorganismen enthielten. In der nachfolgenden Analyse einer anderen Patientenkohorte wurde gefunden, dass mehrere nicht ansprechende Patienten keine Amphotericin 8-resistenten Pilzorganismen enthielten.
Weiterhin waren von mehreren Patienten Schleimproben vor und nach der Anti-Pilz-Behandlung gesammelt und analysiert worden. Ein Vergleich der Ergebnisse der Evaluation der Schleimproben vor und nach der Anti-Pilz-Behandlung zeigte, dass die Anzahl der verschiedenen Pilzspezies bei diesen Patienten nach der Anti-Pilz-Behandlung bemerkenswert verringert war, wie durch Pilzorganismuskulturtechniken bestimmt. Somit waren die Rhinosinusitis-Patienten nach der Behandlung mit einem Anti-Pilz-Mittel asymptomatisch und enthielten weniger Pilze in ihrem Schleim.
In einer separaten Fallstudie wurde bei einem Patienten Rhinosinusitis in der linken Nasennebenhöhle diagnostiziert, da ein CT-Scan eine entzündliche Erkrankung mit charakteristischen Rhinosinusitis bedingten Trübungen in der linken Nasennebenhöhle zeigte. Ein RAST-Assay auf Alternaria zeigte 6,23 Kiloeinheiten pro Liter (KU/l), und bilaterale Pilzkulturen bestätigten Alternaria-Wachstum in jedem Nasenloch. Jedoch erhielten nur die linke Nasen- und Nasennebenhöhlenseite einen chirurgischen Eingriff und intraoperative und postoperative Behandlungen mit etwa 20 ml einer Amphotericin B-Lösung (100 mg/l) zwei bis vier Mal täglich. Nach jeder postoperativen Visite waren die linken Nasennebenhöhlen des Patienten krankheitsfrei. Eine acht bis 10 Wochen nach dem Verschwinden der Rhinosinusitissymptome in den linken Nasennebenhöhlen des Patienten durchgeführte RAST-Messung zeigte jedoch 7,16 KU/l. Dies stellte einen Anstieg gegenüber der ersten RAST-Messung dar. Sechs Monate nach der Operation diagnostiziert man bei dem Patienten Rhinosinusitis in der rechten Nasennebenhöhle durch einen CT-Scan und einen 10,0 KU/l-RAST-Wert auf Alternaria. Nach einem chirurgischen Eingriff an den rechten Nasennebenhöhlen des Patienten und Anti-Pilz-Behandlung auf beiden Seiten unter Verwendung von etwa 20 ml einer Amphotericin B-Lösung (100 mg/l) pro Nasenloch zwei bis vier Mal täglich über einen Zeitraum von etwa sieben Wochen blieb der Patient symptomfrei und hatte einen RAST-Wert von 4,47 KU/l. Sechs Monate nach diesem letzten chirurgischen Eingriff war der Patient immer noch symptomfrei und krankheitsfrei, wie durch einen CT-Scan gezeigt.
Zusammengenommen zeigen diese Ergebnisse, dass eine geeignete Spülung mit einem korrekt verabreichten Anti-Pilz-Mittel auf eine einzelne Seite zur Verhinderung von Entzündungssymptomen auf dieser Seite führte. Weiterhin war die zuvor detektierte Pilzlast auf der ursprünglich unbehandelten Seite (rechte Seite) ausreichend, um schließlich ein Auftreten von sichtbaren oder fühlbaren Rhinosinusitissymptomen auf dieser ursprünglich unbehandelten Seite zu verursachen. Weiterhin lösten die in der ursprünglich unbehandelten Seite (rechte Seite) vorliegenden Pilzorganismen hohe IgE-Titer aus, wie durch IgE-Messwerte aus den RAST-Assays gezeigt, unabhängig von der parallelen Verringerung der Pilzorganismen durch Anti-Pilz-Behandlung auf der linken Seite. In diesem Fall wurde eine Verringerung der IgE-Werte bei den RAST-Assays nur nach Spülung beider Seiten mit einem Anti-Pilz-Mittel beobachtet. Somit fielen die IgE-Verringerung und die Vorbeugung der Krankheitssymptome mit der Behandlung beider Seiten mit einem Anti-Pilz-Mittel zusammen.
Zur weiteren Evaluation der Verwendung eines Anti-Pilz-Mittels zur Behandlung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis wurde für jeden Patienten, der in die Arztpraxis zurückkehrte, innerhalb eines einwöchigen Zeitraums Patienteninformation aufgenommen. Nur zuvor untersuchte Patienten, die angewiesen worden waren, die Amphotericin B-Anti-Pilz-Nasenspülung zu verwenden, wurden in diese Studie aufgenommen.
Über einen Zeitraum von einer Woche hinweg kehrten 20 Patienten in die Arztpraxis zurück (Tabelle II). Das Durchschnittsalter der zurückkehrenden Patienten war 47 Jahre (Bereich 16–74 Jahre). Die Patienten verwendeten die Amphotericin B-Spülungen über einen durchschnittlichen Zeitraum von etwa sechs Monaten hinweg (Bereich 1–16 Monate). Einige Patienten hatten einen nicht mehr als einen Monat zurückliegenden nasenchirurgischen Eingriff, während andere niemals einen solchen chirurgischen Eingriff gehabt hatten. Weiterhin verwendeten einige Patienten lokale und systemische Steroid-Therapie. Weiterhin verwendeten einige Patienten eine antibiotische Nasenspülung zusätzlich zu den Anti-Pilz-Spülungen. Die antibakterielle Lösung enthielt 80 mg Gentamicin pro I Kochsalzlösung (Wilsons Lösung). Einige Patienten mischten die antibakterielle Lösung mit der Anti-Pilz-Lösung und führten dann die Nasenspülung durch, während andere beide Lösungen getrennt nacheinander verwendeten. Einige Patienten hatten auch andere Erkrankungen, einschließlich von Asthma (15 der 20 Patienten) und Colitis (2 der 20 Patienten).

Bei endoskopischer Evaluation zeigten die meisten Patienten eine sichtbare Verbesserung in ihrem durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Rhinosinusitis-Krankheitsbild. Diese zu beobachtenden Verbesserungen korrelierten mit den von jedem Patienten abgegebenen Werte und der Verbesserung der Symptome. Ein Patient setzte die Amphotericin B-Nasenspülung nach zwei Monaten ab. Acht Monate später zeigte dieser Patient wiederkehrende Symptome des durch nichtinvasive Pilze ausgelösten Rhinosinusitis-Krankheitsbildes. Zwei andere Patienten stellten von einer Amphotericin B-Lösung (Dauer: drei Monate; Häufigkeit: zwei Mal täglich) auf eine Itraconazol-Lösung (Dauer: ein Monat; Häufigkeit zwei Mal täglich) um. Einer beschrieb ein besseres Gefühl nach Verwendung der Itraconazol-Lösung nach nur sieben Tagen. Zusammengenommen zeigen diese Ergebnisse, dass Anti-Pilz-Mittel wirksam zur Behandlung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis verwendet werden können. TABELLE II: Während einer einwöchigen Periode erhobene Patientendaten

Alter	Dauer (Ampho)	Häufigkeit	letzter chirurgischer Eingriff	Steroid-Behandlung	Andere Erkrankungen	Endoskopische Bewertung		Symptomatische Bewertung
Alter	Dauer (Ampho)	Häufigkeit	letzter chirurgischer Eingriff	Steroid-Behandlung	Andere Erkrankungen	B	A	B	A
59	3 Mon¹	2 × Tag.	2 Mon	Nein	Asthma	NA	NA	–1	1
40	1 Mon	2 × Tag.	Keine	Ja⁸	Asthma Colitis	2	1	–1	+2
63	4 Mon	1 × Tag.	4 Mon	Nein	Colitis	1	0	–1	+1
16	12 Mon	1 × Tag	26 Mon	Lokal	Asthma	2	0	–1	+2
44	12 Mon²	2 × Tag	9 Mon	Nein	Asthma	3	0	–1	+1
40	2 Mon²	2 × Tag	12 Mon	Nein	Nein	3	3	–1	0
23	16 Mon	2 × Tag	10 Mon	Nein	Asthma	3	0	–1	+1
48	4 Mon	2 × Tag	> 10 Jahre	Lokal	Nein	2	0	–1	0
50	4 Mon	2 × Tag	4 Mon	Nein	Asthma	1	0	–1	+1
45	2 Mon	2 × Tag	Keine	Lokal	Asthma	1	NA	–1	0
74	2 Mon	2 × Tag	> 4 Jahre	Lokal	Nein	2	NA	–1	+1
57	2 Mon	2 × Tag	1 Mon	Systemisch Lokal	Asthma	2	0	–1	+2
16	12 Mon⁴	1 × Tag	12 Mon	Nein	Asthma¹²	3	0	–1	+2
71	7 Mon	2 × Tag	> 6 Jahre	Nein	Asthma	3	3	–2	–2
38	12 Mon	2 × Tag	> 6 Jahre	Ja⁹	Asthma	3	3	–1	0
38	5 Mon	2 × Tag	28 Mon	Nein	Asthma	0	0	–2	+2
66	13 Mon	2 × Tag	> 4 Jahre	Lokal	Nein	3	3	–2	0
70	3 Mon⁵	2 × Tag	> 2 Jahre	systemisch¹⁰ Lokal	Asthma	3	3	–2	+1
32	3 Mon⁶	2 × Tag	5 Mon	Nein	Asthma	3	1	–2	+2
47	2 Mon⁷	2 × Tag	> 3 Jahre	systemisch¹¹ Lokal	Asthma	3	0	–2	0

B, vor der Anti-Pilz-Behandlung; A, nach der Anti-Pilz-Behandlung
1 auch mit Wilsons Lösung (80 mg Gentamicin/l Kochsalzlösung) zwei Mal am Tag ge spült
2 zwischenzeitlich auch mit Wilsons Lösung gespült
3 setzte die Nasenspülung vor acht Monaten ab, und die Krankheit trat erneut auf
4 auch mit Wilsons Lösung (80 mg Gentamicin/l Kochsalzlösung ein Mal am Tag gespült
5 fühlte sich sieben Tage nach Umstellung von Amphotericin B-(Dauer: drei Monate; Häufigkeit: zwei Mal täglich) auf Itraconazol-(Dauer: ein Monat; Häufigkeit: zwei Mal täglich)-Nasenspülungen besser
6 stellte nach drei Monaten Amphotericin B-Behandlung auf Itraconazol-Spülungen (Dauer: ein Monat; Häufigkeit: zwei Mal täglich) um
7 auch mit Wilsons Lösung gespült (Dauer: 1 Jahr)
8 erhielt einen Monat zuvor Kenalog 40 IM Medval Dose Pack
9 erhielt sechs Monate vorher Kenalog Shot
10 erhielt eine Woche lang Prednison
11 erhielt drei Jahre hinweg systemische Steroid-Behandlung
12 stellte nach dem Beginn der Anti-Pilz-Spülung die Einnahme von Theophyllin und Ty lad ein

Beispiel 3 – Behandlung und Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis bei Patienten ohne vorangegangene Nasenchirurgie
Die folgenden drei Patienten mit durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis hatten keine vorangegangene Nasenchirurgie.
Bei einem 61 Jahre alten Mann wurde durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis diagnostiziert, und er wurde angewiesen, zwei Mal täglich Amphotericin B-Spülungen durchzuführen. Vor dem Beginn der Behandlung zeigte eine endoskopische Bewertung, dass Polypen ihre Nasenhöhle erfüllten (endoskopische Werte 3) und der Patient gab sich eine symptomatische Bewertung von –1. Nach Verwendung der Amphotericin B-Spülungen über 14 Monate hinweg zeigt die endoskopische Bewertung keinen Hinweis auf Krankheit (endoskopische Werte 0) und der Patient gab sich eine symptomatische Bewertung von +2.
Bei einer 64 Jahre alten Frau wurde durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis diagnostiziert, und sie wurde angewiesen, zwei Mal täglich Amphotericin B-Spülungen durchzuführen, was später auf vier Mal täglich erhöht wurde. Vor Beginn der Behandlung zeigte endoskopische Evaluation polypoide Veränderung (endoskopische Stufe 1) und der Patient gab sich eine symptomatische Bewertung von –1. Nach Verwendung der Amphotericin B-Spülungen über 16 Monate hinweg zeigte die endoskopische Bewertung keine Hinweise auf Krankheit (endoskopische Stufe 0) und der Patient gab sich selbst eine Symptombewertung von +2.
Bei einem 54 Jahre alten Mann wurde durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis diagnostiziert, er wurde angewiesen, zwei Mal täglich Amphotericin B-Spülungen durchzuführen. Der Patient hatte alle drei bis acht Monate intramuskuläre Steroid-Injektionen erhalten, wobei die letzte Injektion etwa sieben Monate vor Beginn der Amphotericin B-Spülungen verabreicht worden war. Vor dem Beginn der Anti-Pilz-Behandlung zeigte die endoskopische Evaluation keine Hinweise auf Krankheit (endoskopische Stufe 0), aber der Patient gab sich selbst eine symptomatische Bewertung von –1. Nach Verwendung der Amphotericin B-Spülungen über vier Monate hinweg zeigte die endoskopische Bewertung erneut keine Hinweise auf Krankheiten (endoskopische Stufe 0), jedoch gab der Patient sich selbst eine symptomatische Bewertung von +1.
Beispiel 4 – Nachlassende Eosinophilie bei Anti-Pilz-Behandlung
Bei einer 67jährigen Frau wurde eine durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis diagnostiziert, und sie wurde angewiesen, zwei Mal täglich Amphotericin B-Spülungen durchzuführen. Nach neunmonatiger Amphotericin B-Spülung durchlief die Patientin einen chirurgischen Eingriff an den Nasennebenhöhlen zur weiteren Verbesserung. Während des chirurgischen Eingriffs wurden Schleimbiopsien entnommen, und die Eosinophilenanzahl wurde verglichen mit derjenigen, die aus Biopsien erhalten wurde, die von der Patientin während eines chirurgischen Eingriffs vor der Anti-Pilz-Behandlung gewonnen worden war.
Nach der Anti-Pilz-Behandlung war die Eosinophilenanzahl in allen Schleimbiopsien aus allen Höhlen mit der Ausnahme der frontalen verringert (< 5 %). Die Eosinophilenzahl in der Frontalsinusbiopsie war 10 %. Weiterhin schien allergischer Schleim im Frontalsinus vorzuliegen, wahrscheinlich weil die Amphotericin B-Spülungen infolge der Obstruktion der Frontalhöhle die Frontalhöhle nicht erreichten. Somit war die zuvor beobachtete Hypereosinophilie in allen behandelten Höhlengebieten auf den Normalwert abgesunken.
Beispiel 5 – Itraconazol-Formulierungen
Itraconazol-Formulierungen wurden hergestellt, indem man Itraconazol in Polyethylenglycol (PEG) löste, um eine Itraconazol-Stammlösung zu bilden. Itraconazol wurde aus 100 mg Itraconazolkapseln (Janssen Pharmaceutica, Inc.) erhalten. Typischerweise wurde PEG 400 verwendet, um das Itraconazol zu lösen. Nach der Lösung wurde die Stammlösung filtriert, um alles unlösliche Material zu entfernen. Dann wurde die Stammlösung zur Anwendung durch Verdünnung mit sterilem Wasser vorbereitet.
Spezifisch wurden 20 Kapseln mit 100 mg Itraconazol geöffnet, und die itraconazolhaltigen Kugeln wurden in einen Messzylinder gefüllt. Ein Liter an erhitztem (70°C) PEG-400 wurde dem Messzylinder, der das Itraconazol enthielt, zugesetzt. Das Gemisch wurde dann auf einem Heizrührer gestellt und 30 Minuten lang bei 70°C gehalten. Nach 30 Minuten filtrierte man die heiße Lösung durch einen Urinsteinfilter in einen Glasbehälter und ließ sie auf Raumtemperatur abkühlen. Nach der Abkühlung wurden 100 ml der filtrierten Lösung in eine leere Kunststoffflasche gefüllt. Dann wurden 900 ml an sterilem Wasser zugesetzt, und die Lösung wurde gemischt. Nach dem Mischen wurde ein Tropfen Aromastoff zugesetzt (Pfefferminzöl). Dieses Verfahren ergab typischerweise eine Lösung mit etwa 98,8 bis etwa 111 μg Itraconazol pro ml.

Die folgenden itraconazolkonzentrationen wurden für jede bezeichnete Lösung durch HPLC bestimmt (Tabelle III). TABELLE III. Itraconazolkonzentrationen in Lösung

Lösung	Lösliche Itraconazolkonzentration (μg/ml)
2000 mg Itraconazol aus Kapseln in 1 l PEG-400 (Stammlösung)	1839
100 ml Stammlösung verdünnt mit 900 ml sterilem Wasser	113
500 mg Itraconazolpulver „AS" in 250 ml PEG-400 (Stammlösung)	1951
100 ml Stammlösung verdünnt mit 900 ml sterilem Wasser	85
2000 mg Itraconazol aus Kapseln in 1 l PEG-400 (Stammlösung)
100 ml Stammlösung plus 150 ml PEG-400 verdünnt mit 750 ml sterilem Wasser	179
2000 mg Itraconazol aus Kapseln in 1 l PEG-400 (Stammlösung)
100 ml Stammlösung plus 25 ml PEG-400 verdünnt mit 875 ml sterilem Wasser	155

Eine ein Steroid enthaltende Itraconazol-Formulierung wurde ebenfalls hergestellt. Spezifisch wurde der Gehalt zweier PULMICORT 200 μg Inhalatoren (etwa 91 μg Budesonid insgesamt) zu einer Itraconazol-PEG-400-Stammlösung bei 70°C über einen Zeitraum von etwa 15 Minuten hinweg zugesetzt. Das Budesonid wurde etwa 5 Minuten, nachdem das Itraconazolpulver in PEG-400 gelöst war, zugesetzt. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur trat eine gewisse Ausfällung ein. Das unlösliche Material wurde durch Filtration der Lösung durch feinmaschiges Filterpapier unter Vakuum entfernt. Der Filter wurde getrocknet, und das zurückgehaltene Präzipitat wurde gemessen (36–40 μg). Somit verblieben etwa 54 bis 50 μg Steroid in der Lösung/Feinsuspension zurück.
Beispiel 6 – Behandlung und Vorbeugung von durch nichtinvasive Pilze ausgelöste Rhinosinusitis unter Verwendung von Itraconazol
Drei Patienten mit durch nichtinvasive Pilze ausgelöster Rhinosinusitis (33 Jahre alt männlich, 70 Jahre alt männlich und 57 Jahre alt weiblich) wurden angewiesen, Nasenspülungen mit Itraconazol-Lösung vorzunehmen. Die Itraconazol-Lösung enthielt etwa 100 mg Itraconazol pro Liter Lösung (10 % PEG-400 in sterilem Wasser) und wurde wie hier beschrieben hergestellt. Zwei Patienten wurden angewiesen, Itraconazol-Spülungen durchzuführen, weil sie auf Amphotericin B-Spülungen nicht ansprachen. Jeder Patient beschrieb eine deutliche Verbesserung der Symptome innerhalb von zwei Wochen nach Beginn der Itraconazol-Spülungen (Symptombewertung: –1 auf +2 und –1 auf +1). 16 Tage nach Beginn der Itraconazol-Spülungen zeigte einer der beiden Patienten Verbesserungen, wie gezeigt durch endoskopische Analyse (endoskopischer Grad: von 1 auf 0 für die rechte Seite und von 1 auf 1 für die linke Seite). Darüber hinaus erklärte die Patientin, dass ihre Asthmasymptome sich dramatisch verbessert hatten und sie ihre Asthmabehandlung (Flovent and Servent) von zwei Mal täglich auf ein Mal täglich verringerte.
Der dritte Patient wurde wegen einer lokalen Nebenreaktion auf Amphotericin B (brennende Empfindung) angewiesen, Itraconazol-Spülungen vorzunehmen. Nach der Itraconazolbehandlung berichtete der Patient eine symptomatische Verbesserung (Symptomskala: von –1 auf 0). Weiterhin zeigte der Patient keine lokalen Nebenwirkungen oder Probleme mit den Itraconazol-Spülungen.
ANDERE AUSFÜHRUNGSFORMEN
Obgleich die Erfindung in Bezug auf die ihre detaillierten Ausführungen beschrieben wurde, ist die vorstehende Beschreibung natürlich illustrativ sein und beschränkt den Umfang der Erfindung nicht, welcher durch den Umfang der beigefügten Ansprüche definiert wird. Weitere Aspekte, Vorteile und Modifikationen fallen in den Rahmen der folgenden Ansprüche.

Claims

Verwendung eines Antimykotikums zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung oder Prophylaxe von durch nichtinvasive Pilze hervorgerufener Rhinosinusitis.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei man das Arzneimittel in wenigstens einem Teil der Nasen-Nasenneben-Anatomie eines Säugers in einer Menge, einer Frequenz und über eine Dauer Schleimhaut-appliziert, die zur Verminderung, Heilung oder Vorbeugung der durch nichtinvasive Pilze hervorgerufenen Rhinosinusitis wirksam ist.
Verwendung nach Anspruch 2, wobei die Schleimhautapplikation eine direkte Schleimhautapplikation ist.
Verwendung nach Anspruch 3, wobei man bei der direkten Schleimhautapplikation die Nasen-Nasenneben-Anatomie mit einer flüssigen Form des Arzneimittels benetzt.
Verwendung nach Anspruch 3, wobei man bei der direkten Schleimhautapplikation eine Aerosolform des Arzneimittels auf die Nasen-Nasenneben-Anatomie aufbringt.
Verwendung nach Anspruch 3, wobei man bei der direkten Schleimhautapplikation eine Pulverform des Arzneimittels auf die Nasen-Nasenneben-Anatomie aufbringt.
Verwendung nach Anspruch 2, wobei die wirksame Menge etwa 0,01 ml bis etwa 1 l des Arzneimittels pro Nasenloch des Säugers umfasst.
Verwendung nach Anspruch 2, wobei die wirksame Menge des Arzneimittels während der Dauer der Einwirkung konstant bleibt.
Verwendung nach Anspruch 2, wobei die wirksame Häufigkeit der Schleimhautapplikation etwa viermal täglich bis etwa einmal wöchentlich beträgt.
Verwendung nach Anspruch 2, wobei die wirksame Dauer mehr als etwa 7 Tage beträgt.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei die durch nichtinvasive Pilze hervorgerufene Rhinosinusitis durch Polypbildung oder polypenähnliche Veränderung gekennzeichnet ist.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei die durch nichtinvasive Pilze hervorgerufene Rhinosinusitis chronisch ist.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Arzneimittel in fester, flüssiger oder Aerosolform vorliegt.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Arzneimittel in einer Form vorliegt, die unter einem Pulver, einer kristallinen Substanz, einem Gel, einer Paste, Salbe, Wundsalbe, Creme, Lösung, Suspension, teilweisen Flüssigkeit, einem Spray, Nebel, Sprühnebel, zerstäubten Dampf, Aerosol und einer Tinktur ausgewählt ist.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Antimykotikum ein Macrolid umfasst.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Antimykotikum ein Azol umfasst.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Antimykotikum ein Antimykotikum umfasst, das ausgewählt ist unter Amphotericin B, Ketoconazol, Itraconazol, Saperconazol, Voriconazol, Flucytosin, Miconazol, Fluconazol, Griseofulvin, Clotrimazol, Econazol, Terconazol, Butoconazol, Oxiconazol, Sulconazol, Ciclopiroxolamin, Haloprogin, Tolnaftat, Naftifin, Terbinafinhydrochlorid, Morpholinen, Nystatin, Natamycin, Butenafin, Undecylensäure, Whitfield-Salbe, Propionsäure und Caprylsäure.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Arzneimittel einen pharmazeutisch verträglichen wässrigen Träger umfasst.
Verwendung nach Anspruch 18, wobei das Arzneimittel etwa 1 ng bis etwa 500 mg des Antimykotikums pro Liter umfasst.
Verwendung nach Anspruch 18, wobei das Arzneimittel etwa 100 mg des Antimykotikums pro Liter umfasst.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Arzneimittel etwa 0,01 ng bis etwa 1000 mg des Antimykotikums pro Liter umfasst.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Arzneimittel mehrere Antimykotika umfasst.
Verwendung nach Anspruch 1, wobei das Arzneimittel eine Verbindung umfasst, die unter pharmazeutisch verträglichen wässrigen Trägern, pharmazeutisch verträglichen festen Trägern, Mucolytika, antibakteriellen Mitteln, Entzündungshemmern, immunsupprimierenden Mitteln, Dilatatoren, Vasoconstriktoren, Steroiden und Wirkstoffen ausgewählt ist.