WO1988008280A1 - Procede de fecondation intra-uterine de mammifere et dispositif pour sa mise en oeuvre - Google Patents
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Abstract
Le procédé de fécondation comporte les étapes suivantes: a) on prévoit un conteneur (15) apte à permettre son introduction et son logement dans la cavité utérine du mammifère; b) on remplit ce conteneur (15) avec un milieu de culture au moins un ovocyte du mammifère et des spermatozoïdes; c) on insère ce conteneur (15) rempli dans la cavité utérine; d) on laisse pendant une durée déterminée pour obtenir la fécondation du ou des ovocytes dans le conteneur (15); e) on permet l'échappement du contenu du conteneur (15) dans la cavité utérine. Le conteneur peut être fabriqué à l'aide d'un tube en un matériau biodégradable ou non-biodégradable. Dans ce dernier cas il est associé à un dispositif de maintien. Un conteneur (15) biodégradable rempli de gamètes et de milieu de culture, est disposé dans la cavité utérine par un dispositif d'implantation (20) qui est ensuite aussitôt retiré des voies génitales du mammifère.
Description
"Procédé de fécondation intra-utérine de mammifère et. dispositif pour sa mise en oeuvre"
La présente invention concerne un procédé de fécondation de mammifère et un dispositif pour sa mise oeuvre.
Le demandeur a déjà décrit un procédé de fécondation humaine faisant appel à un conteneur dans l demandes de brevet FR-85 16558 et PCT/FR 86 00378.
Dans ce procédé le prélèvement des ovocytes d'u patiente est effectué d'une manière classique le plus souvent sous contrôle échographique. La patiente subit préalable une stimulation ovarienne par du Clomid-HMG o par des agonistes de la LH-RH tels la busèréline et le DTR-P-6.
Les liquides folliculaires sont, aspirés à la seringue et immédiatement examinés au Laboratoire.
On place ensuite jusqu'à 8 de ces ovocytes dans u conteneur constitué par un tube ouvert à l'une de ses extrémités et rempli jusqu'à ras bord d'un milieu de culture, par exemple milieu B2 de MENEZZO, contenant 10 000 à 20 000 spermatozoïdes humains mobiles par millilitre. Puis on ferme hermétiquement le tube, sans interposition d'air, c'est-à-dire sans couche d'air au-dessus de la phase liquide. Le tube fermé est ensuite replacé dans la cavité vaginale de la patiente pendant 44 à 50 heures. Le tube, est ensuite récupéré, ouvert et. les ovocytes sont examin au Laboratoire.
Les ovocytes fécondés, ayant, subi les premiers clivages sont des embryons dans leurs premiers stades d développement.
Ces embryons jusqu'au nombre de 4, sont alors replacés dans la cavité utérine de. la patiente, à l'aid d'un cathéter de Frydman. Cette technique dénommée CIVETE (Culture intra
vaginale et transplantation embryonnaire) a permis de constater que les taux de clivage, de transfert et de naissance par ponction étaient au moin égaux à ceux obtenus en FIVETE (Fécondation in vitro et. transplantatio embryonnaire) .
Dans la CIVETE jusqu'à 8 ovocytes sont placés dans un conteneur contenant un volume de 3,2 ml de liquide constitué par du milieu B2 contenan de 10 000 à 20 000 spermatozoïdes mobiles par millilitre. Ainsi le volume moyen de liquide par ovocyte est de 400 microlitres contenant de 4 000 à 8 000 spermatozoïdes mobiles.
La CIVETE bien que présentant de nombreux avantages par rapport à la FIVETE, car ne nécessitant pas de couveuse avec une atmosphère d'air enrichi de C0„ , présente cependant encore des inconvénients . Les étapes d manipulation des gamètes mâles et femelles sont encore nombreuses et la technique nécessite en particulier un replacement du ou des embryons dans 1 'utérus . Ces nombreuses manipulations sont des causes de toxicité ou même de perte d'embryons.
Afin de remédier aux inconvénients sommairement, évoqués ci-dessus le Demandeur propose un procédé de fécondation de mammifère caractérisé en ce qu'il comporte les étapes suivantes : a) on prévoit un conteneur apte à permettre son introduction et son logement dans la cavité utérine du mammifère ; b) on remplit, ce conteneur avec un milieu de culturer au moins un ovocyte du mammifère, et des spermatozoïdes ; c) on insère ce conteneur rempli dans la cavité utérine ; d) on laisse pendan une durée déterminée pour obtenir la fécondation du ou des ovocytes dans le conteneur ; e) on permet l'échappement du contenu du conteneur dans la cavité utérine .
Ce procédé évite en particulier l'étape finale transfert embryonnaire de l'extérieur du mammifère à l'intérieur de sa cavité utérine.
Selon un aspect préféré du procédé suivant l'invention on s'arrange pour que l'échappement soit fa par éjection du contenu du conteneur dans le fond de. l cavité utérine de façon à augmenter les chances de nidation des ovocytes fécondes ou embryons .
De même dans le cas d'un conteneur en matériau biodégradable on préfère l'insérer vers le fond de l'utérus pour les mêmes raisons que ci-dessus.
Cependant ce procédé nécessite un conteneur d'u taille appropriée à son introduction et. son logement dan la cavité utérine du mammifère. Cette taille doit être notablement plus faible que celle d'un conteneur destiné la FIVETE car, en particulier chez la femme, le col de 1 ' utérus ne peut présenter qu ' une ouverture de 1 ' ordre d quelques millimètres.
Pour arriver au procédé proposé ci-dessus le Demandeur a entrepris dès décembre 1986 par des études préalables, de mettre en oeuvre un procédé comportant le étapes suivantes :
1° on prévoit une paillette fine d'une contenanc d'environ 250 microlitres ; 2° on remplit cette paillette avec un milieu de culture, au moins un ovocyte humain et des spermatozoïde mobiles humains;
3° on bouche cette paillette à au moins une de se extrémités l'autre baignant dans un récipient contenant milieu de culture ;
4° on place cette paillette remplie et son récipient dans une étuve à 37° pendant 20 à 30 heures ;
5° on recueille les embryons qui sont replacés e culture dans du milieu de culture à 1 ' étuve à 37° -jusqu' lendemain ;
6° on replace un ou plusieurs embryons dans la cavité utérine de la patiente à l'aide d'un cathéter de
Frydman.
Le(s) embryon(s) sont replacés 44 à 50 heures apr avoir rempli la paillette du mélange milieu de culture, ovocyte(s), spermatozoïdes. Ces études préalables ont. montrées que dans des essais portant sur 57 ovocytes, 33 étaient fécondés pou donner des embryons à replacer, (soit, un taux de clivage d'environ 58 % ) r tandis que 88 ovocytes prélevés d'une manière concomittante aux prélèvements des 57 ovocytes conduisaient par la fécondation in vitro (FIV) ou par l culture intra vaginale (CIV) à 44 embryons à replacer so un taux de clivage de 50%. Deux grossesses peuvent être attribuées avec certitude au replacement d'ovocytes fécondés en paillette fine. Ces études préalables ont montré que l'on pouvai féconder dans une telle, paillette jusqu'à 4 ovocytes humains. Il a été ainsi trouvé que cette fécondation "en paillettes fines nécessitait seulement, un volume moyen d milieu de culture par ovocyte d'environ 60 microlitres contenant de 600 à 1200 spermatozoïdes mobiles. Le milie de culture choisi dans ces études a été du B2 de Menezzo La présente invention propose également pour la mise en oeuvre du procédé de fécondation intra-utérine suivant l'invention un conteneur qui se caractérise en c qu'il a une taille déterminée apte à permettre son introduction et son logement dans la cavité utérine d'u mammifère et apte également à recevoir un milieu de culture, au moins un ovocyte et des spermatozoïdes et qu'il comporte des moyens pour définir une zone de sorti pour au moins un ovocyte fécondé à un emplacement, dans cavité utérine, éloigné du col de l'utérus.
Selon un aspect de 1 ' invention le conteneur est entièrement en un matériau biodégradable. Cela à l'avantage de pouvoir introduire dans la cavité utérine conteneur rempli de gamètes et de milieu de culture san intervention supplémentaire, pour obtenir une nidation d ou des embryons .
Selon un autre aspect de l'invention le contene non-biodégradable est associé à un dispositif de mainti apte à être fixé d'une manière amovible au col de l'uté du mammifère. Cela évite que le conteneur non biodégradable s perde dans la cavité utérine et de plus permet de bie positionner la zone de sortie du conteneur vers le fond l'utérus pour augmenter les chances .d ' une nidation.
Selon encore un autre aspect de l'invention le conteneur est constitué par un tube fermé à une de se extrémités dite inférieure par un bouchon formant, pist étanche, ce tube étant solidarisé, vers son -extrémité inférieure au dispositif de maintien à la faveur d'un alésage longitudinal traversant de celui-ci.
Ces caractéristiques permettent d'éjecter le contenu du conteneur au moment choisi par l'opérateur e agissant- comme cela sera décrit par la suite, sur le bouchon formant piston.
Comme le. dispositif de maintien dépasse de l'utérus, ce bouchon est facilement accessible par la vo naturelle .
La présente invention sera mieux comprise à l'aid de la description qui va suivre en référence aux dessin annexés où : les figures 1 a, b, c, d, e, f, montrent une vue schématique agrandie d'une première forme de réalisatio d'un conteneur selon l'invention formé à partir d'un tub d'un matériau biodégradable et l'insertion de ce contene rempli dans la cavité utérine d'une patiente. les figures 2a, b, c, montrent une seconde forme réalisation d'un conteneur selon l'invention formé à partir d'une feuille mince d'un matériau biodégradable ; la figure 3 montre d'une manière schématique une vue en coupe longitudinale, d'une troisième forme de réalisation d'un conteneur associé à un dispositif de maintien au col de l'utérus du mammifère ; la figure 4 montre une vue- en coupe longitudinal
d'une variante de réalisation du conteneur associé au dispositif de * maintien de la figure 3, avec un bouchon biodégradable - la figure 5 montre une vue en coupe longitudinal d'une autre forme de réalisation d'un conteneur associé un dispositif de maintien au col de l'utérus du mammifèr la figure 6 montre une variante de réalisation d conteneur et de son dispositif de maintien associé de l figure 5 . la figure 7 montre d'une manière schématique le conteneur et son dispositif de maintien de la figure 3, conteneur étant logé dans l'utérus et. maintenu en place par le dispositif de maintien fixé au col de 1 ' utérus . la figure 8 montre d'une manière schématique 1' étape du procédé suivant 1 'invention ou le conteneur d la figure 3 est vidé de son contenu dans la cavité utérine.
La figure 1a montre, agrandi, un tube cylindriqu 10 d'une longueur plus petite que la profondeur utérine Ce tube a été obtenu par extrusion et il possède une par 100 d'épaisseur constante.
Le matériau qui le constitue est un polymère du règne animal ou végétal, en particulier un polymère hydrophile par exemple du collagène, du fibrinogène ou u sucre polymère.
La figure 1b montre un tube 11 fermé à son extrémité inférieure 12 par une ligature d'un fil 13 et obtenu à partir du tube ouvert 10. Ce fil 13 est de préférence biodégradable et même résorbable par l'organisme d'un mammifère. De tels fils sont employés e chirurgie comme suture résorbable. La ligature confère l qualité de conteneur 15 au tube 11, son extrémité inférieure 12 ayant une forme en extrémité de saucisse, fermeture du tube 10 à ses extrémités inférieure et supérieure peut être aussi réalisée par soudure, ou par collage à l'aide d'une colle biodégradable ou encore pa simple pression. La zone de sortie est définie ici par
paroi 100 en un matériau biodégradable, en un temps déterminé, par le contenu prévu (milieu de culture, spermatozoïdes, ovocyte(s) et son environnement prévu intra-utérin. Le conteneur 15 est ici entièrement en u matériau biodégradable en un temps déterminé
Le tube 11 a été glissé à l'intérieur d'une éprouvette à pied 14 ayant un diamètre intérieure sensiblement égal au diamètre extérieur du tube 11 et q lui sert de support.
Cette éprouvette à pied peut être en un matéria connu pour ses propriétés de faible frottement comme l téflon ou du polyéthylène, et est d'une hauteur légèrem inférieure à la longueur du tube fermé 11.
Ici figure 1c montre avec arrachement le conteneu 15 rempli à ras bord par un milieu de culture, ici du milieu B2 de Ménézzo, et contenant un ovocyte 16, et de spermatozoïdes 17. L' éprouvette 14 permet de contrebalancer la pression hydrostatique du liquide remplissant le conteneur 15 et ainsi d'éviter une ruptur prématurée de la paroi si mince soit t'elle Ce conteneu rempli et fermé seulement à une de ses extrémités 12 peu également être laissé ainsi l'autre extrémité restant ouverte pour une insertion dans la cavité utérine dans mesure ou son contenu ne se vide pas spontanément lorsqu le tube est retourné son extrémité ouverte dirigée vers bas
Le remplissage du conteneur peut se faire d'une manière classique à l'aide d'une seringue dont le diamèt intérieur de l'aiguille est supérieur à celui de 1 ' ovocyte
Le remplissage du tube 10 pour aboutir au tube rempli de la figure 1c peut se faire également par aspiration de la manière suivante
Le tube 10 ouvert à ses deux extrémités est engag à l'intérieur d'un cylindre support creux allongé ayant diamètre intérieur égal à celui de 1 ' éprouvette 14 de l figure 1b, mais ouvert à ses deux extrémités de façon a
que le tube 10 dépasse en longueur les deux extrémités du cylindre creux. Un embout d'aspiration est alors fixé sur le haut du cylindre d'une manière étanche de façon à ne pas provoquer un pliage de 1 ' extrémité, supérieure du tub 10. L'extrémité inférieure du tube 10 et celle du cylindr support sont alors plongées dans un milieu de culture B2 contenant des spermatozoïdes et. un ou plusieurs ovocytes . On aspire ces gamètes et le milieu de. culture de manière remplir le tube 10 ouvert à ses deux extrémités. On sort les extrémités inférieures du liquide et on ferme celle inférieure du tube 10 par ligature, collage ou soudage avant d'enlever l'embout d'aspiration du haut du cylindre support. On obtient ainsi un tube rempli, analogue à cel représenté à la figure 1c sauf que 1 ' éprouvette 14 a été remplacée par un cylindre creux ouvert à ses deux extrémités .
La figure. 1d montre une vue avec arrachement, du conteneur 15 de la figure, précédente fermé vers son extrémité supérieure 18 par une ligature, à l'aide d'un même fil résorbable 13. Cette façon d'opérer permet d-' enfermer dans le conteneur 15 fermé à ses deux extrémités 12, 18 un liquide sans interposition d'air, s cela est désiré.
En effet pendant le déroulement de la ligature 18, une. partie du liquide excédentaire reste dans la partie tronconique 19 du tube 10 situé au dessus de la ligatur supérieure.
L'épaisseur de la paroi 100 du tube 10 en matéria biodégradable joue un rôle essentiel. En effet cette par dans le procédé suivant l'invention doit être, apte à se désagréger au bout, d'un certain temps après introductio du conteneur saucisse 15 de la figure 1d à l'intérieur d la cavité utérine du mammifère, afin de laisser s'échapp spontanément son contenu dans la 'cavité utérine après un durée déterminée e donc de pouvoir permettre la nidati du ou des embryons . Cet échappement peut, être facilité p la présence d'une extrémité du tube 11 restée ouverte da
le cas où une seule des extrémités du tube 10 a été fermée.
Le matériau du conteneur doit être résorbable e non immunogène . Ici le conteneur a une paroi d'épaisse unique, mais il est également possible de prévoir un conteneur biodégradable à parois d'épaisseur différente.
L'utérus d'un mammifère procure à la cavité utér une ambiance chaude et humide, mais sans grande activi enzymatique susceptible de provoquer la dégradation d matériau biodégradable.
Par contre les spermatozoïdes mobiles de mammifèr possèdent une très forte activité enzymatique susceptibl de produire une attaque interne de la paroi 100 du conteneur 15 allant jusqu'à sa dégradation et donc son ouverture.
Pour déterminer l'épaisseur de la paroi adéquate pour avoir un échappement du contenu après la durée déterminée qui par exemple pourra être de 15 à 55 heure on réalise l'essai suivant m vitro: On produit un conteneur ayant une épaisseur de paroi égale à E et rempli selon la figure 1d d'un milie de culture contenant de 10 000 à 20 000 spermatozoïdes p millilitre, mais sans ovocyte.
Ce conteneur ainsi rempli est disposé dans une étuve saturée de vapeur d'eau à une température sensiblement égale à celle interne du mammifère. On observe régulièrement 1 ' état du conteneur et on note le moment où le contenu s'échappe spontanément du conteneur Si le temps nécessaire pour observer cet échappement es supérieure à 55 heures on produit un autre conteneur don la paroi à une épaisseur inférieure à E soit par exemple 0,5 E et on soumet ce conteneur au test m vitro ci-dessus et ainsi de suite par itération jusqu'à obteni une paroi 100 ayant l'épaisseur déterminée conduisant à durée déterminée voulue, par exemple de 15 à 55 heures vitro .
L'épaisseur de le paroi 100 du tube 10, 11 e;.
matériau biodégradable peut être comprise entre 0,01 et. 1 mm.
Des essais ont. montré qu'un milieu de culture B2 Menezzo contenant de 10 000 à 20 000 spermatozoïdes par millilitre dégradait dans cet essai in vitro en plus de heures une paroi de collagène tané d'une épaisseur de 0,1 mm et en 15 minutes une paroi de gélose, d'une épaisseur de 0,1 mm servant de matériau constitutif d'un capsule gastro-résistante. La figure 1e montre le conteneur 15 rempli selon figure 1d et qui a été séparé de son éprouvette 14 de soutien avant d'être introduit dans un .dispositif d'implantation 20 comprenant un tuyau cylindrique 21 don le diamètre intérieur est sensiblement égal à celui de 1' éprouvette 14. La longueur du tuyau cylindrique 21 es supérieure à celle du conteneur 15 et peut être par exemple voisine ou supérieure à la profondeur de la cavi utérine du mammifère.
Ce tuyau cylindrique 21 comporte à son extrémité inférieure un bord arrondi 22 qui réduit légèrement- le diamètre de son orifice afin d'éviter le glissemen spontané du conteneur 15 en le retenant légèrement. Le. tuyau 21 comporte vers son extrémité supérieure un filetage 23 extérieur au tuyau sur lequel vient se visse l'embout 24 d'un tuyau cylindrique 25 muni à l'intérieu d'un piston 26 coulissant à frottement, doux et. solidaris à la tige 27. Le diamètre, intérieur de ce cylindre. 25 es égal à celui du diamètre intérieur du tuyau 21 afin de permettre la continuité du coulissement du piston 26 dan le tuyau cylindrique 21.
La figure 1f montre une. vue schématique de l'introduction et le logement du conteneur 15 dans la cavité utérine d'un mammifère par pénétration du tuyau 2 dans la cavité utérine en franchissant le col de l'utéru Le tuyau 21 est introduit dans la cavité utérine façon à laisser suffisamment, de profondeur disponible po le logement du conteneur rempli 15, puis le piston 26 es
poussé grâce à la tige 27 qui dépasse du corps du mammifère comme d'ailleurs le tuyau cylindrique 25, po déposer à l'intérieur de la cavité utérine vers le fond l'utérus le conteneur 15. Ensuite le dispositif d'implantation 20 est retiré de l'utérus et. du vagin d mammifère et l'échappement du contenu du conteneur 15 rempli s'effectue après un délai déterminé par la biodégradation d'au moins une partie du conteneur.
Les figures 2 a, b, c montrent la réalisation d' autre conteneur en un matériau biodégradable.
La figure 2a montre la constitution d'un tube cre 110 allongé à partir d'une bande de faible épaisseur d' matériau biodégradable. Cette bande peut par exemple êtr roulée sur un cylindre plein de mise en forme (non représenté) et les bords 40 et 41 peuvent se dépasser légèrement pour assurer une zone de contact 42 commune d collage à l'aide d'une colle biodégradable ou de soudag par serrage ou de soudage à chaud.
Ce tube possède une paroi 100 de faible épaisseur la zone commune 42 étant, plus épaisse.
Ce tube 110 peut, comme le tube 10 précédent, êtr rempli par aspiration d'un milieu de culture contenant d spermatozoïdes et au moins un ovocyte.
La figure 2b montre que 1 ' extrémité inférieure d tube 110 précédent a été fermée par serrage ou collage pour constituer un conteneur 115 qui peut être disposé dans un support 114 évasé vers le bas et dépourvu de fon
La hauteur du support 114 est légèrement inférieu à la longueur du conteneur 115. Le support est par ailleurs séparable en deux demi-coques 114A de façon à pouvoir libérer le conteneu 115 qu'il soutient.
La figure 2c montre le conteneur 115 rempli, ferm également par serrage ou collage à son extrémité supérieure 18 et apte à être inséré dans la cavité utéri du mammifère à l'aide du dispositif d'implantation analogue au dispositif d'implantation 20.
La figure 3 montre un conteneur 215 associé à un dispositif de maintien 220 apte à être fixé, d'une manière. amovible au col de l'utérus du mammifère. Ce. conteneur es constitué par une paillette ou tube 201 réalisé dans un matériau synthétique non biodégradable par les spermatozoïdes, par exemple en polyéthylène ou polypropylène non toxique pour les spermatozoïdes et les ovocytes ni d'ailleurs pour le mammifère.
Le tube est souple et non cassant pour pouvoir se déformer lors du passage difficile du col de l'utérus et s 'adapter à la forme interne de la cavité utérine du mammifère. Ce tube 201 a une extrémité dite supérieure 20 ouverte pouvant être éventuellement fermée par un petit bouchon (non représenté) en matière biodégradable par exemple* collagène, fibrinogène, sucre polymère.
L'extrémité ouverte 202 présente un orifice rétréc 212 par rapport au diamètre intérieur du tube 201.
L'autre extrémité .dite inférieure 203 du tube est. fermée par un bouchon 204 apte à former un piston étanche à l'intérieur de la paillette 201.
La longueur du tube 201 est "du même ordre, que. la profondeur de la cavité utérine du mammifère.
Pour une patiente la longueur du tube 201 peut, êtr comprise entre 5 et. 7 cm et. le diamètre extérieur jusqu'à 3 mm, afin de pouvoir glisser le tube sans traumatisme dans la cavité utérine par le col de l'utérus.
Le tube. 201 est solidarisé sur une partie de sa longueur, vers son extrémité inférieure 203,- au dispositi de maintien 220 à la faveur d'un alésage longitudinal traversant 221 de celui-ci.
Le dispositif de maintien 220 comporte successivement, dans le sens longitudinal une première partie 222, apte à être, introduite dans le col de l'utér et une seconde partie 223 apte à être disposée dans le vagin à l'extérieur du col et. en butée contre celui-ci, l première partie, comportant un élément 222A extensible radialement ayant une position de repos pour l'insertio
dans le col et une deuxième position dans laquelle il s'appuie sur les parois internes du col de l'utérus.
L'élément extensible 222A est formé d'un matéria flexible a paroi mince et apte à s'étendre radialement dans la deuxième position.
L'élément extensible comporte au moins deux languettes 222B sensiblement longitudinales, chaque languette 222B ayant une extrémité inférieure 222C mobil et une extrémité supérieure 222D fixe longitudinale ent par rapport au tube 201.
Le dispositif de maintien 220 comporte en outre u partie mobile 223A pour contrôler la position longitudinale de l'extrémité inférieure 222C de l'élémen extensible 222A et une partie fixe 222E par rapport au tube 201 sur laquelle la partie mobile 223A est adaptée se déplacer.
D'une manière détaillée la partie fixe 222E comporte une extension longitudinale cylindrique 224 appartenant à ladite première partie 222 du dispositif d maintien 220, extension 224 qui comporte sur sa surface externe un pas de vis 207.
L'extension cylindrique 224 est d'un seul tenant avec un manchon cylindrique 205 de plus grand diamètre e leur réunion forme un epaulement 225 appartenant à la fa extérieure supérieure du manchon 205.
L'extension 224 et le manchon 205 sont traversés par un premier alésage 221 d'un diamètre légèrement inférieur à celui extérieur du tube 201 pour que celui-c puisse y être introduit à force et ensuite maintenu. Le manchon 205 comporte un second alésage 226 d'u diamètre supérieur à celui extérieur du tube 201, le premier alésage débouchant dans le second par un evideme 227 en tronc de cône de révolution.
Le second alésage 226 à une profondeur et un diamètre adaptés pour recevoir un dispositif poussoir ap à déplacer le bouchon 204 dans le tube 201.
La partie mobile 223A comporte une molette 208
formant écrou grâce à un pas de vis complémentaire 207A pas de vis 207.
Ainsi d'une manière générale, la partie fixe 222E la partie mobile 223A comportent des pas de vis complémentaires 207, 207A pour permettre à la partie mobile de tourner et de se déplacer longitudinalement pa rapport à la partie, fixe.
La figure 3 montre que la molette 208 à un diamèt suffisant pour qu'elle puisse être disposée en butée su le col de l'utérus. La molette en position basse sur le pas de vis complémentaire 207 arrive par une de ses face en contact avec l' epaulement 225. Sur l'autre face globalement circulaire de la molette repose un anneau 20 dit inférieur entourant 1 ' extension cylindrique 224. Le tube 201 comporte une bague soudée 211 qui arrive sensiblement en butée sur le haut de l'extension cylindrique 224.
Chaque languette 222B est. solidaire par son extrémité inférieure 222C à l'anneau inférieur 209 et pa son extrémité supérieure 222D à la bague soudée 211. Ain l'extrémité supérieure de l'élément extensible 222A est fixée à une bague 211 soudée au tube 201. Chaque, languet possède une très légère courbure définissant, une concavi qui est orientée vers l'extension cylindrique 224. . Ainsi tout rapprochement longitudinal de l'annea
209 et de la bague 211 augmente la courbure des languett 222B et leur extension radiale, et. ainsi la flèche de l courbure.
La figure 4 montre une variante de réalisation d tube 201 associé à un dispositif de maintien 320.
L'extrémité supérieure 222D de l'élément extensib 222A est attachée à l'extrémité supérieure de 1 ' extensio cylindrique 224 de la partie fixe 222E ce qui permet de supprimer la bague soudée de la réalisation précédente. L'alésage longitudinal traversant 321 du disposit de maintien 320 a un diamètre légèrement, supérieur à cel extérieur du tube 201 afin de permettre la solidarisatio
du tube à la partie fixe 222E par de la colle 300.
L'anneau inférieur 309 qui repose sur la molette 208 est d'une dimension légèrement inférieure à celle d l'anneau 209 de la figure précédente, mais reste toujour apte cependant à coulisser longitudinalement sur l'extension cylindrique 224.
Le tube 201 a l'orifice 212 de son extrémité supérieure 202 fermée par un bouchon 301 en une matière biodégradable identique à celle décrite ci-dessus Ce bouchon à une forme adaptée pour être facilement expuls lors de l 'éjection du contenu liquide du conteneur par l déplacement du bouchon 204 formant piston à l'intérieur tube, lorsque ce bouchon remonte vers l'extrémité 202 supérieure du tube 201. La figure 5 montre une autre forme de réalisatio d'un tube 201 et son dispositif de maintien 420
Le tube 201 comporte une bague soudée 211 à lui même et rattachée à l'extrémité supérieure 222D de chaqu languette 222B dont l'extrémité inférieure 222C est solidaire d'un anneau 409 coulissant en contact avec le tube 201.
En effet dans cette réalisation préférée, l'extension cylindrique des réalisations précédentes a é supprimée Ce dispositif de maintien 420 comporte un mancho
405 cylindrique de révolution comportan , partant de sa face circulaire supérieure 410, un alésage axial 421 de profondeur environ égale à la moitié de la hauteur longitudinale du manchon 405 Cet alésage 421 de longueur 1 à un diamètre voisi de celui extérieur du tube 201 et permet la solidarisati du manchon 405 au bout inférieur correspondant de lonque 1 du tube 201 par collage à l'aide d'une couche de colit 400 Cet lésage 421 débouche, par un évasement en tro de cône 227, dans un alésage longitudinal 226 qui débouc sur la face circulaire inférieure 42<s du manchon 40"
L'alésage 226 et le tronc de cône 227 qui le. prolonge so destinés comme dans les formes de réalisation précédente aux figures 3 et 4 à recevoir d'une manière amovible de embouts adaptés à transmettre une aspiration si le bouch 204 qui bouche l'extrémité inférieure 203 du tube 201 es triparti e (bouchon CASSOU des paillettes françaises) o pour recevoir un embout d'un dispositif poussoir à tige coulissante apte à déplacer le bouchon 204 formant, pisto à 1 ' intérieur et vers 1' extrémité supérieure. 202 du tub 201.
Le manchon 405 possède, en prolongement et. en alignement avec sa face inférieure 424 une couronne en saillie 430 destinée à faciliter sa préhension.
La face externe cylindrique du manchon 405 est munie sur toute sa hauteur d'un pas de vis 431 qui s'arrête vers le bas à l'epaulement 432 créé par la couronne 430.
Sur le manchon 405 vient se visser une douille 43 dont la surface cylindrique interne comporte un pas de v 436 complémentaire de. celui 431 du manchon 405.
Cette douille 435 a une profondeur longitudinale sensiblement, égale à la hauteur du manchon diminuée de. l hauteur de la couronne 430.
Le haut de. cette douille est. fermée par un disqu moleté 437 sur sa tranche et. d'un seul tenant, avec elle-même. Le diamètre du disque est supérieur au diamèt de. la douille pour faciliter la préhension du disque moleté. Ce disque 437 est. percé d'un passage axial cylindrique 438 dont le diamètre légèrement supérieur à celui extérieur du tube 201 permet, un contac glissant avec celui-ci. Pour faciliter un équilibrage, de la pression dans la cavité définie entre la face circulair 410 du manchon 405 et le fond de la douille déterminé pa le disque 437, il est prévu un trou 440 traversan la paroi cylindrique de la douille 435 au voisinage immédia de ce fond.
Ainsi dans cette forme de réalisation la partie
fixe 422E et la partie mobile 423A comporte des pas de complémentaires 431, 436, pour permettre à la partie mobile de tourner et de se déplacer longitudinalement pa rapport à la partie fixe. Les pas de vis 431, 436 sont respectivement sur surface externe cylindrique de la partie fixe 422E et su une surface cylindrique interne d'une douille 435 de la partie mobile 423A.
La figure 6 montre une variante de la réalisatio précédente où l'extrémité inférieure 203 du tube 201 comporte une collerette 450 épousant une partie de la surface conique de 1 ' évasement en tronc de cône reliant l'alésage 421A à l'alésage 226 pour embout.
Cette collerette a pour but d'augmenter la solidarisation du tube 201 avec le manchon 405 en s ' opposant à un déplacement, longitudinal du tube dans l sens alésage 226-alésage 421A. Ici le tube 201 est simplement serti dans l'alésage 421A.
Les figures 7 et 8 montrent le conteneur 215 mun de son dispositif de maintien 220 de la figure 3 qui maintient la position du conteneur au niveau du col de 1 'utérus .
Le procédé de fécondation à l'aide de l'appareil la figure 3 est décrit ci-après. L'homme de l'art pourr facilement transposer ce procédé, à l'utilisation des autres appareils tels que déjà décrits en référence aux figures 4,5 ou 6.
Si le bouchon 204 est un bouchon tripartite du genre de celui que l'on trouve dans les paillettes françaises de CASSOU on insère un embout d'une seringue d'aspiration dans l'alésage 226 du manchon 205 et on aspire, par l'extrémité supérieure 202 du tube 201 forma conteneur 215, le milieu de culture, le ou les ovocyte(s et les spermatozoïdes à l 'intérieur du tube 201. Si le bouchon n'est pas tripartite il est possibl d'introduire à l'aide d'une seringue munie d'une aiguill le même contenu à l'intérieur du tube 201.
Le tube rempli est ensuite éventuellement bouché a son extrémité supérieure 202 à l'aide d'un bouchon en matériau biodégradable (non représenté aux figures 7 et 8) . L'appareil constitué par le conteneur 215 et son dispositif de maintien 220 est introduit dans le vagin du mammifère.
L'extrémité 202 du tube 201 est introduite dans l'orifice du col de l'utérus et. le tout est. poussé jusqu' l'arrivée en butée de la molette 208 avec le col de 1'utérus.
Le manchon 205 est. alors maintenu immobile en rotation par une pince languette (non représentée) et. la molette 208 est éloignée de 1 ' epaulemen 225 en la vissa sur le pas de vis 207, ce qui a pour effet d'augmenter la flèche de la courbure, des deux languettes 222B qui appuient alors sur les parois internes du col de l'utérus fixant ainsi d'une manière amovible le dispositif de. maintien 220 du conteneur 215 au col de l'utérus. La figure 7 montre que de préférence on s'arrange par le choix de la longueur du tube 201 pour que son extrémité supérieure 202 soit, située à proximité du fond de l'utérus. Après avoir retiré la pince longuette le mammifère est laissé ainsi au repos pendant, un délai d 15 à 55 heures pour obtenir un ou plusieurs embryons dans le tube 201.
La figure 7 montre cette phase de repos . La figure 8 montre qu'après ce délai on éjecte l contenu du conteneur 215 dans le fond de. la cavité utéri après fécondation du ou des ovocytes en repoussant, le bouchon 204 vers l'extrémité supérieure 202 du tube 201 pour déverser le contenu du conteneur 215 directement e contact avec 1 ' endomêtre en vue d'une nidation du ou de embryons. Ce repoussement du bouchon est effectué à l'ai d'un dispositif poussoir 500 comportant une tige souple
501 mobile dans une gaine 502. L'embout 503 de la gaine
502 vient, s'adapter à frottement doux dans l'alésage 226.
La tige 501 a un diamètre inférieur à celui intérieur du tube 201 et une longueur adaptée par rappo à la longueur de la gaine 502, du bouchon 204 et du tu 201 pour que l'on ne puisse pas obtenir une sortie du bouchon 204 hors du tube 201 par l'extrémité 202.
L'orifice rétréci 212 constitue également une sécurit pour le maintien du bouchon à l'intérieur du tube.
La molette 208 est ensuite dévissée de façon à détendre les languettes 222B et à libérer le dispositif maintien 220. Tout l'appareillage est alors retiré des voies génitales du mammifère.
Les dispositifs de maintien ont été décrit en référence aux figures 3 à 6 avec deux languettes 222A. T est possible de prévoir trois languettes ou plus régulièrement disposées autour du tube 201.
Claims
REVENDICATIONS
1. Procédé de fécondation intra-utérine de mammifère caractérisé en ce qu'il comporte les étapes suivantes : a) on prévoit un conteneur (15, 115, 215) apte à permettre son introduction et. son logement, dans la cavité utérine du mammifère ; b) on remplit ce conteneur( 15 , 115, 215) avec un milieu de culture, au moins un ovocyte du mammifère et. de spermatozoïdes ; c) on insère ce conteneur (15, 115, 215)rempli dan la cavité utérine ; d) on laisse pendant une durée déterminée pour obtenir la fécondation du ou des ovocytes dans le conteneur ; e) on permet l'échappement du contenu du conteneu dans la cavité utérine. -
2. Procédé suivant, la revendication 1, caractérisé en ce qu'à l'étape e) l'échappement est fait par éjectio du contenu du conteneur (215) dans le fond de la cavité utérine.
3. Procédé suivant la revendication 1, caractéris en ce qu'à l'étape e.) l'échappement du contenu du conteneur (15, 115) est. effectuée par suite de la biodégradation d'au moins une partie du conteneur (15, 115) .
4. Procédé suivant la revendication 2, caractéris en ce qu'on maintient la position du conteneur au nivea du col de l'utérus lors des étapes c) à e) .
5. Procédé suivant la revendication 3, caractéris en ce qu'à l'étape c, on insère le conteneur (215) vers fond de l'utérus.
6. Conteneur (15, 115, 215) pour fécondation intra-utérine, caractérisé en ce qu'il a une taille déterminée apte à permettre son introduction et son logement dans la cavité utérine d'un mammifère et apte également à recevoir un milieu de culture, au moins ur.
ovocyte et des spermatozoïdes et qu'il comporte des moy pour définir une zone de sortie pour au moins un ovocy fécondé à un emplacement, dans la cavité utérine, éloig du col de l'utérus. 7. Conteneur suivant la revendication 6, caractérisé en ce qu'il a globalement, la forme d'un tu (10, 11, 110, 201) d'une longueur inférieure ou du mêm ordre que la profondeur de la cavité utérine.
8. Conteneur suivant la revendication 6 ou 7, 0 caractérisé en ce que la zone de sortie est définie pa une paroi (100) en un matériau biodégradable en un tem déterminé par son contenu et. son environnement intra-utérin.
9. Conteneur suivant, l'une quelconque des 5 revendications 6 à 8, caractérisé en ce que celui-ci e entièrement en un matériau biodégradable.
10. Conteneur suivant la revendication 9, caractérisé en ce qu'il est. fermé à l'une (12) de ses d extrémités . 0 11- Conteneur ' suivant la revendication 9, caractérisé en ce qu'il est fermé à deux extrémités (1 18) .
12. Conteneur suivant, l'une quelconque des revendication 6 à 1, caractérisé en ce que le matéria 5 biodégradable est. un polymère naturel du règne animal végétal.
13. Conteneur suivant la revendication 12, caractérisé, en ce. que le polymère naturel est choisi pa le collagène, le fibrinogène, et. un sucre polymère. Q 14. Conteneur suivant l'une quelconque des revendications 8 à 13, caractérisé en ce que la paroi biodégradable (100) est. d'une épaisseur déterminée.
15. Conteneur suivant la revendication 14, caractérisé en ce que la paroi (100) a une. épaisseur te 5 que l'échappement du contenu a lieu par biodégradation la paroi (100) en un délai compris entre 15 et 55 heure
16. Conteneur suivant la revendication 14 ou 15 ,
caractérisé en ce que l'épaisseur de la paroi est. compris entre 0,01 et 1 mm.
17. Conteneur suivant la revendication 6, caractérisé en ce qu'il est. associé à un dispositif de- maintien (220, 320, 420) apte à être fixé d'une manière, amovible au col de l'utérus du mammifère.
18. Conteneur suivant la revendication 17, caractérisé en ce qu'il est constitué par un tube (201) fermé a une de ses extrémités (203) dite inférieure par u 0 bouchon (204) formant, piston étanche, ce tube (201) étant solidarisé vers son extrémité inférieure (203) au dispositif de maintien (220, 230, 420) à la faveur d'un
- alésage longitudinal traversant (221, 421) de celui-ci.
19. Conteneur suivant la revendication 18, 5 caractérisé en ce que l'extrémité supérieure (212) du tub (201) est fermée par un bouchon (301) en matière biodégradable adapté à être expulsé lors de l'éjection du contenu par le déplacement du bouchon (204) .
20. Conteneur suivant l'une quelconque des o revendications 17 à 19, caractérisé en ce que le dispositif de maintien (220, 320, 420) comporte une première partie (222) apte à être, introduite dans le col de l'utérus et une seconde partie (223) apte à être disposée à l'extérieur du col et. en butée contre, celui-ci 5 la première partie (222) comportant un élément, extensible (222A) ayant une position de repos pour l'insertion dans le col et une deuxième position dans laquelle il s'appuie sur les parois internes du col de l'utérus.
21. Conteneur suivant la revendication 20, Q caractérisé en ce que l'élément extensible (222A) est. formé d'un matériau flexible à paroi mince apte à s'étendre radialement dans la deuxième position.
22. Conteneur suivant la revendication 20 ou 21 caractérisé en ce que l'élément extensible (222A) comport 5 au moins deux languettes (222B) sensiblement longitudinales, chaque languette ayant, une extrémité inférieure (222C) mobile et une extrémité supérieure
(222D) fixe longitudinalement par rapport au tube (201)
23. Conteneur suivant l'une quelconque des revendications 20 à 22, caractérisé en ce que le dispositif de maintien (220, 320, 420) comporte en out une partie mobile (223A, 423A) pour contrôler la positi longitudinale de l'extrémité inférieure (222C) de l'élément extensible (222A) et une partie fixe (222E, 422E) par rapport au tube (201) sur laquelle la parti mobile (223A, 423A) est adaptée à se déplacer. 24. Conteneur suivant la revendication 23, caractérisé en ce que la partie fixe (222E, 422E) et l partie mobile (223A, 423A) comportent des pas de vis complémentaires (207, 207A, 431, 436) pour permettre à partie mobile (223A, 423A) de tourner et de se déplace longitudinalement par rapport, à la partie fixe (222E, 422E) .
25. Conteneur suivant la revendication 24, caractérisé en ce que les pas de vis (431, 436) sont su une surface externe de la partie fixe (422E) et sur une surface interne d'une douille (435) de la partie mobile (423A) .
26. Conteneur suivant la revendication 23 ou 24, caractérisé en ce que 3a partie mobile (223A)comporte un molette (208) formant écrou sur une extension longitudinale (224) de la partie fixe (222E) appartenant ladite première partie (222) du dispositif de maintien (220, 320), extension (224) qui comporte sur une surfac externe le pas de vis complémentaire (207) à celui (207A de la molette (208) . 27. Conteneur suivant l'une quelconque des revendications 20 à 26, caractérisé en ce que l'extrémit supérieure (222D) de l'élément extensible (222A) est fix à une bague soudée (211) au tube (201) .
28. Conteneur suivant l'une quelconque des revendications 20 à 26, caractérisé en ce que l'extrémit supérieure (222D) de l'élément extensible (222A) est attachée à l'extrémité supérieure de 3 ' extension (224) d
la partie fixe (222E) .
29. Conteneur suivant, l'une quelconque des revendications 23 à 28, caractérisé en ce que le tube (201) a une collerette (450) à son extrémité inférieure (203) .
30. Conteneur suivant, l'une quelconque, des revendications 23 à 29, caractérisé en ce que la partie fixe (222E) comporte, un alésage (226) de diamètre supérieur au diamètre au tube (201) pour recevoir un dispositif poussoir (500) adapté à déplacer le. bouchon (204) vers l'extrémité supérieure (202) du tube.
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