, 2 Résultats : potentiel des NPs Fe pour augmenter le dépôt de dose lors d'une irradiation
, 169 7.2.2 Expérience 2 : test clonogénique et suivi MTT, Expérience, vol.1
, 173 7.3.2 Dépendance du SER mesuréà la concentration en NPs Fe dans le milieu de culture
, Conséquences de l'internalisation des NPs Fe par les cellules : quel impact sur la survie cellulaire après irradiation ?
, Influence du protocole d'irradiation : irradiation en plaques, p.179
, 181 7.3.6 Irradiation de cellules exposées aux agents de contraste au Gd : augmentation de dose ou radiosensibilisation ?
, 187 7.4.1 Test ATP-lite et suivi IncuCyte
,
, 214 10.2.1 Résultats : expérimentation de la migration des lignées de Mo/Ma commerciales dans la tumeur 9L chez le rat Fischer
, 217 10.3.2 Résultats : injection intratumorale de Mo/Ma primaires chez le rat Fischer porteur de tumeur 9L
, 221 10.4.3 Nombre de Mo/Ma nécessités pour transporter une quantité suffisante de composés dans les tumeurs
, Origine des Mo/Ma endogènes recrutés sur les sites d'inflammation
, 230 11.1.2 Imagerie IRM et détection indirecte de la présence de NPs Fe, p.231
, 3 Résultats : ouverture locale de la BHE chez le rat sain ou porteur de tumeur F98 pour améliorer la répartition des NPs Fe, La motivation : uneétude pilote sur deux rats sains, p.235
, 236 11.3.2 Injection des NPs Fe par voie intraveineuse après ouverture de la BHE chez le rat sain
,
, 242 11.4.6 Possibilité de transfert de cette méthodeà l'accumulation d'un agent de contraste au Gd
,
, Mesure de la taille par Dynamic Light Scattering
, Mesure de la concentration par tomographie X synchrotron, p.291
, 3.4 Impact de l'exposition des NPs Fe sur les cellules, vol.294
, Mesures de la masse de fer internalisée par ICP, p.296
, 5.1 Imagerie SR-XRF sur la ligne ID-16
, Localisation des NPs par TEM dans les cellules
, Ouverture de la BHE par ultrasons
, Nous avons montré que, dans les conditions expérimentalesétudiées, seulement une petite fraction des monocytes/macrophages injectés en intraveineuse parvientà migrer dans la tumeur. De plus, injectés en intra-tumoral, les monocytes/macrophages ne se répartissent pas de façon homogène dans la tumeur. Les distributions de NPs obtenues par la méthode Cheval de Troie dans les conditionsétudiées ne sont pas encore optimales, limitant ainsi les bénéfices thérapeutiques que l'on pourrait espérer lors de la radiothérapie, Enfin, une méthode d'ouverture locale et réversible de la BHE par ultrasons á etéétudiée au cours d'études pilotes : les résultats sont encourageants et ouvrent de nouvelles perspectives pour la distribution de composés thérapeutiques dans les gliomes
, Description des cellules gliales associées aux systèmes nerveux central et périphérique, vol.18
, Origine schématique des cellules gliales et des cellules tumorales qui en dérivent, d'après
, L'astrocyteétablit un lien entre les neurones et les vaisseaux sanguins (d'après l'illustration de Sylvie Dessert)
, Amer 18]), Pourcentage des différents types de gliomes dans les tumeurs cérébrales (figure réalisée d'après
, , p.25
, Protocole de Stupp, p.26
, Courbes de survie des patients ayant reçu : A) les meilleurs soins conventionnels possibles mais ni radiothérapie, ni chimiothérapie, B) BCNU (chimiothérapie), C) radiothérapie, ou D) BCNU et radiothérapie
, Il existe u? equilibreà trouver entre le contrôle tumoral et les complications suite aux dommages au tissu sain, Relation entre la dose délivrée et les conséquences de la radiothérapie
, Schéma de synthèse : quelques cibles et processus de résistance du GBM ainsi que des exemples de thérapies associées
, Techniques thérapeutiques fondées sur l'utilisation d'autres sourcesénergétiques que les rayons X (figure réalisée d'après [Wang 15, Son 16])
, Selon la phase du cycle cellulaire, la cellule est plus sensible ou plus résistante aux rayons X
, , p.38
, La radiothérapie par modulation d'intensité (IMRT) permet d'adapter la forme du faisceauà chaque incidence au profil de la tumeur
, En B : le Gamma Knife est constitué d'une couronne de sources de Cobalt 60 qui délivrent des faisceaux de rayons gamma se focalisant sur la tumeur (source : Mayo Foundation for Medical Education and Research), OrthoSpineNews)
, Domaines de prédominance des effets Compton, photoélectrique et production de paires en fonction de l'énergie des photons X et du numéro atomique des atomes rencontrés. Figure tirée de, Schéma résumé des interactions lumière-matière : (A) pas d'interaction
, Coster-Krönig, super Coster-Krönig), Schéma résumé : relaxations radiatives et non radiatives (électrons Auger
, Schéma résumé des interactions lumière-matière ainsi que les phénomènes de relaxation et de freinage qui
, Coefficients d'atténuation massique µ/? et d'absorption enénergie µ en /? de l'eau et du fer (A) ou de l'eau et du Gd (B) selon les données issues du NIST XCOM, p.51
, Les principaux types de lésion de l'ADN, figure réalisée d'après, p.55
, Schéma illustrant les dommagesà l'ADN causés par des radiationsà haut ou bas TEL
, A gauche : déroulement de la réponse cellulaire aux dommages de l'ADN. Les groupements "P" montrent la phosphorylation des protéines par les kinases de transduction (en jaune) ou effectrices (en marron). D'après, p.57
, Déroulement des phases physique, chimique et biologique décrivant les processus par lesquels uneémission de photons mèneà la mort cellulaire. Figure tirée de, p.59
, Coefficients d'atténuation massique de l'eau, de l'iode, du gadolinium et du platine en fonction de l'énergie d'irradiation, d'après
, Adam 03a, Adam 06, Adam 03b, Bist 04, Rous 07b, Rous 07a, Rous 09b, Rous 09a, Synthèse desétudes in vitro et in vivo de SSRT au sein de l'équipe RSRM. Les références sont, dans l'ordre, vol.10
, Synthèse d'études de "photoactivation" des NPs in vivo, d'après
, Les publications relatives sont les suivantes, vol.12
, Evolution de la croissance tumorale de tumeurs CT26 sous cutanées chez la souris avec ou sans injection de NPs Fe 3 O 4 suivie d'une irradiation de 7.1 keVà 10 Gy [Choi 12a]
, Schéma illustrant deux phénomènes physiquesà l'origine de l'émission d'électrons secondaires lors de l'interaction NPs -rayonnement X : l'effet photoélectrique et la relaxation atomique
, En gris : références utilisant les mêmes NPs Fe que celles utilisées pendant ces travaux de thèse, Synthèse d'études in vitro utilisant des NPs Fe pour augmenter le dépôt de dose dans les cellules tumorales. Dans l'ordre, les références sont, vol.13
, Schéma illustrant les composants de la Barrière Hémato-Encéphalique : les cellules endothéliales sont reliées entre elles par les jonctions serrées. La glia limitans participè a la régulation de la perméabilité de la BHE. D'après [Stam 10], p.74
, étude post-mortem de l'utilisation des NPs magnétiques pour la thérapie du GBM, zones contenant des agrégats de NPs magnétiques, p.76
, ) utilisation de cathéters pour délivrer directement les médicaments, Exemples de stratégies employées pour atteindre les tumeurs cérébrales malgré la présence de la BHE : (1) augmenter la capacité du médicamentà passerà travers la barrière, 2012.
, A) Les composés sont injectés dans la tumeur par placement d'un cathéter. La distribution des composés qui en résulte permet un meilleur recouvrement tumoral qu'une injection intratumorale simple (B). D'après
, Schéma illustrant les deux polarisations principales des macrophages (M1 et M2) ainsi que les propriétés spécifiquesà chaque polarisation
, Schéma résumant les principales fonctions des TAMs. Figure adaptée de, vol.14
, ) La MRT attire plus de macrophages (marquage ED1, en rouge) dans le gliome de rat que l'irradiation en faisceau plein (Serduc et. al ), Infiltration de macrophages dans les tumeurs cérébrales après irradiation
, ordre, les références : [Choi 12c, Choi 12b, Choi 12d, Mads, vol.13
, Délivrance d'ultrasons non focalisés sous l'os du crâne pour augmenter la perméabilité de la BHE suiteà une injection de microbulles afin de favoriser la distribution de composés chimiothérapeutiques dans les tumeurs cérébrales. Le transducteur utilisé (SonoCloud) (B)émet des ultrasons pulsés de basse intensité. Figures tirées de [Carp 16]
, Schéma illustratif de la stratégie d'augmentation de dose délivrée aux tissus tumoraux par accumulation d'atomes lourds dans la tumeur
, Schéma décrivant le principe général de la thérapie utilisant les macrophages comme Chevaux de Troie. Figure adaptée de
, 106 4.2 (A) Notation des interactions (ICOL) dans le code Monte-Carlo PENELOPE. (B) Notation des couchesélectroniques dans le code Monte-Carlo PENELOPE, Schéma illustrant la dénomination des couchesélectroniques dans le logiciel de simulation Monte-Carlo PENELOPE pour décrire l'origine du photoélectron (à gauche) et desélectrons de relaxation (à droite)
, Les atomes lourds sont répartis de façon homogène dans le volume considéré. (B) Evolution du DEF simulé en fonction de la concentration des composés dans le milieu. Les incertitudes sur les DEF calculés par simulation sont de l'ordre de 10 ?3, Evolution du DEF simulé en fonction de l'énergie d'irradiation pour diverses concentrations de Fe
, Spectre enénergie des photons et desélectrons secondairesémis hors d'une NP d'oxyde de fer Fe 3 O 4 de 50 nm de diamètre lors d'une irradiationà 30 keV, p.110
, Spectre enénergie des photons et desélectrons secondairesémis hors d'une NP d'oxyde de fer Fe 3 O 4 de 50 nm de diamètre lors d'une irradiationà 6, 8, 10, 30, 51 ou 80 keV. Le spectre relatifà l'irradiation d'une NP identique remplie d'eau est donnéeà titre comparatif
, La NP est irradiéeà différentesénergies (6, 7.12, 8, 10, 30, 51 et 80 keV) et les spectres des particules secondaires sont mesurés a différentes distances radiales (50 nm, juste en surface, puis 325 nm, 700 nm, 5 µm, 30 µm). Le faisceau est ponctuel et traverse la NP en son centre, p.113
, Parcours desélectrons sur le plan normalà l'irradiation suiteà l'irradiation d'une NP de 50 nm de diamètre remplie d'eau ou de ferà 100 mg/mL. Lesénergies d'irradiation sont 6, 8, 30, 51 et 80 keV. L'échelle de couleur représente l'énergie desélectrons en eV. En médaillon en hautà droite :électrons de plus faibleénergie, probablement lesélectrons de relaxation
, Données provenant du NIST. (2) Parcours moyen d'unélectron dans l'eau pour desénergies cinétiques comprises entre 0.1 eV et 10 keV, Parcours moyen d'unélectron dans l'eau (en µm) pour desénergies cinétiques initiales comprises entre 10 et 100 keV
, Nombre d'interactions subies par lesélectrons sortant d'une NP de 50 nm de diamètre remplie d'eau ou de 100 mg(Fe)/mL pour une distance radiale comprise entre 0 et 100 µm (à l'échelle de plusieurs cellules). La NP est irradiéeà différentesénergies (6, 8, 30, 51 et 80 keV). Le faisceau est ponctuel et traverse la NP en son centre, p.119
, A) tirée d'une de leurs publications [Kim 10b] et (B) réalisée lors de ces travaux de thèse, Observations TEM des NPs Fe de l'équipe coréenne
, Quatre conditions de sonications ontété testées : vortex pour homogénéiser, sans sonication (A et E), une sonication la veille de 15 minà 80% (B et F), trois sonications la veille de 15 minà 80% (C et G), et une sonication la veille 15 minà 80% après quatre sonications identiques réparties la semaine précédente (H et F), Distribution des diamètres (en intensité) des NPs mesurée par DLS pour deséchantillons de NPs Fe coréennes, diluées dans l'eau
, Cette mesure ne donne pas de barre d'erreur mais la fiabilité de la mesure est décrite par l'indice de polydispersité. Les mesures sont déclarées fiables par l'algorithme pour les mesures de diamètre de NPs dans l'eau uniquement. (B) Valeur du pic de la distribution de taille pondérée en intensité des NPs Fe diluées dans de l'eau. Les barres d'erreur représentent l'écart type du diamètre en nm. (C) Valeur des deux premiers pics de la distribution de taille pondérée en intensité des NPs Fe diluées dans du milieu complet. Les barres d'erreur représentent l'écart type du diamètre en nm pour chaque pic, Mesure de la taille des NPs Fe de l'équipe coréenne par DLS suivant différents algorithmes : (A) Z-average dans l'eau ou dans le milieu complet avec ou sans sonication
, Mesure par DLS de la taille des NPs Fe coatées en alginate synthétisées par l'équipe de
, Distribution pondérée en intensité de la taille des composés présents dans le DMEM complet seul (mesure par DLS)
, Comparaison des concentrations calculéesà partir de la concentration de la solution mère indiquée par l'équipe coréenne avec les concentrations mesurées par ICP-MS pour plusieurs dilutions de la solution de NPs Fe
, Pour une même concentration de NPs dans le milieu, les cellules en culture dans un puits de plaque 96 puits "rencontreront" plus de NPs que les cellules en culture dans une flasque T25 : en 24 h, les NPs auront sédimenté et se seront accumulées sur le tapis cellulaire, p.134
, A) Table deséquivalences volume/surface selon le type de récipient de culture cellulaire utilisé. (B) Exemples de concentrationséquivalentes pour plusieurs types de récipients de culture cellulaire, vol.8
, Observation des cellules F98 au microscope optique après exposition pendant 24h aux NPs Fe de l'équipe coréenne
, Masse de fer internalisée par cellule après une exposition pendant 24 h aux NPs Fe coréennes, mesurée par ICP-MS. Exposition de cellules de gliome 9L (A) et F98 (B) aux NPs Fe non soniquées. (C) Exposition des F98 aux NPs soniquées. (D) Résultats présentés dans l'article de l'équipe coréenne exposant des cellules CT26 aux mêmes NPs Fe
, Observation au microscope optique (40x) de F98 après exposition aux NPs Fe coréennes (non soniquées) pendant 24hà 0.3 mg(Fe)/mL
, Images caractéristiques de cellules F98 après exposition pendant 24 h aux NPs Fe de l'équipe coréenne (soniquées) observées sur ID-16 par SR-XRF (concentrations d'exposition : [gauche] 0.02 mg/mL ; [droite] 0.06 mg/mL)
, Observation du comportement des cellules F98 en live imagingà intervalles réguliers pendant approximativement 12 h. (A) Cellules témoin. (B) Cellules exposéesà 0.3 mg(Fe)/mL de NPs Fe de l'équipe coréenne non soniquées
, non) pendant 24h aux NPs Fe coréennes soniquées (C2=0.06 mg(Fe)/mL et C3=0.15 mg(Fe)/mL). Images représentatives des triplicats réalisés pendant l'expérience
, Distribution des cellules F98 dans le cycle cellulaire après exposition pendant 24h aux NPs coréennes soniquées (0.06 et 0.15 mg/mL)
, Les cellules de gliome 9L internalisent les NPs Fe présentes dans un certain périmètre autour de leur
, Masse de fer internalisée par cellule (A) 9L ou (B) F98, après une exposition pendant 24 hà différentes concentrations de NPs Fe FerInject, mesurée par ICP, p.148
, Comptage du nombre de cellules F98 par flasque après exposition pendant 24 h aux NPs Fe coréennes soniquées (N=3). Concentrations : 0.02 et 0.06 mg(Fe)/mL, p.150
, Synthèse bibliographique d'articles traitant de l'arrêt en phase S. Les références sont, dans l'ordre alphabétique, vol.17
, Quelques conséquences possibles de l'exposition des NPs d'oxyde de fer sur les cellules. D'après, vol.10
, Observation de cellules F98 au microscope optique après exposition pendant 24 h aux NPs Fe coréennes et réensemencement dans des flasques de culture. Concentration : 0.06 mg(Fe)/mL. Les cellules ontété trypsinéesà J+1. Faire
, 14 (A) Prolifération des F98 et 9L suiteà l'exposition pendant 24 h aux NPs FerInject pour différentes concentrations (mesures en triplicat). (B) Comptage du nombre de cellules F98 par flasque après exposition pendant 24 h aux agents de contraste Magnevist et Dotarem (N=3). Concentration : 5 mg(Gd)/mL
, Masse de Gd internalisée par les cellules F98 après exposition aux agents de contraste au Gd Magnevist et Dotarem (10 mg(Gd)/mL) pendant différentes durées (mesures ICP-MS, triplicats)
, Les différentes cartes n'ont pas la mêmé echelle : l'objectif de cette figure est de montrer la distribution intracellulaire du Gd pour plusieurs conditions d'exposition. [Vert] : soufre, gadolinium. L'échelle de couleur est différente selon les conditions, de manièreà rendre visibles les vésicules remplies de Gd dans les cellules exposées aux plus basses concentrations, p.157
, C2 = 10 mg/mL et C3 = 5 mg/mL. (B) Cartographies de la répartition du Zinc réalisées par fluorescence X sur ID-16, pour ces cellules F98 exposéesà 10 mg/mL de Dotarem pendant 48h, 17 (A) Masse de Gadolinium intracellulaire mesurée par analyse ImageJ des images obtenues sur ID-16 par fluorescence X. Des F98 ontété exposées pendant 24 h ou 48 hà différentes concentrations de Dotarem (D) ou de Magnevist (M) : C1 = 0.5 mg/mL
, Set-up d'irradiation des plaques 96 puits sur la ligne ID-17 (SSRT), p.163
, Exemple de courbe de survie cellulaire ajustée avec le modèle linéaire quadratique, vol.164
, Courbe de survie de cellules F98 irradiéesà 50 keV avec (rond rouge) ou sans (carré noir) pré-exposition de 48hà 10 µM d'IUdR, vol.10
, Deux méthodes de mesure de la survie y sont illustrées, p.166
, Test de clonogénicité : cellules contrôle et cellules traitées
, A) plaque avant le point de mesure de J8 ; (B) plaque après dissolution des cristaux de formazan dans le DMSO
, Exemple de courbe de prolifération obtenue par mesure MTT et ajustée avec une sigmoïde sur le logiciel PRISM. Les différents paramètres issus du fit sont explicités : hillslope, top et bottom, log(IC50)
, Schéma illustratif du protocole de mesure de la survie cellulaire suiteà une irradiation de rayons X monochromatiques, avec ou sans exposition préalable aux NPs Fe. Les deux protocoles de mesure de la survie MTT et test de clonogénicité sont effectués en parallèle pour caractériser le lien entre les deux méthodes, p.169
, Résultats du test de clonogénicité suiteà l'irradiation de cellules F98à 30, 51 ou 80 keV (dose délivrée : 4 Gy) ou sans irradiation (toxicité), p.170
, Les cellules ontété exposées (ou non) aux NPs Fe de l'équipe coréenneà différentes concentrations (C1 = 0.02 mg/mL et C2 = 0.06 mg/mL) pendant 24h avant l'irradiation (dose déposée : 4 Gy). Les cellules ontété irradiées avec un faisceau monochromatique auxénergies suivantes : (A) 30 keV, (B) 51 keV, (C) 80 keV, (D) cellules non irradiées, Suivi par tests MTT de la prolifération des cellules F98 aux différentes condition? etudiées
, Les cellules ontété exposées (ou non) aux NPs Fe de l'équipe coréenneà différentes concentrations (C1 = 0.02 mg/mL et C2 = 0.06 mg/mL) pendant 24h avant l'irradiation (dose déposée : 4 Gy,énergie du faisceau : 30, 51 ou 80 keV). (A) Décalage temporel mesuré entre les cellules traitées aux NPs Fe et les cellules non traitées. La toxicité n'est pas prise en compte dans la mesure du décalage des cellules traitées irradiées. (B) Pente (hillslope) mesurée selon la conditionétudiée, Suivi par tests MTT de la prolifération des cellules F98 aux différentes condition? etudiées, p.171
, Les cellules ont eté préalablement exposéesà deux concentrations de NPs Fe de l'équipe coréenne (C2=0.06 mg/mL et C3=0.15 mg/mL) pendant 24h, ouà du milieu de culture complet (cellules contrôle), Résultats du test de clonogénicité suiteà l'irradiation de cellules F98à 30, 51 ou 80 keV (dose délivrée : 4 Gy) ou sans irradiation (toxicité)
, Les cellules ontété exposées (ou non) aux NPs Fe de l'équipe coréenneà différentes concentrations (C2=0.06 mg/mL et C3=0.15 mg/mL) pendant 24h avant l'irradiation (dose déposée : 4 Gy,énergie du faisceau : 30, 51 ou 80 keV). (A) Décalage temporel mesuré entre les cellules traitées aux NPs Fe et les cellules non traitées. La toxicité n'est pas prise en compte dans la mesure du décalage des cellules traitées irradiées. (B) Pente (hillslope) mesurée selon la conditionétudiée, Suivi par tests MTT de la prolifération des cellules F98 aux différentes condition? etudiées, p.173
, Résultats du test de clonogénicité suiteà l'irradiation de cellules F98à 30, 50 ou 80 keV (dose délivrée : 4 Gy) ou sans irradiation (toxicité). Les cellules ontété préalablement exposéesà deux concentrations de NPs Fe de l
, mg/mL [rouge]) pendant 24h
, Evolution du SER mesuré par clonogénicité selon la masse de fer internalisée par les cellules (mesures ICP-MS sur unéchantillon de cellules provenant de l'expérience)
, Le lot 1 de NPs correspond aux NPs utilisées dans l'expérience 1 et le lot 2 aux NPs utilisées dans l'expérience 2. Les deux lots sont des lots de NPs Fe de l'équipe coréenne, fournis moins de trois mois avant chaque expérience. Les NPs ontété préablement soniquées avant expositions aux cellules
, Schéma illustratif du protocole de mesure de la prolifération cellulaire par suivi MTT avec irradiation des cellules F98 en plaques. Les cellules ont préalablementété exposées (ou non) aux NPs Fe de l'équipe coréenne (0.06 mg/mL) pendant 24h, p.179
, Suivi par tests MTT de la prolifération des cellules F98 avec le protocole d'irradiation des cellules en plaques. Les cellules ontété exposées (ou non) aux NPs Fe de l'équipe coréenneà une concentration de 0.06 mg/mL pendant 24h avant l'irradiation (dose déposée : 4 Gy ;énergie du faisceau : 30 keV)
, Les cellules ontété exposéesà deux concentrations de NPs Fe de l'équipe coréenne (0.02 ou 0.06 mg/mL) pendant 24 h. (B) DEF macroscopique correspondant simulé par méthode Monte Carlo, selon le protocole décrit dans la section 4.1.3.1. Les incertitudes sur les DEF calculés par simulation sont de l'ordre de 10 ?3, p.181
, 182 TABLE DES FIGURES 7.19 Comparaison entre le DEF macroscopique simulé liéà la masse de fer internalisée par cellule (A) et le DEF expérimental obtenu par ajustement du SER mesuré avec le modèle LQ (méthode tirée de [Delo 17]) (B). Les incertitudes sur les DEF calculés par simulation sont de l'ordre de 10 ?3
, Les cellules ontété préalablement exposéesà deux agents de contraste au Gd ((A) Magevist ou (B) Dotarem)à la concentration de 5 mg(Gd)/mL pendant 24h, Résultats du test de clonogénicité suiteà l'irradiation de cellules F98à 50, 51 ou 80 keV (dose délivrée : 4 Gy) ou sans irradiation (toxicité)
, Magnevist ou Dotarem) pendant 24 h ouà la concentration (5 mg/mL) de Gd externe aux cellules pour la condition "cellules non rincées". Le DEF aété calculé par simulations Monte-Carlo selon le protocole décrit dans la section 4.1.3.1. Les incertitudes sur les DEF calculés par simulation sont de l'ordre de 10 ?3, DEF macroscopique correspondantà la concentration intracellulaire de Gd dans les cellules rincées après avoirété exposéesà 5 mg/mL d'agent de contraste au Gd, p.185
, Survie normalisée des cellules F98 après expositionà deux agents de contraste au Gd (Dotarem et Magnevist) pendant 24 h, mesurée par test, p.186
, Schéma illustrant l'utilisation des données obtenues par suivi MTT pour calculer la survie cellulaire
, Comparaison des SER obtenus lors des deux expériences présentées dans ce chapitre par tests de clonogénicité (A) ou par suivi MTT (méthode de Buch, Buch, vol.12
, Exemple d'images tomographiques obtenues avec le détecteur germanium, après injection d'agents de contraste par la veine de la queue
, Trois autres groupes ont aussi reçu un traitement par radiothérapie, consistant en une fraction de 20.8 Gy délivréeà 35 keV centrés sur la tumeur avec aucune NP Fe (X, n=5), une injection par CED (CED+X, n=10) ou une injection intraveineuse de NPs Fe (IV+X, n=10), Meier de survie des animaux porteurs de tumeur F98 après irradiation, avec ou sans injection préalable de NPs. Les rats ontété répartis dans 6 groupes : trois groupes non irradiés ont reçu soit aucune NP Fe (n=5)
, , p.202
, 1 (gauche) et RAW264.7 (droite) ayantété exposés pendant 24 h aux NPs FerInject (0.24 ou 2.4 mg(Fe)/mL) ou aux NPs de l'équipe coréenne (0.3 mg(Fe)/mL). Les flèches indiquent les vésicules contenant possiblement des NPs Fe
, Internalisation des NPs Fe FerInject par les macrophages J774A.1 en fonction de la concentration de fer dans le milieu de culture (exposition aux NPs Fe pendant 24 h
,
, ) des Mo/Ma de lignée J774A.1 et RAW264.7 après une exposition aux NPs Fe FerInject pendant 24 hà différentes concentrations de fer dans le milieu. Mesures par Bleu de Trypan, p.206
, Image TEM d'une cellule se divisant après internalisation de NPs Fe ?-Fe 2 O 3 . Les NPs sont partagées entre les deux cellules filles
, Déroulement de l'expérience in vivo pour l'étude de la migration des lignées cellulaires, p.215
, Déroulement de l'expérience in vivo pour l'étude de la migration des Mo/Ma primaires après injection en intraveineuse
, images en fluorescence (x40) de coupes de cerveaux de rats ayant reçu une injection en i.v. de Mo/Ma primaires marqués avec des microbilles ([bleu] : noyau des cellules / DAPI ; [vert] : microbilles marquant les Mo/Ma injectés). Les images ontété prises dans la zone tumorale
, Schéma illustratif d'une injection intra-tumorale de Mo/Ma primaires, p.218
, Déroulement de l'expérience in vivo pour l'étude de la migration des Mo/Ma primaires après injection intratumorale
, Ma primaires marqués avec des microbilles ([bleu] : noyau des cellules / DAPI ; [vert] : microbilles marquant les Mo/Ma injectés), (A) : 3 j après injection et (B) : 24 h après injection
, A) et (B) : images en transmission de coupe de cerveaux de rats ayant reçu une injection en intratumorale de Mo/Ma primaires marqués au FerInject. Les coupes ont subi une coloration du H&E, les cellules porteuses de Fe sont restées regroupées localement, p.220
, Image en fluorescence d'une coupe de rate de rat (x20) ayant reçu une injection en i.v. de Mo/Ma primaires marqués avec des microbilles, p.221
, 222 10.10Image en fluorescence de Mo/Ma primaires marqués au CFSE (vert) et au DAPI (bleu) illustrant l'irrégularité du marquage CFSE après quelques jours (x40), Tableau comparatif des différents marqueurs cellulaires utilisés pour retrouver les Mo/Ma injectés dans les coupes, adapté du travail de Mélanie Flaender, p.222
, 10.11Images en fluorescence de coupes de cerveaux de rats ayant reçu une injection en i.v. de Mo/Ma primaires marqués au Hoechst (canal DAPI) et au CFSE (expérience pilote). Les images ontété prises dans la zone tumorale ou dans le controlatéral, p.223
, FIGURES 11.13Quantité (normalisée par rapportà une NP de 5 nm) d'électrons Auger et de photoélectrons issus de la couche K sortant d'une NP Fe selon le rayon de cette NP. La NP aété irradiée par une source ponctuelle en son centre : cette courbe n'est donc pas indicative des conséquences de l'irradiation d'une NP entière, 10.12Tentative d'utilisation de la méthode FISH, sur une coupe de cerveau de ratte porteuse de tumeur F98 et ayant reçu des Mo/Ma par voie intraveineuse (marqués par des billes fluoresçantes en vert
, A.1 Structure et composition du FerInject R : le coeur métallique, de structure akaganéite
, Les images ont toutesété prises avec le microscope du laboratoire, Tableau récapitulatif des cellules tumorales utilisées
, Les cellules sont toutes issues d'ATCC. Les images ont toutesété prises avec le microscope du laboratoireà l'exception de celle des NR8383 (obtenue sur le site de ATCC), Tableau récapitulatif des monocytes/macrophages de lignée utilisés, p.270
, Schéma représentant la méthode de culture des monocytes-macrophages primaires issus de la moëlle osseuse retirée des tibias et fémurs de rats donneurs
, En suspension lors des premiers jours, les cellules deviennent peuà peu adhérentes au cours de leur maturation
, A.6 Différences entre les structures des agents de contraste Magnevist et Dotarem, d'après
, Tableau comparatif des modèles tumoraux utilisés. D'après
, En pratique, les propriétés d'un même modèle peuvent varier d'un laboratoireà l'autre : les caractéristiques des modèles F98, 9L et C6 présentées ici sont relatives aux modèles de l'équipe de Barth. Le modèle 9L de l'équipe RSRM (implantée sur la ligne ID-17) aété caractérisé par Audrey Bouchet et ne possède pas les mêmes propriétés que le modèle 9L de Barth et al
, Principe de fonctionnement du synchrotron (d'après une image provenant de esrf.eu)
, Ceux-ci rejoignent ensuite l'anneau de stockage où ils sont maintenusà 6 GeV, Après avoirété accélérés jusqu'à 200 MeV dans le Linac, lesélectrons sont acheminés dans le booster synchrotron où ils sontà nouveau accélérés jusqu'à 6 GeV, p.279
, Lesélectrons sont maintenu dans la trajectoire de l'anneau grâce aux aimants de courbure (A), tandis que leséléments d'insertion (B) permettent d'augmenter la brillance de la machine, p.280
, A.10 Différences entre les spectres issus du Wiggler d'ID-17 et d'un générateur X conventionnel,à 1m de la source. D'après
, Exemples de sphèreséquivalentes représentatives de différentes propriétés d'un objet 3D irrégulier. Figure adaptée du manuel du ZetaSizer Nano ZS, p.287
, Set-up de mesure de la taille d'une NP avec le Zetasiser Nano ZS. Figure adaptée du manuel du ZetaSizer Nano ZS
, Le coefficient de corrélation devrait toujours décroître avec le temps. S'il ne décroit pas, comme c'est le casà la fin de l'enregistrement par exemple, c'est le signe que d'autres phénomènes interviennent comme la sédimentation ou la convection (dans le cas où la température change au cours de l'expérience), p.289
, Principe de fonctionnement de l'analyse par DLS. Les hypothèses effectuées pour chaque mesure sont indiquées en italique. Schéma explicatif d'après les explications du manuel du Zetasizer Nano ZS
, Set-up de l'observation de la dynamique d'internalisation des NPs Fe par les cellules F98 en live imaging sur la plateforme M4D de l'IBS
, Répartition usuelle des cellules dans le cycle cellulaire lors d'une mesure par cytométrie
, Méthode d'analyse deséchantillons par SR-XRF sur la ligne ID-16, p.299
, Fixer les cellules sur des membranes spécifiques permet d'étudier la distributio? elémentaire de ceséchantillons sur la ligne ID-16
, Représentation schématique de la membrane utilisée pour les expériences sur ID16, p.300
, Tableau résumant les principaux types d'astrocytomes ainsi que leur grade et leur fréquence
, Tableau résumant les principales limites des traitements actuels utilisés pour le Protocole de Stupp
, Rendement de formation des lésions lors d'une irradiation, p.55
, Récapitulatif des principaux intérêts et inconvénients des thérapies locales et systémiques, d'après
, Survie des rats selon les traitements : survie médiane, pourcentage d'augmentation de la survie médiane par rapport aux témoins : ILS % = (Survie -Survie témoins)
, / Survie témoins et valeur du test Log-Rank par rapport aux témoins et par rapport aux X seuls selon les groupes
, Ces concentrations sont des concentrations réalistes par rapportà ce qu'il est possible d'obtenir in vivo (pour le Gd et l'I) ou in vitro dans les cellules, p.208
, Energy transfer and energy absorption in photon interactions with matter revisited : A step-by-step illustrated approach, Radiation Physics and Chemistry, vol.79, issue.5, p.312, 2010.
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